參與《質量效應：仙女座》多人模式是玩家扮演外星種族的唯一機會，雌雄不限（阿薩麗只限雌體，顯然）：
以上為角色選擇界面，種族可選範圍可窺一斑：人類、突銳、克洛根、賽拉睿、阿莎麗……可能還有首次登場的Kett。不同角色有各自的稀有度，以頭像圓框的色澤來區分，金色等級的角色顯然不那麼容易獲得，估計要開一堆箱子才行。
以男性滲透者（Infiltrator）為例，其標配技能為黏彈、隱身，及灼燒；女性先鋒（Vanguard）的標配技能為衝撞、Nova，及震蕩波：
以老眼光看，先鋒職業就是送死的，小白的最愛，看上去夠威夠帥，經常撞出去回不來（尤其在高難度下）。
但同職不同族其技能也不一樣，憑空增添許多排列組合——也許克洛根先鋒撞出去就能全身而退呢？這樣一來就多了許多肝此不疲的目標，除了裝備和掛件，抽到中意的人物卡也是一大幸事。
然後每一名角色還有各自的附加屬性，比如人類滲透者的屬性加成是回血。按設計者的話來說，這套系統代替了無聊的「轉生」循環：
遊戲設計有五種附加屬性，從升級所需經驗值來看，針對附加屬性練級可肝到地老天荒。
好在附加屬性練級是全局性的，用一位角色練級可影響麾下所有角色該屬性的級別。因此，儘早擁有全部人物卡是重中之重。
此外，新作的多人角色自定義選項與前作相比似乎並無太大區別：
更高等級的角色可解鎖更多自訂外觀選項，這些角色要靠開箱子抽獎獲得。
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