【AbMole科研快報】建立模型以評估表達多細胞角蛋白19的細胞

2020-12-03 騰訊網

AbMole精研抑制劑十年，最新的科研動態不斷與您分享。本期與您分享的是：多細胞角蛋白19的細胞在多能基質細胞誘導的胰島再生過程中的作用評估模型。

以前，人骨髓源性多能基質細胞（hMSC）中Wnt信號的藥理活化產生了條件培養基（CM），該培養基促進了鏈脲佐菌素處理的小鼠中β細胞的再生。導管損傷的內分泌祖細胞已被證明可在胰腺損傷後產生β細胞，是「信號接收細胞」的候選者。通過純化活的Dolichos Biflorus凝集素凝集素+細胞並在添加了未經處理，受Wnt激活或受Wnt抑制的CM的基本培養基中培養而獲得的來自胰腺小鼠的導管（CK19 +）細胞顯示，在48小時後，EdU + / CK19 +細胞的比例顯著增加補充，但沒有內分泌表型獲得。用他莫昔芬（單劑量）治療的譜系追蹤CK19-CreERT; Ai9（RCL-tdT）小鼠表現出胰腺CK19 +細胞的特異性標記。鏈脲佐菌素治療（60 mg / kg /天，5天）導致β細胞質量，胰島密度和胰島素+細胞頻率降低，以及葡萄糖耐量降低和胰腺白細胞浸潤增加。該模型將在以後的研究中用於在hMSC CM誘導的胰島再生過程中沿襲追蹤CK19 +細胞的貢獻。

GSK-3α和GSK-3β抑制劑CHIR-99021(Abmole, M1692，純度>99%) ，在本研究中用於驗證CHIR99021和IWR-1對hMSC細胞內β-catenin的影響。

Figure 2.4 Treatment of hMSC with CHIR99021 increased intracellular β-catenin.

由於GSK3抑制劑CHIR99021促進了β-catenin破壞複合物的失穩，增加了β-catenin在細胞內的儲存，從而影響了與細胞生長，增殖和分化有關的因子的轉錄。經過24小時處理後，與DMSO對照相比，用10μM，15μM或20μMCHIR99021在不含血清的基礎AmniomaxTM培養基中處理的hMSC通過流式細胞術顯示細胞內β-catenin的平均螢光強度（MFI）顯著增加。

鳴謝：Brianna Ananthan, The University of Western Ontario.

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