2019年10月16日,我院在南校區生物樓124講學廳、北院117實驗室,分別舉辦了超速冷凍離心機的應用講座,及密度梯度離心的實操培訓。我院和化學學院的本科生、研究生及科研工作者40多人參加了此次講座培訓。
本次應用講座的主題是離心分離技術及熱點應用。美國Beckman Coulter公司霍德華博士首先介紹了離心的基本原理和主要應用領域,讓師生對離心有一個總的概念。接著對轉速、離心力和相對離心力、沉降速度、沉降係數、轉頭效率K因子等的定義和相互關係,以及它們對離心效率的影響作了簡要介紹。從而引出速率區帶離心法和等密度梯度離心原理和特點。最後針對超速冷凍離心機的兩個應用熱點:胞外囊泡/外泌體/微顆粒的提取和純化;病毒載體純化及鑑定、幹細胞/免疫細胞治療做了詳細的講解。
圖為霍德華博士作報告
講座結束後,美國Beckman Coulter公司張萌萌博士為師生進行了密度梯度離心實操培訓。在介紹了超速冷凍離心機的轉子和離心管等使用注意事項後,讓師生按自己的方法分別用7.5%、15%、30%的蔗糖溶液在超速離心管中製備密度梯度。
整個講座和培訓持續了3.5小時。講座過程中,師生積極回答問題,並提出自己在使用超速冷凍離心機的過程中遇到的問題,主講者詳細地回答並為師生解決問題,如外泌體和病毒的密度基本相等,可採用超速離心的「二維」純化模式,先做差速離心再做密度梯度離心,這樣可以得到非常純的外泌體。在實操過程中,總結出了新手配置密度梯度的最好方法是使用5ml長針頭注射器從高濃度到低濃度,先鋪30%蔗糖、再鋪15%蔗糖、最後鋪7.5%蔗糖,形成的蔗糖密度梯度分界線最明顯。
本次應用講座進一步加深了師生們對超速冷凍離心機使用方法及應用熱點的了解,對日後的科研工作有極大的幫助。
圖為張萌萌博士在分批進行實操培訓
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初審 陳旭凌
審核 黎曉天
審核發布 趙勇