常用染色液和試劑的配製

2021-01-18 生物谷

一、埃利希(Ehrlich)氏蘇木精染液


先將蘇木精2g溶於100mL乙醇中,再加冰醋酸10mL,混合後加蒸餾水100mL和100mL甘油,然後加硫酸鋁鉀(約10g)至飽和,攪拌均勻,倒入瓶中。將瓶口用1層紗布包著小塊棉花塞上,放在暗處通風的地方,並經常搖動促進「成熟」,直到液體顏色變為深紅色為止。成熟時間約2-4周。若加0.4g碘酸鈉可加快成熟。


二、吉姆薩(Giemsa)氏母液


將吉姆薩粉末1g先溶於少量甘油,在研缽內研磨30min以上,至看不見顆粒為止,再將全部(66mL)剩餘甘油倒入,於56℃溫箱內保溫2h。然後再加入甲醇(66mL),攪勻後保存於棕色瓶中。母液配製後放入冰箱可長期保存,一般剛配製的母液染色效果欠佳,保存時間越長越好。


臨用時用pH 6.8的磷酸鹽緩衝液稀釋10倍。


三、瑞(Wright)氏染液


稱取瑞氏染料粉末0.1g於研缽內研細後,加入少量甲醇再反覆研磨,最後將全部甲醇(總共60mL)加入研勻,染料全部溶解後,將染液保存於棕色瓶內備用。




四、醋酸洋紅染液


將洋紅粉末1g倒入100mL45%醋酸溶液中,邊煮邊攪拌,煮沸(沸騰時間不超過30s),冷卻後過濾,即可使用。也可再加入1%~2%鐵明礬水溶液5-10滴,至此液變為暗紅色而不發生沉澱為止。如製作永久標本染色時,可加入飽和氫氧化鐵或醋酸鐵(媒染劑)溶液數滴,至染色液呈淺藍色為止。 五、硫堇染液(工作液)


①幹液(硫堇):硫堇1g或2g溶於100mL 50%乙醇中,溶解後過濾備用;


②醋酸鈉緩衝液:醋酸鈉·3H2O 9.7g,巴比妥鈉14.7g,溶於500mL蒸餾水中;


③0.1 mol/L鹽酸;


按①:②:③=40:28:32比例配成混合液,調pH5.7±0.2,即得硫堇工作液。


六、0.02%盾納斯綠B(Janus Green B)


用0.9%生理鹽水溶液配製。


七、甲基綠—派洛寧染液(Unna試劑)


派洛寧0.25 g,甲基綠0.15g,95%乙醇20mL,甘油20mL。將以上試劑混合溶解後用0.5%苯酚水溶液稀釋至100 mL。


八、卡諾(Carnoy)氏液


配方1:無水乙醇3份,冰醋酸1份,混勻即可。


配方2:無水乙醇6份,冰醋酸1份,氯仿3份,混勻即可。


九、酸性生理鹽水的配製
將10mL 0.1 mol/L鹽酸加入300mL生理鹽水中,調整其pH值至2.5~3.5。


十、邁耶(Mayer)氏蛋白甘油粘貼劑


取一個雞蛋的蛋清,充分攪拌成泡沫狀,然後用粗濾紙或雙層紗布過濾,經過數小時即可濾出透明蛋白液。再加入等量的甘油並輕輕搖動,使兩者混合。最後加入少許麝香草酚防腐。可保存幾個月,半年以後不宜使用。


十一、血管注射標本色劑


紅色色劑:銀珠3g,明膠15g,蒸餾水100mL;


藍色色劑:普魯士藍1 g,明膠15g,蒸餾水100mL。


將銀珠和普魯士藍分別在研缽內研細,加入溫水少許攪和,將明膠和蒸餾水倒入250mL燒杯內,置水浴鍋中隔水加熱沸騰使明膠完全熔化,過濾後分別倒入盛有銀珠和普魯士藍的研缽內攪拌均勻。最後分別倒回燒杯中,並置入水浴鍋內保溫。水溫視明膠濃度而定。亦可用代用品澱粉(2份)、甲醛(1份)、甘油(1份)、水(6-8份)和其他紅、藍色染料進行配製。先將澱粉、甲醛和甘油混勻,再加入染料進行攪拌,逐漸加入水調勻。


十二、紅細胞稀釋液


稱取氯化鈉0.5g, 硫酸鈉2.5 g, 氯化高汞0.25 g,用蒸餾水溶解至100mL.


十三、白細胞稀釋液
取冰醋酸1.5mL和1%龍膽紫1 mL,混勻,加蒸餾水至100mL。


十四、碘酒


稱取碘2 8和碘化鉀1.5g,先加入少量的75%乙醇攪拌,待溶解後再用75%乙醇稀釋至100mL。


十五、碘液


碘l g、碘化鉀2g,蒸餾水300mL,先將碘化鉀溶解在少量水中,再將碘溶解在碘化鉀溶液中,最後用水稀釋至1000mL。


十六、肝素溶液


純的肝素10mg能抗凝100mL血液。如果肝素的純度不高或已過期,所用的劑量應增大2-3倍。一般可配1%肝素於0.9%生理鹽水中使用。


十七、草酸鹽抗凝劑


稱取草酸銨1.2s、草酸鉀0.8 g,加蒸餾水至100mL。為防止黴菌生長,可加40%甲醛溶液1 mL。


十八、檸檬鈉抗凝劑


常配成3%-5%蒸餾水溶液。每毫升血加3-5mg即可達到抗凝目的


十九、D—76顯影液


稱取米吐爾28g,無水亞硫酸鈉100g,幾奴尼5g,硼砂2g,依次逐個溶解於750mL(50 ℃)的水中,最後加水至1 000 mL。


二十、D—72顯影液


稱取來吐爾3.1g、無水亞硫酸鈉45 g,幾奴尼12g,無水碳酸鈉67.5g,溴化鉀1.9g,依次逐個溶解於 750mL(50℃)的水中,最後加水至1000mL。


二十一、SB—1停顯液


取28%醋酸48mL稀釋至1 000mL。(28%醋酸用98%濃度的冰醋酸3份,加水8份混合而成。


二十二、F—5酸性定影液


稱取硫代硫酸鈉240g,無水亞硫酸鈉15g,醋酸(28%)45 mL、硼酸7.5g,硫酸鋁鉀15g,依次逐個溶解於 700mL(50℃)的水中,最後加水至1000mL。

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