職稱考輔系列推送31|臨床化學常用分析技術、血清酶催化活性濃度和代謝物濃度檢測技術及標本、試劑、量器常識

2021-03-04 臨床檢驗醫學資訊

◎歷年考點1:

臨床化學常用分析技術

1.光譜分析(分光光度技術):利用各種化學物質所具有的發射、吸收或散射光譜譜系的特徵,來確定其性質、結構或含量的技術,稱為光譜分析技術。具有靈敏、快速、簡便等特點,是生物化學分析中最常用的分析技術。 

  發射光譜分析:螢光分析法和火焰光度法。

  吸收光譜分析:可見及紫外光分光光度法、原子吸收分光光度法。

  散射光譜分析:比濁法。

  2.電泳分析:在直流電場中,帶電粒子向帶符號相反的電極移動的現象稱為電泳。

                           

3.離心技術:離心技術分為製備離心技術和分析離心技術。製備離心技術主要用於物質的分離、純化,而分析離心技術主要用來分析樣品的組成。

4.層析技術:層析法是利用不同物質理化性質的差異而建立起來的技術。所有的層析系統都由固定相和流動相組成。

  5.電化學分析技術:利用物質的電化學性質,測定化學電池的電位、電流或電量的變化進行分析的方法稱為電化學分析法。包括電位法、電導法、電容量分析法。

◎歷年考點2:

血清酶催化活性濃度和代謝物濃度檢測技術

1.酶反應動力學原理

  酶反應動力學主要研究酶催化反應的過程與速率,以及各種影響酶催化速率的因素,定量時的觀察對象是總單位時間內底物的減少或產物增加的量。

當底物[S]>>Km時,公式可近似為V=Vmax;從理論上說只有測定的是酶Vmax,反應速度才和酶量成正比。

                           

  2.酶活性的定義及單位

  在實驗規定的條件下(溫度、最適pH、最適底物濃度時),在1分鐘內催化1μmol底物發生反應所需的酶量作為1個酶活力國際單位(U)。

  習慣用U/L來表示體液中酶活性濃度。

  1) 抗凝劑

①  草酸鉀:結合Ca2+而抗凝。不能用於酸鹼平衡觀察;也不能用於鉀、鈣測定;同時對LD,ACP,ALP及AMY均有抑制作用,可使其活性下降。③  肝素:抗凝力強,不影響血細胞體積,不易溶血等優點,常用於血氣分析和多種生化常規項目的測定,是生化檢驗中最常用的一種抗凝劑。

  2) 防腐劑

①  甲苯(或二甲苯):尿液生化檢測,如總氮、尿素、肌酸、肌酐、尿酸、鉀、鈉測定較適宜。加入量一般為10ml。②  鹽酸:測定尿17-OHCS、17-KS、腎上腺素、去甲腎上腺素、兒茶酚胺、鈣等。由於會產生尿酸鹽沉澱,因此不適於尿酸測定。加入量一般為10m1。③  麝香草酚:常用於尿液濃縮結核菌檢查和尿沉渣記數;不適合尿蛋白測定。

