2月5日，來自軍事醫學科學院放射與輻射醫學院研究所、第四軍醫大學西京醫院、日本京都大學和華中農業大學獸醫學院等處的研究人員，在Nature旗下子刊《Gene Therapy》發表一項最新研究成果，題為「Harnessing the clustered regularly interspaced short palindromic repeat (CRISPR)/CRISPR-associated Cas9 system to disrupt the hepatitis B virus」。 在這項研究中，研究人員探討了靶定HBV抗原（HBsAg）編碼區的CRISPR/CRISPR相關Cas9系統，在細胞培養系統和活體動物體內的效果。結果表明，CRISPR/Cas9可在體內和體外抑制HBV複製和表達，可能是HBV感染一種新的治療策略。
乙型病毒性肝炎是由B肝病毒（HBV）引起的、以肝臟炎性病變為主，並可引起多器官損害的一種疾病。B肝廣泛流行於世界各國，主要侵犯兒童及青壯年，少數患者可轉化為肝硬化或肝癌。因此，它已成為嚴重威脅人類健康的世界性疾病，也是我國當前流行最為廣泛、危害性最嚴重的一種疾病。目前，對B型肝炎病毒（HBV）感染的治療方法還是有限的。
近年來，基因組編輯工具應用廣泛，而成簇的規律間隔的短回文重複序列（CRISPR）技術更是掀起了基因組編輯的熱潮。CRISPR是自然存在於細菌DNA中的序列，與CRISPR相關（Cas）核酸酶共同起作用，指導RNAs保護細菌基因組免受侵入性噬菌體中檢測到的靶向特異性序列的攻擊。最近已經出現原理論證研究，利用該系統的高序列特異性，來治療動物模型中的遺傳性疾病，以及製備來源於受影響患者的無病幹細胞。CRISPR還可讓我們製備具有特異基因突變的小鼠模型，能比現有方法在更短的時間段內達到研究目的。據報導，在2014年早些時候， CRISPR-Cas系統已經成功作為一種工具，在人類細胞中執行高效、高特異性的全基因組篩選，2014年在增強靶標特異性方面已經取得了巨大的進步，從而為尋找人類健康和疾病相關的基因功能，開闢了無限的可能性。
在這項研究中，研究人員探討了靶定HBV表面抗原（HBsAg）編碼區的CRISPR/CRISPR相關Cas9系統，在細胞培養系統和動物活體內的效果。研究人員通過定量酶聯免疫吸附測定，分析了細胞培養基和小鼠血清中的HBsAg水平。利用定量PCR和HBsAg表達，研究人員評估了小鼠肝臟組織中的HBV DNA水平。
結果發現，經過CRISPR/Cas9處理後，細胞培養物和小鼠血清所分泌的HBsAg量降低。免疫組化分析結果表明，在CRISPR/Cas9-S1+X3處理的小鼠肝臟組織中幾乎沒有HBsAg陽性細胞。CRISPR/Cas9系統可有效地在HBV DNA中產生突變。因此，CRISPR/Cas9可在體內和體外抑制HBV的複製和表達，從而可能是HBV感染一種新的治療策略。（生物谷Bioon.com）
Harnessing the clustered regularly interspaced short palindromic repeat (CRISPR)/CRISPR-associated Cas9 system to disrupt the hepatitis B virus
doi：10.1038/gt.2015.2
The current therapies to treat hepatitis B virus (HBV) infection are limited. Recently， clustered regularly interspaced short palindromic repeat (CRISPR) systems， originally identified in bacteria and archaea， have been found to consist of an RNA-based adaptive immune system that degrades complimentary sequences of invading plasmids and viruses. Here， we studied the effects of the CRISPR/CRISPR-associated Cas9 system that was targeted to the surface antigen (HBsAg)-encoding region of HBV， both in a cell culture system and in vivo. The HBsAg levels in the media of the cells and in the sera of mice were analyzed by a quantitative enzyme-linked immunosorbent assay. The HBV DNA levels were assessed by quantitative PCR and HBsAg expression in mouse livers was assessed by an immunohistochemical assay. The amount of HBsAg secreted in the cell culture and mouse serum was reduced by CRISPR/Cas9 treatment. Immunohistochemistry analyses showed almost no HBsAg-positive cells in the liver tissue of CRISPR/Cas9-S1+X3-treated mice. The CRISPR/Cas9 system efficiently produced mutations in HBV DNA. Thus， CRISPR/Cas9 inhibits HBV replication and expression in vitro and in vivo and may constitute a new therapeutic strategy for HBV infection.