離心機用於生物科學的工作原理

2020-12-08 OFweek儀器儀表網

  

    離心機在生物科學上的應用已經不在是大驚小怪的事了,離心技術在生物科學,特別是在生物化學和分子生物學研究領域,早已起到重要的作用,每個生物化學和分子生物學實驗室以及各類高校都要安裝多種型式的高速離心機。離心技術主要用於各種生物樣品的分離和製備,生物樣品懸浮液在高速旋轉下,由於巨大的離心力作用,使懸浮的微小顆粒(細胞器、生物大分子的沉澱等)以一定的速度沉降,從而與溶液得以分離,而沉降速度取決於顆粒的質量、大小和密度。

  一般情況下,低速離心時常以轉速「rpm」來表示,高速離心時則以「g」表示。計算顆粒的相對離心力時,應注意離心管與旋轉軸中心的距離「r」不同,即沉降顆粒在離心管中所處位置不同,則所受離心力也不同。因此在報告超離心條件時,通常總是用地心引力的倍數「×g」代替每分鐘轉數「rpm」,因為它可以真實地反映顆粒在離心管內不同位置的離心力及其動態變化。科技文獻中離心力的數據通常是指其平均值(RCFav),即離心管中點的離心力。

  為便於進行轉速和相對離心力之間的換算,Dole和Cotzias利用RCF的計算公式,製作了轉速「rpm」、相對離心力「RCF」和旋轉半徑「r」三者關係的列線圖,圖式法比公式計算法方便(列線圖參見附錄)。換算時,先在r標尺上取已知的半徑和在rpm標尺上取已知的離心機轉數,然後將這兩點間劃一條直線,與圖中RCF標尺上的交叉點即為相應的相對離心力數值。注意,若已知的轉數值處於rpm標尺的右邊,則應讀取RCF標尺右邊的數值,轉數值處於rpm標尺左邊,則應讀取RCF標尺左邊的數值。

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    報告離心條件時使用RCF比rpm要科學,因為它可以真實地反映顆粒在離心管內不同位置的離心力及其動態變化。 WIGGENS離心機均有RPM和RCF雙顯示功能,操作者可以一目了然的看到轉速和離心力。後者根據功能又分為製備性離心機和分析性離心機。製備性離心機一般用來分離各種生物材料,分離的樣品量比較大,也是大多數科研實驗室配備的離心機種類。分析性離心機常用來研究純的生物大分子和顆粒的理化性質,一般有光學系統,可監測粒子在離心場中的行為,能推斷物質的純度、形狀和分子量等,且都是超速離心機。此處和大家分享下幾種實驗室常用的製備性離心機。
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