回歸課本再看全國Ⅱ卷理綜生物卷

37. [生物——選修1: 生物技術實踐] (15 分)

研究人員從海底微生物中分離到一種在低溫下有催化活性的α-澱粉酶A3,並對其進行了研究。回答下列問題:

(1)在以澱粉為底物測定A3酶活性時，既可檢測澱粉的減少，檢測應採用的試劑是______，也可採用斐林試劑檢測____________的增加。

(2)在A3的分離過程中可採用聚丙烯醯胺凝膠電泳檢測其純度，通常會在凝膠中添加SDS,SDS的作用是_____________和______________________。

(3)本實驗中，研究人員在確定A3的最適pH時使用了三種組分不同的緩衝系統，結果如圖所示。某同學據圖判斷，緩衝系統的組分對酶活性有影響，其判斷依據是_____________。

(4)在製備A3的固定化酶時，一般不宜採用包埋法，原因是__________(答出 1點即可)。

這道題綜合考察了同學們對酶的理解，第一題比較基礎，答案在必修一中已經涉及，分別是碘液和還原糖（或葡萄糖）。第二題中涉及到蛋白質的提取和分離，考察了同學們對聚丙烯醯胺凝膠電泳中SDS的作用，在選修一課本中有清晰的介紹（如下圖）。所以功能是消除蛋白質所帶靜電荷對遷移率的影響和使蛋白質發生變性。

根據題目圖中所示，在相同pH時，不同緩衝系統條件下所測得的相對酶活性不同，在排除了pH對酶活性影響後，證明了緩衝系統中的成分對酶的活性有影響。
最後一題的答案也在課本中有明確的講解，如下圖所示，不採用包埋法的原因是酶分子體積較小，容易從包埋材料中漏出。