小張,我們新一期疑問周周答打算為大家介紹一些 R&D Systems 產品說明書中提到的濃度單位。你有什麼想法嗎?
哈哈,不一定哦,接下來,我就帶你去了解一下這些「特別」的濃度單位。
0.1% BSA 可謂是老生常談了,它被用在各種重組蛋白、抗體的重溶和 ELISA 試劑盒中 Buffer 的配置。但其中的「%」具體是什麼單位呢?0.1% BSA 對應的摩爾濃度又是什麼?
其實,這裡的「%」指的是 w/v(weight/volume),即質量濃度,其具體定義為:每 100mL 溶液中包含溶質的質量(g)。以 0.1% BSA 為例,對應 0.1g/100mL,也就是 1mg/mL。
2N H2SO4,常被用於 ELISA 試劑盒中的終止液(Stop solution)。這裡的「N」指的是當量濃度(Normality),其定義為 1L 溶液中所含溶質的克當量數。克當量數通過物質的克分子量(或克原子量)除以其價數而得到。其中克分子量指的是,以克計的化合物或元素的重量,數值上等於該化合物或元素的分子量。
以上定義解釋沒看懂不要緊,我們以 2N H2SO4 為例來進行解釋說明。對於 H2SO4 來講,克分子量數值上等於其分子量,即 98,單位為克(g)。相應地,克當量數等於 98g 除以 2(價),即 49。那也就意味著,1N H2SO4 表示 1L 水溶液中含有 49g 硫酸,而 49g/L 硫酸對應的摩爾濃度為 0.5mol/L。最終結果為:1N H2SO4 = 0.5mol/L H2SO4。
其實,當量濃度(N)還出現在 R&D Systems®的 ELISA 試劑盒說明書中,如 Human/Mouse/Rat/Porcine/Canine TGF-beta 1 Quantikine ELISA Kit,Cat# DB100B。在其樣本活化試劑準備中,需要用到 1N HCl 和 1.2N NaOH/0.5M HEPES。根據說明書提供的配置方法,我們可以很簡單地得到最終所需要的溶液。但是,12N HCl 和 10N NaOH 該如何準備呢?
為了得到答案,我們首先需要知道 1N HCl 和 1N NaOH 對應的摩爾濃度。
HCl,相對分子質量為 36.5,根價為 1 價。那麼克分子量=36.5 克,克當量數=36.5/1,即 1N HCl = 36.5g/L=1mol/L,12N HCl=12mol/L。對於 12N HCl 的準備不用擔心,因為市售的新鮮濃鹽酸濃度就是 12mol/L,詳戳:3 款實驗常用計算器,小學畢業也能配好溶液。
NaOH,相對分子質量為 40,根價為 1 價。那麼克分子量=40 克,克當量數=40/1,即 1 NaOH = 40g/L=1mol/L,10N NaOH=10mol/L。
到這裡,想必大家已經明白當量濃度是如何計算的。不過,以上當量濃度的計算只是針對一些簡單溶液的計算,對於例如氧化還原反應中當量濃度的計算會變得更複雜,感興趣的同學可以自行去了解一下。
1 eq. NaOH,常出現在 Tocris 的產品溶解當中,這裡的「eq.」表示的是摩爾等效(molar equivalent),但它並不是一個濃度單位。我們以實例來進行說明。
Cl-HIBO,Cat# 1673,其溶解方法當中包括,1eq. NaOH to 100mM。這意味著,如果選擇使用 NaOH 進行溶解,那需要使用相同摩爾濃度的 NaOH,即使用 100mM 的 NaOH 將 Cl-HIBO 溶解到終濃度為 100mM。
又如,GR 113808,Cat# 1322,其溶解方法中包括,1eq. HCl to 25mM。這也就意味著,可以使用 25mM 的 HCl 將 GR 113808 溶解到終濃度為 25mM。關於摩爾等效溶液的配置,Tocris 網站有更加詳細的實驗方案,詳見:配製摩爾等效溶液。
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