作者：Rhyme Z
2020年1月，緊跟新型冠狀病毒的腳步，一種高致病性的禽流感（H5N6）病毒亞群2.3.4.4h悄然登陸中國西部的新疆，而遷徙而來的美洲天鵝和疣鼻天鵝未能逃過此劫，隕落在了新疆的土地上。
陳化蘭院士課題組當即對此病毒展開調查研究，並於2020年12月在EID Journal上發表了此篇題為《Outbreaks of Highly Pathogenic Avian Influenza (H5N6) Virus Subclade 2.3.4.4h in Swans, Xinjiang, Western China, 2020》的研究成果。
事實上，H5高致病性禽流感病毒（HPAIVs）的進化枝2.3.4.4已在全球範圍內傳播流通，並受到世界各地的廣泛關注。已有大量研究表明，H5病毒進化枝2.3.4.4源自候鳥中共同流行的其他低致病性禽流感病毒（LPAIVs）的神經氨酸酶（NA）基因，而且在全球的野生鳥類和家禽中都檢測出了多種HPAIVs新亞型[1,2]。截至目前，H5病毒的進化枝2.3.4.4已經進化出了8個亞群（2.3.4.4a-2.3.4.4h）[1]，而H5N6是唯一一個能夠引起人類感染的亞型。截至2019年8月，世界衛生組織（WHO）已經報告了24例人類病例，死亡率高達67%[3,4]。
自2004年以來，中國和其他國家已經開發出多種控制H5禽流感的疫苗，並在家禽中廣泛投入使用，而且為了確保疫苗株和流行株之間的抗原匹配，我國的疫苗種子病毒定期更新[9,10]。目前，疫苗種子病毒Re-11即將被用於控制進化枝2.3.4.4[10]。
在2019年12月29日至2020年1月17日期間，共死亡58隻患病天鵝，死亡日期及死亡地點如下表所示。研究人員從其中的13隻天鵝（11隻美洲天鵝和2隻疣鼻天鵝）中分離得到了13株H5N6 HPAIVs，從病溯溯源、抗原性和致病性三個方面進行分析。
2020年1月，中國新疆，禽流感（H5N6）在遷徙美洲天鵝和疣鼻天鵝中爆發
病毒溯源
為了追蹤病毒起源並了解它們的遺傳關係，研究人員對13株病毒的基因組進行測序，並與WHO推薦的代表性H5 HPAIVs進行比較系統遺傳學分析。結果表明，所有13株病毒具有高度同一性（99.5%-100%）；8個片段中的7個與2017年從廣東省環境樣本中分離出的H5N6病毒密切相關。
HA基因在其切割位點具有典型的高致病性胺基酸序列-RRKR-，並且在基因組中檢測到了一些哺乳動物適應性突變[11]，並構建了HA基因的最大可信樹，與越南、中國和俄羅斯發現的病毒株的HA基因亞群2.3.4.4h共同分組。
WS/XJ/1/2020(H5N6)病毒中與毒力相關的分子標記
H5病毒的血凝素（HA）基因最大可信樹
抗原性分析
研究人員使用此次禽流感病毒和H5N1滅活疫苗Re-11產生的多克隆抗血清進行血凝素抑制試驗，結果表明，病毒與疫苗抗血清交叉反應良好，反之亦然，交叉反應R值為0.26。
雞血清對進化枝2.3.4.4 H5 HPAIV的抗原分析
致病性分析
在研究過程中，實驗人員首先用此次指數病毒對雞進行了靜脈內致病性指數測試。10隻6周齡的無特定病原體的雞被靜脈接種了0.2 mL病毒。所有的雞均在接種3天內死亡，得到靜脈內治病指數測試值為2.59。
然後在鴨中測試其毒力和傳播能力。8隻3周齡的無特定病原體的鴨子被鼻內接種106倍50％雞蛋感染劑量（EID50）的禽流感病毒，並將3隻未感染的鴨子在24小時後放進同一籠子以監測傳播能力。接種後第3天，對3隻經病毒感染的鴨子實施安樂死，在被測器官中檢測到高滴度的病毒（A）；接種後第3和5天，在存活的經病毒感染的鴨子，以及接觸的鴨子的口咽和洩殖腔拭子中也檢測到病毒（B）；在接種後的7天內，其餘5隻接種病毒的鴨子和3隻接觸的鴨子均死亡（C）。表明此次禽流感病毒在鴨群中傳染力較強。
接下來，在BALB/c小鼠中評估了禽流感病毒的複製和50％的小鼠致死劑量（MLD50）。為測試器官中的病毒複製，3隻小鼠被鼻內接種50 μL體積的106倍EID50的病毒，並在接種第3天安樂死。結果顯示，在1隻小鼠的大腦、2隻小鼠的脾臟以及所有3隻小鼠的鼻甲和肺中發現了該病毒，但在任何小鼠的腎臟中都沒有發現該病毒（D）。為測試MLD50，5隻6周齡的小鼠被鼻內接種50 μL體積的101-106倍EID50的病毒，並監測了14天的體重變化和死亡情況。結果顯示，接受最高劑量的106倍EID50的5隻小鼠中，只有1隻在接種後第8天死亡，其他所有小鼠在14天觀察期內均存活，得出的MLD50值為6.38 log10 EID50（E,F）。
實驗室條件下測試的WS/XJ/1/2020(H5N6)在鴨和小鼠中的複製和毒力。
結論
以上分析結果表明，此次禽流感病毒對雞和鴨具有高致病性，並且在抗原上接近H5N1疫苗種子病毒Re-11。儘管該病毒在小鼠中的致病性較低，但它帶有多個殘基，可以增加其在哺乳動物中的毒性，因此有可能對公共健康構成潛在的威脅。
2005年，進化枝2.2病毒從亞洲向歐洲和非洲傳播；2013年，H5N6病毒亞群2.3.4.4a在寮國的家禽中被首次檢測到，之後傳播到越南和中國；2014年，H5N8病毒亞群2.3.4.4b在朝鮮的野生鳥類和家禽中引起了疾病爆發，之後通過鳥類遷徙傳播到北美，並形成了新的亞群2.3.2.4c；2017年，H5N8病毒亞群2.3.4.4b與歐洲和非洲的LPAIV重新組合，產生了帶有新型內基因盒的H5N6[5]；同時，H5N6病毒亞群2.3.4.4d、2.3.4.4e、2.3.4.4f、2.3.4.4g和2.3.4.4h在東南亞的家禽和野生鳥類中產生[1,6-8]。
如今，在天鵝中檢測到的這些H5N6病毒通過野生鳥類廣泛分布的潛在風險也令人格外擔憂。因此研究人員提出建議，隨著遷徙季節的來臨，相關人員應在野禽遷徙路線上對家禽實施嚴格的監視和預防措施，以避免在此關頭爆發不必要的人類疾病。
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原文連結：https://wwwnc.cdc.gov/eid/article/26/12/20-1201_article
來源：生命科學前沿