實驗時間 | RT-PCR 的常見問題及解答

2021-02-08 生物學霸

近期,鑑於很多小夥伴,在實驗過程中遇到各種疑難雜症,找不到夥伴交流,學霸君專門為大家建立了實驗問答專欄,歡迎大家一起來交流和提問,共同進步。小夥伴若有想了解的都可以留言,學霸君會及時查看的噢,回到正題。

全稱:Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction

中文:逆轉錄 - 聚合酶鏈反應

分析基因的轉錄產物;

獲取目的基因;

合成 cDNA 探針;

構建 RNA 高效轉錄系統。

逆轉錄 - 聚合酶鏈反應 (Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR) 的原理是:提取組織或細胞中的總 RNA,以其中的 mRNA 作為模板,採用 Oligo(dT)或隨機引物利用逆轉錄酶反轉錄成 cDNA。再以 cDNA 為模板進行 PCR 擴增,而獲得目的基因或檢測基因表達。

說到此處,學霸君整理了大家在實驗中常遇到的幾個問題:

關於內參,究竟如何加?

RT-PCR 引物是從文章中找還是自己設計?

3real-time PCR 與 reverse-transcription PCR 的區別是?

想知道以上問題的答案嗎?可點擊「閱讀原文」查看詳解。

當然如果有小夥伴有更好的解決辦法或者還有其他疑問的,也可以在在「閱讀原文」中,點擊「我要回答」或「我要提問」。

舉例:

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