作者：燕子李三
可能很多朋友一看到反應曲線這四個字的時候，都有一種抗拒心理，覺得這個太難了，看不懂。其實吧，看懂生化反應曲線沒想像中的那麼難。
1.反應曲線是什麼？
炒菜，應該大家都會吧？其實，生化項目的檢測過程跟炒菜比較相似，炒菜的基本流程是：放油→放菜→放鹽，如果每隔18秒，對菜的味道進行打分並記錄，再把各個點連接繪成一條曲線的話，炒菜的反應曲線大致是這樣的，見下圖：
如果只是把油→菜→鹽，按順序放進鍋裡，這一鍋菜應該是沒法吃的，對吧？至少得在放油、菜、鹽的時候用鍋鏟攪拌混勻一下，對吧？於是炒菜的反應曲線變成了這樣，見下圖：
那麼，對應的生化項目檢測(以奧林巴斯AU系列為例)是這樣的：首先，儀器會向反應杯加入試劑1(R1)，緊接著加入樣本(S)， 攪拌混勻，3分鐘後加入試劑2(R2)，攪拌混勻。在這個過程中，儀器會每隔18秒測試一次吸光度並記錄，總共28(0-27)個點，然後連接成線，就是我們所看到的反應曲線，見下圖：
所以，反應曲線是項目檢測整個過程的記錄，相當於是一個靜態的錄像。
2.反應曲線怎麼看？
在整個檢測過程中，試劑1(R1)、樣本(S)、試劑2(R2)加入以及攪拌的時間點都是固定的。我們知道了反應曲線是怎麼來的之後，需要知道什麼樣的曲線算正常。
一般正常的反應曲線：a.比較平滑，無明顯的跳點；b.加入R2前後吸光度會發生明顯的變化(低濃度樣本除外)；c.終點法的反應曲線，會有一段曲線的吸光度基本無變化；d.速率法的反應曲線，基本成一條直線(兩點速率法除外)。
生化的反應曲線可以分為終點法和速率法兩大類，以下列舉了一些正常的反應曲線供參考：
1) 終點法的反應曲線：
反應到達終點後反應混合物的吸光度不再變化(R1主要用於消除幹擾，R2加入之後，反應啟動)，就像你炒好的菜在一段時間內味道是不變的。如下圖：
2) 速率法的反應曲線：
隨著反應的進行，吸光度越來越大，但速率保持不變，R2之後基本成一條直線，無明顯跳點(兩點速率法除外)，如下圖：
註：上圖在加入R2之前為虛線，是因為R1+S的體積小於儀器要求的最低的反應總體積。
我們在看反應曲線的時候，眼裡是一條曲線，腦袋裡面浮現的應該是整個的檢測過程，去還原儀器的動作，分析從什麼時候吸光度突然變得異常。你可以想像成這盤菜是怎麼炒出來的。
3.反應曲線有什麼用，什麼時候用得著？
1)結果出現負值(終點法項目)：
a.反應曲線有可能是一條直線，樣本或R2有可能沒有加入；
b. R2加入之前的吸光度比加入後還高，試劑1和試劑2位置放反或者嚴重脂血標本。可結合前一篇文章一起看：生化結果為什麼會出現負值？出現負值了怎麼辦？。
2)結果明顯偏低(速率法項目)：反應曲線可能變成了類似於終點法的曲線，也就是我們通常說的底物耗盡，需要稀釋重測。
3)試劑過期或汙染、攪拌棒破損、攜帶汙染以及衝洗站滴水也會在反應曲線上有所體現。
4)總之，在結果比較可疑的情況下，可以調出反應曲線看看是否正常，有助於找出問題所在。
4.注意事項：
1)不同廠家或型號的儀器，加入樣本和試劑的順序可能不同，比如，日立是S+R1+R2。
2)部分儀器橫坐標是直接用時間表示，比如貝克曼LX/Dxc系列用的是秒，另外LX/Dxc系列的加樣順序有可能是R1+S+R2或者R1+R2+S。
3）部分儀器沒有把各個點連接起來，所以看到的是由點組成的曲線。
4)看反應曲線時，注意縱坐標的刻度，就像遠看是美女，近看就不一定了。
5)反應曲線界面還可以看到很多的信息，比如：光電校正、試劑空白、定標的時間以及每一點的吸光度，這些都會有助於判斷結果異常的原因。所以，你應該已經意識到，當有人問為什麼某項目的結果偏低、不正常時，僅憑一個結果是很難判斷的。
5.其他：
臨床醫生在診斷病情時一般會參考各科的檢驗報告單，反應曲線相當於是檢驗科判斷結果準確性的「檢驗報告單」。在遇到可疑的結果時，建議大家調出反應曲線看看。另外，其他儀器也有類似的功能，比如：糖化有層析圖，血球儀有散點圖等。希望大家能夠用好各種儀器提供的「檢驗報告單」，提高工作效率。
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