不知道TRIS緩衝液怎麼配製?德晟告訴你

2020-12-24 德晟生化試劑原料

生物緩衝液能在加入少量酸或鹼時穩定緩衝系統的pH值,這對創造正常的生理環境起很重要的作用,因為多數細胞僅能在很窄的pH範圍內進行活動,而且需要有緩衝體系來抵抗在代謝過程中出現的pH變化.在生化研究工作中,常常要用到緩衝溶液來維持實驗體系的酸鹼度.研究工作的溶液體系pH值的變化往往直接影響到我們工作的成效.如果提取酶實驗體系的pH值變化或變化過大,會使酶活性下降甚至完全失活.所以我們要學會配製緩衝液.

TRIS作為常用生物緩衝液的一種,常用於生物化學實驗中的TAE和TBE緩衝液(用於核酸的溶解),其氨基可以與醛發生縮合反應。Tris為弱鹼,Tris鹼的水溶液pH在10.5左右,一般加入鹽酸以調節pH值至所需值,即可獲得該pH值的緩衝液,其緩衝液的有效緩衝範圍在pH7.0到9.2之間,但應注意溫度對於Tris的pKa的影響,在室溫25℃下,pKa為8.1。

Tris緩衝液配置方法

Tris-HCl,Tris-EDTA的配製:

一、1M Tris-HCl (pH 7.4,7.6,8.0) 配製1000ml

配製方法:

1.稱量121.1g Tris置於1000ml燒杯中。

2.加入約800ml的去離子水,充分攪拌溶解。

3.按下表加入濃HCl量調節所需要的pH值。

4.將溶液定容至1000ml。

5.高溫高壓滅菌後,室溫保存。

注意:應使溶液冷卻至室溫後再調定pH值,因為Tris溶液的pH值隨溫度的變化差異很大,溫度每升高1℃,溶液的pH值大約降低0.03個單位。

二、1.5M Tris-HCl (pH 8.8)配製1000ml

配製方法:

1.稱量181.7g Tris置於1000ml燒杯中。

2.加入約800ml的去離子水,充分攪拌溶解。

3.用濃HCl調節pH值至8.8。

4.將溶液定容至1000ml。

5.高溫高壓滅菌後,室溫保存。

注意:應使溶液冷卻至室溫後再調定pH值,因為Tris溶液的pH值隨溫度的變化差異很大,溫度每升高1℃,溶液的pH值大約降低0.03個單位。

三、TE即Tris-EDTA buffer(10mM Tris,1mM EDTA,pH7.4 pH7.6 pH8.0)。

10×TE Buffer (pH 7.4,7.6,8.0) 100mM Tris-HCl,10 mM EDTA 配製1000ml

配製方法:

1. 量取下列溶液,置於1000ml燒杯中。

①1M Tris-HCl Buffer(pH7.4,7.6,8.0) 100ml;

②500mM EDTA(pH8.0) 20ml

2.向燒杯中加入約800ml的去離子水,均勻混合。

3.將溶液定容至1000ml後,高溫高壓滅菌。

4.室溫保存。

注意事項

1、緩衝液的pH值受溶液濃度影響較大,緩衝液稀釋十倍,pH值的變化大於0.1;

2、 溫度效應大,溫度變化對緩衝液pH值的影響很大,△pKa/℃=-0.031,例如:4℃時緩衝液的pH=8.4,則37℃時的pH=7.4,所以一定要在使用溫度下進行配製,室溫下配製的Tris-HCl緩衝液不能用於0℃~4℃;

3、 易吸收空氣中的CO2,所以配製的緩衝液要蓋嚴密封;

