高倉文太（Takakura Bunta）
生日：2月6日
年齡：48
血型：O型
身高：178cm
體重：65kg
星座：水瓶座
稱呼：老大(小新叫法)、黑道炒地皮的、組長(日本黑道老大的稱呼)
出生地：四國(日本第一黑幫"山口組"的總部)
職業：幼稚園園長
特點：喜歡吐槽，腹黑(面對誤會時)
特長：寫書法，模仿影視劇中的黑幫老大
偉大事跡：憑藉組長的外號，無數次嚇跑壞蛋
人物形象：穿黃色格子的衣服和褲子，戴著棕色的眼鏡，還長有黑色的短捲髮與小鬍渣。看起來相貌十分可怕，甚至微笑的時候會讓人感到恐怖，園長也為此十分苦惱。
不過啊，雖然園長大人相貌可怕，但他確是個老好人，決心投入幼教事業是在東京念大學時。有次迷路時問路被路人當作壞人企圖襲擊他們，因而在數次被人懼怕後在某個地方意志消沉地坐著發呆，但當時有位小朋友看出他內心的善良，送他糖果，受到感動的他因而在畢業後投入幼教事業。
小新稱其為"組長"或"老大"，是因為其相貌恐怖。自從他得到了這一綽號，誤會他是老大的鬧劇無數，但另一方面，他多次擊退惡人，保護了小新等小朋友的安全，受到了大家的尊重與愛戴。
上尾真澄（上尾ますみ）
生日：2月23日
年齡：23
血型：A型
星座：水瓶座
稱呼：上尾老師、上尾義美、上尾真須美、上尾真美、上尾增美、上尾益美、上尾澄
愛好:電腦，設計個人主頁(但糾結於無人來訪)，各種甜甜圈，吃湯泡飯。
特點：膽子很小，但在某一次因小新的幫助下，被流氓推倒，眼鏡也掉下，然後釋放出了自己的勇氣。從此拿下眼鏡就變得很大膽，說出真心話。曾親眼看到過酢乙女愛的保鏢黑磯先生的真面目，讓她動了心，暗戀黑磯，兩人處於比較好的一面。也曾被小新形容說摘下眼鏡的話是個大美女。
技能：在雙葉幼稚園遭受危機時，會摘下眼鏡，瞬間發飆。常常被說成具有"雙重人格"。(由於看不清而不再羞於表達出內心的真實想法。
吉永綠（結婚後叫石板綠）
年齡：24歲
血型：O型
稱呼:吉永老師、阿綠、小綠綠(去澳洲度蜜月小新叫的)
配偶姓名:石坂純一
配偶年齡:28歲
結婚年齡:24歲
身材:較瘦
最高興的事:和石坂先生約會、到幼稚園教同學們上課（就算總是被小新惹毛，可是還是熱愛教育事業）
血型:O型(見665集)
最喜歡的人:石坂純一
最害怕的事:和老公吵架、在約會的路上遇見小新、在度蜜月時見到小新、變胖
職業:雙葉幼兒園向日葵小班老師
特長:攀巖(學生時代曾是攀巖社學員)
特點：是一個有愛心、善良的老師，很受小孩子喜歡。她不像上尾真澄老師那樣性格膽小，也不像松坂梅老師那樣虛榮。
松坂梅（まつざか梅）
稱呼：松坂老師、阿梅、小梅、種田公主、豔陽下的銅像美人魚
生日：11月10日
年齡：24
血型：AB型
星座：天蠍座
身高：157.5cm
職業：雙葉幼稚園玫瑰班老師
前男友：行田德郎(已遇難)
現男友：獵捕中
好友：吉永綠（雖然總是較勁）、上尾真澄、高倉文太等
最高興的事:找到男朋友、有錢、能買上高級貂皮大衣、不用再住那種寒酸的公寓……
最喜歡的事:談戀愛、遇見帥哥、和吉永綠吵架
最喜歡的顏色:深紫色
最害怕的事:約會或逛街的路上遇見小新、失戀
好啦，老師們介紹到這裡咯！
最後一張松阪老師發飆的動圖哈哈哈哈哈！