新冠無症狀感染者是指無相關臨床症狀,如發熱、咳嗽、咽痛等可自我感知或可臨床識別的症狀與體徵,但呼吸道等標本新冠病毒病原學檢測陽性者。無症狀感染者可分為兩種情形:一是感染者核酸檢測陽性,經過14天潛伏期的觀察,均無任何可自我感知或可臨床識別的症狀與體徵,始終為無症狀感染狀態;二是感染者核酸檢測陽性,採樣時無任何可自我感知或可臨床識別的症狀與體徵,但隨後出現某種臨床表現,即處於潛伏期的「無症狀感染」狀態。看到這裡養殖戶朋友們是否會聯想到非瘟越來越多的無症狀豬感染病例呢?
非洲豬瘟在我國肆虐已經一年多,給養殖業造成了巨大的損失,在與之抗衡的戰役中,我們發現,非洲豬瘟感染的豬並不是100%都會死亡,有些甚至在豬場發病以後能安然無恙。這就是我們常說的無症狀感染豬,就像新冠病毒一樣,病情發展到後期,慢慢就會出現無症狀的帶毒者,他們檢測陽性,但是外在無任何相關聯的症狀表現,甚至看起來非常健康。這類型的豬是否會持續排毒,豬場是否可以留下?之後會對復養造成多大的損害?這些都是值得我們深究的。
歐洲機構在研究 ASF 病毒在倖存豬上的傳 播時,選擇低毒力的 ASF 病毒 NH/P68 株 (1968 年葡萄牙毒株 ) 進行豬體內傳代研究,發現 了感染後無症狀及未感染的豬,通過對這些無症狀感染豬的研究。C. Gallardo等人進行了一項體內實驗研究。對4頭家豬接種了NH/P68 ASF病毒,在接種後的72天,再引入兩頭豬進行接觸和病毒暴露,接種的豬出現了亞臨床症狀,並且可以從相關組織中檢測到病毒,後引入的接觸豬表現出輕度或無臨床症狀,但有血清陽性反應,並在接觸後28天檢測到短暫的病毒血症。
ASFV毒株分為高毒、中等毒和低毒毒株。高毒性毒株通常是導致感染後4-9天內死亡率高達100%;中等毒性毒株感染引起急性和亞急性臨床症狀,死亡率在30 - 70%的範圍內;低毒性毒株感染引起的豬常呈現,慢性發病經過,臨床症狀和病變不具有特異性,可能持續數月,引起一系列疾病,症狀包括皮膚潰瘍和關節炎、發育遲緩、消瘦、跛足、肺炎和流產,但死亡率較低,這可能是病毒在發展過程中自然衰減的結果。
試驗方法:
使用毒株:NH/P68分離株(NHV)是一種低毒性的非洲豬瘟病毒毒株,從1968年葡萄牙發生的ASF疫情期間長期感染的豬身上分離得到。四頭豬(C1,C2,C3,C4)分別注射105TCID50病毒量,接種72天後,將另外兩個豬CC13和CC14與感染的四頭豬同欄,每天記錄的七個臨床症狀,分別在感染後的0, 4, 8, 11, 14, 18, 21, 30, 37, 44, 52, 58, 65, 72, 79,86,93,100, 107, 114, 121, 128和134收集血清樣本。分別在接種後的35天 (C1), 65天 (C4), 99天 (C3)和134 天(C2)安樂死感染豬,在暴露後42天(CC14)和62天(CC13) (dpe)安樂死暴露豬。然後用PCR檢測非洲豬瘟病毒。用豬外周血巨噬細胞進行病毒分離和滴定。用酶聯免疫吸附法檢測血清中asfv特異性抗體
結果:
1、感染動物
臨床表現:復發性短暫發熱,關節腫脹,皮膚的紅腫和壞死,體重逐漸減輕,呼吸窘迫伴痙攣性咳嗽超過一個月。在感染35到65天的豬屍檢中發現的肉眼病變包括纖維素性病變,在感染99天進行屠宰的豬患有嚴重肺炎,肺部分有乾酪樣小葉實變和鈣化,胸部淋巴結有局灶性病變。在感染後134 屠宰的無症狀動物(C2)中未發現明顯的病變。
在慢性感染嚴重C1豬中,病毒血症在感染後18天時被檢測到,且在感染35天時被宰殺之前一直呈陽性。有趣的是,儘管回收的各豬血清有相似的Ct值,但在豬C3中沒有發現傳染性病毒,豬C3出現了持續兩個多月的病毒血症。在試驗期間,無症狀動物抗asfv抗體滴度較低,而有症狀動物滴度極高(>105 )。
在感染後的35和65天屠宰的兩隻接種動物的所有組織樣本中,通過PCR檢測到了非洲豬瘟病毒核酸。在PBM細胞中傳代三次後
ASFV分別從16例(84.21%)和12例(63.15%)不同組織樣本中恢復得到了病毒。在感染99天後的安樂死動物中,在採集的19個組織中有12個(63.1%)檢測到病毒基因組,但是病毒只能從肺和縱隔淋巴結中恢復。然而,這些樣品產生高滴度值(>107TCDI50 /毫升)。在134 天屠宰的接種動物(C2)樣本中,未發現ASFV陽性結果。
2、接觸動物
臨床症狀;在感染72天時,將兩頭豬與接種動物同欄成為暴露豬。此時,接種的動物都有高的抗體滴度,其中一個(C3)有弱的病毒血症。在其中一頭接觸型豬(CC14)中,臨床症狀與接種組相似,主要表現為關節腫脹,溫度超過40°C和呼吸系統疾病。第二接觸豬(CC13)除了在暴露後45天時出現40°C以上的微弱發熱峰值外,未出現任何可檢測的臨床症狀。屍檢發現肉眼可見病變,包括肺的乾酪樣壞死和局灶性礦化、氣管腔內纖維蛋白沉積、水腫和部分充血的支氣管淋巴結,這些症狀在CC14(暴露後42天屠宰的豬)身上更為嚴重。
第一個病毒血症高峰出現在暴露後28天時的豬CC14身上,而在感染49和56天時發現了兩個病毒血症高峰。在這兩隻動物身上都發現了抗體。在暴露豬CC14所有檢測組織中均發現了非洲豬瘟病毒核酸,病毒含量在10^6.3–10^8.3 TCID50/ml.在暴露的豬CC13 (暴露62天時)中,19個組織樣本中有10個(52.5%)獲得了陽性PCR結果,但是在原代培養中經過三次傳代後沒有發現病毒.