4、 此緩衝液對某些pH電極發生一定的幹擾作用,所以要使用與Tris溶液具有兼容性的電極。

相關焦點

  • PB緩衝液與PBS緩衝液的區別
    PB和PBS是免疫細胞化學實驗中最為常用的緩衝液,   0.01mol/L的PBS主要用於漂洗組織標本、稀釋血清等,其pH應在7.25~7.35之間,否則需要調整。   0.1mol/L的PB常用於配製固定液、蔗糖等。
  • 一文讀懂緩衝液
    緩衝溶液的選擇與計算為了保證緩衝溶液有足夠強的緩衝能力,在配製緩衝溶液時,需要做到:1)為使共軛酸鹼對的濃度比接近於1,應根據所需要維持的pH範圍選擇合適的緩衝對,使其中的弱酸的PKa等於或接近於所要求的pH,例如,生物培養液中需用
  • 酸度計一點校正是怎樣的,緩衝液是什麼
    採用一點極準方法調整酸度計儀器,時對於測量精度在0.1 pH以下的樣品,一般選用pH6.86或pH7.00標準緩衝液。有些儀器本身精度只有0.2pH或0.1pH,因此儀器只設有一個"定位"調節旋鈕。參考以下操作:  1) 測量標準緩衝液溫度,查表確定該溫度下的pH值,將溫度補償旋鈕調節到該溫度下。  2) 用純水衝洗電極並甩幹。
  • 天津景泰藍聚福金碗_晟德文化用心服務
    天津景泰藍聚福金碗,晟德文化用心服務,北京晟德文化傳播有限公司,簡稱「晟德文化」,成立於2009年。天津景泰藍聚福金碗, 顏色上以「帝王黃」、「中國紅」、「天宇藍」為主色調,深沉的紅色配上大面積黃彩,更有琺瑯極少使用的黑色,讓景泰藍的藍色基調反而不甚顯現,彩斑斕,濃墨重彩,對比強烈。
  • 九州晟欣解析酸度計怎麼使用
    九州晟欣解析酸度計怎麼使用   1.使用方法   (1)安裝   ①電源的電壓與頻率必須符合儀器銘牌上所指明的數據,同時必須接地良好,否則在測量時可能指針不穩。   ②儀器配有玻璃電極和甘汞電極。將玻璃電極的膠木帽夾在電極夾的小夾子上。將甘汞電極的金屬帽夾在電極夾的大夾子上。
  • 實驗專欄丨EMSA實驗技術,你還有多少不知道?
    制膠:配製6.5%的非變性膠,其配方如下:1ml 10×TBE、3.3 ml40% Acrylamide、1ml 50% Glycerol、14.8ml dH2O、20µl TEMED(四甲基乙二氨),混勻脫氣10min後再加入120µl 10%過硫酸氨(AP)混勻灌膠。4.
  • 常用染色液和試劑的配製
    母液配製後放入冰箱可長期保存,一般剛配製的母液染色效果欠佳,保存時間越長越好。臨用時用pH 6.8的磷酸鹽緩衝液稀釋10倍。 三、瑞(Wright)氏染液 稱取瑞氏染料粉末0.1g於研缽內研細後,加入少量甲醇再反覆研磨,最後將全部甲醇(總共60mL)加入研勻,染料全部溶解後,將染液保存於棕色瓶內備用。
  • 實驗員必備,常見滴定液的配製與標定方法匯總!
    標定精密量取本液25mL,加水200mL與硫酸10mL,用高錳酸鉀滴定液(0.02mol/L)滴定,至近終點時,加熱至65℃,繼續滴定至溶液顯微紅色,並保持30秒鐘不退;當滴定終了時,溶液溫度應不低於55℃。根據高錳酸鉀滴定液(0.02mol/L)的消耗量,算出本液的濃度,即得。
  • 20種實驗室常用溶液配製與標定方法
    【標定】精密量取本液25mL,加水200mL與硫酸10mL,用高錳酸鉀滴定液(0.02mol/L)滴定,至近終點時,加熱至65℃,繼續滴定至溶液顯微紅色,並保持30秒鐘不退;當滴定終了時,溶液溫度應不低於55℃。根據高錳酸鉀滴定液(0.02mol/L)的消耗量,算出本液的濃度,即得。
