一、PCR實驗室建設指南
1.實驗室設置說明及建議
1.1 標準PCR實驗室為四區，即試劑準備區、標本處理區、擴增區、產物分析區。
1.2 若面積不足，二區、三區分配空間可適當擴大，臺面及配套儀器放以實際情況自行設定。
1.3 建議通道及實驗室間牆都採用鋁槊或鋁合金加玻璃，採用推門,這樣可達到美觀、經濟、採光好、佔地少的優點。
2.臨床基因擴增實驗室平面參考圖
3.PCR實驗室設計主要控制要素
3.1實驗室空調通風系統設計及壓力控制
PCR實驗室並沒有嚴格的淨化要求，但是為避免各個實驗區域間交叉汙染的可能性，宜採用全送全排的氣流組織形式。同時，要嚴格控制送、排風的比例以保證各實驗區的壓力要求。
3.1.1試劑貯存和準備區
該實驗區主要進行的操作為貯存試劑的製備、試劑的分裝和主反應混合液的製備。試劑和用於標本製作的材料應直接運送至該區，不得經過其他區域。試劑原材料必須貯存在本區內，並在本區內製備成所需的貯存試劑。
對與氣流壓力的控制，本區並沒有嚴格的要求。
3.1.2標本製備區
該區域主要進行的操作為臨床標本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、貯存及其加入至擴增反應管和測定RNA時cDNA的合成。
本區的壓力梯度要求為：相對於鄰近區域為正壓，以避免從鄰近區進入本區的氣溶膠汙染。另外，由於在加樣操作中可能會發生氣溶膠所致的汙染，所以應避免在本區內不必要的走動。
3.1.3擴增反應混合物配製和擴增區
該區域主要進行的操作為DNA或cDNA擴增。此外，已製備的DNA模板和合成的cDNA(來自樣本製備區)的加入和主反應混合液(來自試劑貯存和製備區)製備成反應混合液等也可在本區內進行。在巢式PCR測定中，通常在第一輪擴增後必須打開反應管，因此巢式擴增有較高的汙染危險性，第二次加樣必須在本區內進行。
本區的壓力梯度要求為：相對於鄰近區域為負壓，以避免氣溶膠從本區漏出。為避免氣溶膠所致的汙染，應儘量減少在本區內的不必要的走動。個別操作如加樣等應在超淨臺內進行。
3.1.4擴增產物分析區
該區域主要進行的操作為擴增片段的測定。如使用全自動封閉分析儀器檢測，此區域可不設。
本區是最主要的擴增產物汙染來源，因此對本區的壓力梯度的要求為：相對於鄰近區域為負壓，以避免擴增產物從本區擴散至其它區域。
實驗室汙染的預防與控制
PCR實驗室設計的核心問題是如何避免汙染。在實際工作中，常見的有以下幾種汙染類型：擴增產物的汙染；天然基因組DNA的汙染；試劑的汙染以及標本間的汙染。由於一旦發生汙染，實驗就必須停止，直到找到汙染源並清除為止，而且實驗結果必須作廢，需重新進行實驗。所以發生汙染後再圍繞實驗室來尋找汙染源不但耗時而且繁瑣，浪費人力物力。因此要避免汙染，首先應是預防，而不是排除。
3.2工作區域的嚴格劃分
3.2.1各個實驗區域設置合理；
3.2.2各個實驗區域要有明顯的標記（如醒目的門牌或不同的地面顏色等），以避免各個不同實驗區域設備物品、試劑等發生混淆。
3.3合理的系統設置
合理的空調通風系統設置，儘量採用全送全排的空調系統；嚴格的氣流壓力控制，保證不同的實驗區內不同的壓力要求。
3.4規範的操作
3.4.1臨床基因擴增檢驗實驗室的技術人員必須進行上崗培訓，經培訓合格後才能從事臨床基因擴增檢驗的工作；
3.4.2在實驗操作過程中，操作者必須戴手套，並經常更換。此外，操作中使用一次性帽子也是一個有效地防止汙染的措施；
3.4.3清潔工作及時、正確。實驗工作結束後，必須立即對本區進行清潔。除常規的消毒液體對表面進行擦拭消毒或紫外線燈的照射消毒外，對一些實驗設備還應進行高壓消毒處理。
3.5嚴格的管理
3.5.1嚴格控制進出實驗室的人員。與實驗無關的人員不得隨意進出實驗室，有條件的情況下要設置獨立的通道和進出整個實驗區的門；
3.5.2在各個實驗區域使用帶有明顯區別標誌的工作服（如不同顏色），當工作人員離開時不得將本區的工作服帶至其它區域；
3.5.3儘量減少在實驗區內不必要的走動以減少交叉汙染的可能性。
3.5.4擴增產物分析區是最主要的擴增產物汙染來源，廢液不能在實驗室中傾倒，必須經消毒液浸泡消毒後在遠離實驗室的地方棄掉，用過的吸頭等一次性材料也應經消毒液浸泡消毒後統一處理，如焚燒等；
3.5.5擴增產物分析區可能會用到某些可致基因突變和有毒物質，應特別注意實驗人員的安全防護。
3.6完備的實驗室配套設施
完備的實驗室配套設施是保證實驗工作的必要條件，應根據各個實驗室實驗內容的不同配備相應的設備和儀器，如超淨工作檯、離心機、加樣器等。
4.實驗室規劃要求和設計原則
4.1實驗室規劃要求
4.1.1各區配置空調且要求獨立
4.1.2各區天花板上安裝2個紫外線燈
4.1.3緩衝區天花板上安裝2個紫外線燈
4.1.4各區配置乾濕溫度計
4.1.5冰箱各室配置冰箱溫度計
4.1.6各區用品獨立
4.2實驗室設計原則
4.2.1為了加強實驗室密封性，防止空氣對流，實驗室隔斷材首選塑鋼。
4.2.2如實驗室要吊頂，進出風管道要走於吊頂上部，經專用通道進出。
4.2.3吊頂頂部安裝紫外消毒燈和照明燈（包括緩衝間），電源開關設在緩衝間。
4.2.4實驗室裝修前應先將生物安全櫃裝進實驗室。
5.臨床基因擴增檢驗實驗室技術驗收表
註：請在驗收所選項打 「√」 。
6.PCR各區設備設施（可根據項目實際情況調整）
6.1試劑儲備區（一區）
6.2標本製備區（二區）
6.3 擴增區（三區）
7.PCR實驗室日常需用物品
8.PCR實驗室質量管理體系
根據實驗室的具體情況編寫質量體系文件，《質量手冊》、《程序文件》、《作業指導書》，並保證管理體系運行有效。
管理體系的特點是應有明確的目的、規範的管理、有效的制約、高效的機制、能自我發展的整體。
建立完善的SOP文件，對完成各項質量活動的方法作出規定，每個SOP都應對一個或一組相互關係的活動進行描述。
每個SOP文件應說明該項質量各環節的輸入、轉換和輸出所需的文件、物資、人員、記錄以及它們與有關活動的接口關係。
明確每個環節轉換過程中各項因素的要求，即由誰做、做什麼、做到什麼程序、達到什麼要求，如何控制、形成什麼記錄和報告，以及相應的審批手續。
規定在質量活動中需要注意的例外或特殊情況的糾正措施。SOP應簡練、明確和易懂並且工作人員熟練掌握和嚴格遵守。
9.PCR實驗室建設相關的指導文件
《醫療機構管理條例》
《醫療機構臨床實驗室管理辦法》
《臨床基因擴增檢驗實驗室管理暫行辦法》
《醫療機構臨床基因擴增實驗室管理辦法》
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