  3) 標本的分離和保存

③  標本可存放於4~6℃冰箱或﹣20℃冷櫃,避免反覆凍溶。

……

相關焦點

  • 天門冬氨酸氨基轉移酶測定試劑註冊技術審查指導原則
    相關描述應至少包含如下內容:1.產品預期用途:描述產品的預期用途、與預期用途相關的臨床適應症背景情況,如臨床適應症的發生率、易感人群,相關的臨床或實驗室診斷方法等。天門冬氨酸氨基轉移酶(AST),舊稱穀草轉氨酶(GOT),是氨基轉移酶的一種,它催化天門冬氨酸和α-酮戊二酸的氨基轉移作用,形成L-穀氨酸和草醯乙酸。
  • 興證醫藥健康:新冠病毒檢測方法優缺點全面解析
    測定時,受檢的標本與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體複合物與液體中的其他物質分開。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應結合在固相載體上。固相上的酶量與標本中的受檢物質的量成比例。加入酶反應底物後,底物被催化成有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關。所以,可根據呈色的深淺進行半定量或定性分析。
  • 周誠:B肝快速檢測試劑在POCT臨床檢測中意義重大
    根據不同的檢測對象,不同生產廠家選擇不同技術來檢測,從而導致HBV快速診斷試劑品種多,檢測方法多,但就方法而言就至少有EIA、RIA、化學發光法、時間分辨法、膠體金法、晶片和激發光法等。檢測時可根據實際情形檢測全血、血清和血漿等樣品,所需時間為5~30分鐘。
  • 檢驗職稱考試-精煉知識點集錦(六)
    121.CK和GGT都是男性高於女性,且酒後GGT升高明顯,在慢性酒精中毒時較為敏感。122.酶測定包括酶量測定和酶活性測定。123..酶釋放的速度與其分子量成反比(可分析各種酶在病理時進入血液的先後)。124.酶催化活性濃度測定:可測定產物生成量、可測定底物消耗量、反應速度與PH、溫度和底物濃度有關。
  • 【備考】第58期:臨床免疫學檢驗技術複習要點(2)
    化學發光酶免疫分析(CLEIA)【原理】:是用參與催化某一化學發光反應的酶如辣根過氧化物酶(HRP)或鹼性磷酸酶(ALP)來標記抗體(或抗原),與待測標本中相應的抗原(或抗體)抗體分子經生物素化後,其結合抗原的活性不受影響。多種酶經生物素化後,其催化能力保持不變或稍有降低。
  • 免疫診斷技術迭代,化學發光引領變革浪潮
    化學發光正逐步替代酶聯免疫,國內市場佔比超70%。相較於傳統生化診斷和其他免疫診斷技術,化學發光具有特異性好、靈敏度高、精確定量、結果穩定、檢測範圍廣等優勢,在臨床應用中迅速推廣,正逐步取代酶聯免疫和其他定性方法,成為免疫分析領域的主流診斷技術。
  • POCT(即時檢驗)相關技術歸納
    (4)應用生物感應技術,利用生物感應器檢測待測物。加上檢驗標本後產生顏色反應,用眼觀定性或儀器檢測(半定量)。適用於全血,血清,血漿,尿液等各類樣品。例如:前降鈣素(PCT)的半定量檢測就是使用此種方法。尿液蛋白質、葡萄糖等一般化學檢查也都屬於此範疇。
  • ELISA法檢測B肝兩對半,導致假陽/陰性的影響因素有哪些?
    但ELISA測定中影響因素較多,有時可見到一些假陽性或假陰性,本文檢驗君就ELISA測定B肝兩對半的影響因素及對策做如下討論: 1、樣本採集與處理的影響 1.1標本嚴溶血及混有紅細胞的血清易沉澱或附著在聚乙烯孔內不易洗淨,殘留在孔內的血紅蛋白具有過氧化物酶樣的活性,催化底物顯色造成假陽性,嚴重溶血標本禁用。
  • 未來智庫:新冠檢測行業全景分析及重點投資標的
    目前臨床中常用的抗體血清學 檢測方法有 3 種:酶聯免疫吸附試驗法、化學發光免疫分析法、膠體金免疫層析 法。酶聯免疫吸附法(ELISA)ELISA 是一種結合抗原、抗體特異性反應和酶對底物高效催化作用的高敏感性免 疫學實驗技術。
  • 人尿中5種鄰苯二甲酸酯代謝物的檢測
    對所採集的10份糖尿病患者的尿液進行檢測,並對該人群PAEs代謝物的暴露水平進行評價。結果表明,各PAEs代謝物均有檢出,其中鄰苯二甲酸單(2-乙基己基)酯(MEHP)的檢出率為100%。總之,該方法萃取過程中未添加有毒的有機試劑,均使用多功能離子液體作為萃取劑、分散劑和鹽析劑,萃取過程綠色環保,簡單高效;方法的靈敏度較高,穩定性較好,適用於人體尿液中痕量PAEs代謝物的檢測。
  • 宏基因組測序技術在病原微生物檢測中的臨床應用與存在的問題及面臨挑戰