  • 【乾貨】常用緩衝溶液配製方法
    再配製緩衝溶液,不用到處查閱了!常用緩衝溶液的配製方法,表格展示,輕鬆一覽,趕快收藏吧……1.檸檬酸–檸檬酸鈉緩衝液(0.1 mol/L)  pH0.1mol/L檸檬酸(毫升)0.1mol/L檸檬酸鈉(毫升)pH0.1mol/L檸檬酸(
  • Tris-HCl與Bicine-NaOH在生化實驗中的性質比對
    Bicine-NaOH是兩性離子緩衝液體系中的一種,它的優點是可以耐酶解作用和化學作用,並且也不參與和幹擾任何生物化學反應過程。所以,兩種緩衝液通常使用在蛋白、細胞等等生物化學實驗當中。現在著重對兩者製備尿酸酶脂質體的體外性質進行對比。
  • 畢赤酵母表達的培養基配製大全
    如配製MDH,可在上述的MD中加入10ml的100*H即可;   3. 如配製平板,可無菌水的滅菌前,加入15~20g的瓊脂。4℃可保存數月。   配製:   100mM pH6.0磷酸鉀 1.34%YNB 4×10-5%生物素 0.5%甲醇   1. 滅菌700ml 水,   2. 冷至室溫,加入下列:100ml 1M pH6.0磷酸鉀緩衝液, 100ml 10×YNB, 2ml 500×B, 100ml 10×M   3.
  • 雙向電泳的實驗相關試劑配製
    雙向電泳的實驗相關試劑配製 來源:來源網絡 2007-04-06 22:53 1.
  • 堂二裡鎮【晟和嘉苑】什麼產權性質你知道嗎?來電了解詳情木蘭縣
    霸州晟和嘉苑 霸州晟和嘉苑 霸州晟和嘉苑開發商直銷內部價 來電再享萬元豪華精品大禮開發商直銷內部價 來電再享萬元豪華精品大禮開發商直銷內部價 來電再享萬元豪華精品大禮您提供的相關信息僅用於普查目的,除作為統計依據外,不作為對普查對象實施許可、等具體行為的依據。請登錄《陽光連線》()、撥打新聞熱線,或登錄齊魯網(@齊魯網)提供新聞。齊魯網廣告熱線,誠邀合作夥伴。濰坊高新區政務服務中心在全省率先實現「一次辦好」事項全覆蓋。近年來,濰坊高新區政務服務中心圍繞打造優營商環境,法眼|超過退休年齡後受傷,還能享受工傷待遇嗎。
  • ELISA實驗中的封閉液等常用試劑的配製
    4、蔗糖溶液一般在ELISA板子經過BSA封閉後加,當然也有將蔗糖加到封閉液中同時進行處理;那一種更好需要你實驗後來驗證。但多數選擇前者。  封閉劑還可用5%的脫脂乳(市售即可),0.4%的明膠,但是實驗表明前者比較好,後者不容易洗乾淨未結合上的明膠。
  • Thermo Scientific Pierce BCA蛋白定量分析試劑盒和抗體剝離緩衝液
    當你使用Thermo Scientific Restore Western Blot 抗體剝離緩衝液時,就可以忘掉重新開始實驗帶來的煩惱。產品特點:省時-不需重新制膠電泳節省珍貴樣品-在同一張膜上使用相同的樣品重新檢測去除效果好-專利配方,遠優於自製緩衝液溫和配方-在抗體剝離及重新檢測時不會對靶蛋白造成傷害無氣味-不含硫醇意味著無刺鼻氣味經濟-比其他競爭廠商的剝離緩衝液便宜檢測不同的一抗
  • @試劑配製員,關於緩衝溶液,你了解多少?常見的配比方法都在這裡!
    這些不同名目的溶液的正確配製是您實驗成功的基礎,一旦某一種溶液出現問題,不僅導致整個實驗失敗,甚至有時候往往查不出原因而無所適從。今天,我們就來嘮一嘮緩衝溶液相關的知識,了解一下實驗室常見緩衝液的配比方法。首先,我們了解一下什麼是緩衝溶液?緩衝液(Buffer solution)通常是由「弱酸及其共軛鹼」或「弱鹼及其共軛酸」緩衝對所組成的溶液,能夠在加入一定量其他物質時減緩pH的改變。