分析:
高致病非洲豬瘟病毒存在的豬場無疑死亡率非常高,養殖戶可以採取的措施非常有限。但是通過臨床我們發現,非洲豬瘟病毒致死率並不是100%,它在某些豬場引起的症狀非常嚴重,死亡率非常高,但是在某些豬場卻表現症狀輕微。這是因為非洲豬瘟毒株存在致病性差異,對於中、低度致病性毒株感染的豬場,我們可以採取預防和治療措施將損失降到最低,也可以為復養提供數據支撐。實驗中我們可知,慢性感染豬,無症狀陽性豬,以及有症狀陽性豬但是低感染性豬都是存在的,這就解釋了為什麼臨床看起來毫無症狀的豬做PCR檢測時卻能檢查到病毒核酸。那麼,在拔牙過程中,這些豬要怎麼處理?在巴西和伊比利亞半島等受影響地區(1979-1981年)進行的實地研究表明分別有3.5%和0.6%的新非瘟疫情被認為是由最初感染後康復的家豬血清陽性引起的。這些亞臨床症狀或者慢性感染症狀的出現可能由於以前接觸過低劑量的病毒和/或出現了毒性減弱的相關病毒。
實驗表明,在感染99天後,病毒在肺和胸淋巴結中的病毒量(>107TCDI50)足以感染初生豬。病毒在呼吸道等器官的持續存在意味著病毒向其他動物傳播的危險因素,從而可能有助於疾病的傳播和維持。也有實驗表明,在感染後180天以上的接種中等毒力病毒的豬仍然具有感染性。病毒血症倖存的豬能夠從口咽排出病毒至少70天。
在整個實驗研究中,有一個接種動物(C2)始終無症狀,儘管它的抗體反應在感染第8天時被檢測到,並持續到134 天,這表明它感染了ASFV。沒有臨床症狀可能與較低的短暫的病毒血症水平有關,這些病毒血症可能出現在採集第一批血液樣本之前。在組織樣本中沒有分離到ASFV(134 dpi)可能反映了該特定豬的低瞬時病毒血症水平的存在。在無症狀動物中檢測到的抗非洲豬瘟病毒特異性抗體滴度低於發生慢性感染的豬。
小編有話說:該實驗樣本量雖然不多,但是可以為後續實驗和臨床工作提供數據支撐。感染了低毒毒株ASFV的豬能夠在感染後3個月內傳播病毒,並且感染性病毒可在組織中保留長達99天。因此,即使是在非瘟過去一段時間,臨床症狀輕微等情況上依舊不能排除是非瘟的可能。以後非瘟病毒在中國大地存在是常態,並且病毒也會不斷發生變化,為了存活下去出現低致病性和減毒的情況。由上一篇文章中的實驗我們可以知道非瘟病毒在肺臟中存留時間很長,它或許可以通過形成氣溶膠在空氣中傳播。我們不能排除這種病毒可能在某些組織中潛伏感染,然後又在某些自然或誘發條件下(運輸、餵養不足、免疫抑制等)可能被重新激活,從而促進其傳播的可能性。
所以針對非瘟遺留下來的這些沒有症狀不那麼像非洲豬瘟的豬,後續未發病或者後續發病了,實際上它還是因為體內非洲豬瘟病毒引起的。
如果是針對有條件的豬場,做PC確定陽性直接淘汰,但是如果是沒有條件做檢測的豬場,這些無症狀的豬,沒有條件去發現,雖然有的症狀輕微但是也不能排除是非瘟的可能。
症狀輕微的豬場一般是由低毒性感染的毒株引起的,國家規定一經發現絕對撲殺,但是像這種症狀輕微的養豬場,在不確定的情況下後續還是可以通過例如中藥賽力佳,拜耳的強力拜固舒還有類似黃芪多糖,高免多抗肽這些藥物保健,提高免疫力等手段進行挽救,減少最低損失。不管的新冠還是非瘟嚴防死守+提高免疫力才是王道。