    2000年,宏基因組學的應用開始從環境拓展到臨床,臨床宏基因組學(Clinical metagenomics,CMg)以獲取臨床相關的微生物信息為目的,對臨床標本中所有的核酸序列進行測序分析[2],其常用技術為mNGS。mNGS屬於二代測序技術,無需培養、無偏好性檢測病原,獲取病原體的物種分類、血清型、耐藥及毒力等一系列生物信息[3]。
  • 化學發光免疫分析技術及檢驗科常見項目臨床意義
    這些新型免疫學分析設備大大增加了分析指標的靈敏度和特異性,也顯著提高了檢測準確性和工作效率,尤其是全自動化學發光免疫分析儀,已成為目前臨床檢驗中應用最廣泛、發展最活躍的檢驗設備。化學發光免疫分析技術是利用化學反應釋放的自由能激發中間體,使其從激發態回到基態,當中間體從激發態回到基態時釋放等能級的光子,再對光子進行測定而進行的定量分析技術。化學發光免疫分析技術主要具有靈敏度高、特異性強、試劑穩定性好且有效期長、檢測線性範圍寬、操作簡單、方法穩定快速、檢測項目多(如表2-1)、自動化程度高等優點,該技術已成為目前免疫分析技術的主流方法,廣泛應用於臨床檢驗的各個領域。
  • 臨床醫學檢驗技術考試題庫全套!
    :是2021年全國衛生專業技術資格考試《臨床醫學檢驗技術(中級)職稱考試》的題庫,包括歷年真題、章節題庫和模擬試題三個部分:臨床醫學檢驗技術考試題庫全套目錄之一:第一部分為歷年真題,收錄了2015~2019年真題,並提供詳細答案解析。
  • 職稱考輔系列推送23|血漿蛋白質及肝膽疾病實驗室檢查
    ◎歷年考點2:血漿蛋白質的測定、參考值、方法評價及其臨床意義  (一)血清總蛋白測定方法及臨床意義  1.測定方法:雙縮脲比色法(推薦蛋白質定量方法)  原理:蛋白質分子中的肽鍵在鹼性條件下與Cu2+作用生成紫紅色的化合物,顏色深淺在一定濃度範圍內與蛋白含量成正比。
  • 人抑肽酶(AP)酶聯免疫分析(ELISA)說明書
    人抑肽酶(AP)酶聯免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用 目的:本試劑盒用於測定人血清,血漿及相關液體樣本中抑肽酶(AP)的含量。實驗原理:本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人抑肽酶(AP)水平。用純化的人抑肽酶(AP)抗體包被微孔板,製成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入抑肽酶(AP),再與HRP標記的抑肽酶(AP)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體複合物,經過徹底洗滌後加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,並在酸的作用下轉化成最終的黃色。
  • 新生兒高膽紅素血症對血清B肝病毒表面抗原化學發光法檢測及消除
    摘要:目的:將成人高膽紅素血症作為對照,分析新生兒高膽紅素血症對血清B肝病毒表面抗原化學發光法檢測的影響及消除方法。1.2方法(1)B肝病毒表面抗原檢測:利用化學發光免疫檢測法進行檢測,首先,應混合血清樣本與IgG和IgM抗體的順磁微粒,HBs抗原和微粒二者之間進行結合[1]。其次,添加包被有羊抗人HBs IgG結合物。
  • ELISA實驗操作中常見問題分析
    1 標本及採集、貯運因素  嚴重溶血 ,以 HRP 為標記的ELISA 測定中,殘留在孔內的血紅蛋白具有過氧化物酶樣活性,催化底物顯色造成假陽性; 混有紅細胞的血清 易沉澱或附著在聚乙烯孔內不易洗淨;如有 細菌汙染 ,菌體中可能含有內源性HRP,也會產生假陽性反應; 標本凝固不全 ,有時為了爭取時間快速檢測,常在血液還未開始凝固時即強行離心分離血清,使血清中仍殘留部分纖維蛋白原
  • 人腫瘤標誌物(CA724)酶聯免疫分析(ELISA)說明書
    人腫瘤標誌物(CA724)酶聯免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用  目的:本試劑盒用於測定人血清,血漿及相關液體樣本中腫瘤標誌物(CA724)的含量TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,並在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的腫瘤標誌物(CA724)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人腫瘤標誌物(CA724)濃度。