彎曲菌顯色培養基
HiCrome Campylobacter Agar Base
原理
HiCrome彎曲菌顯色培養基 可支持彎曲桿菌的豐饒生長,在此培養基中呈現淺紫至紫色的菌落。
培養基中氯化鈉維持滲透壓。蛋白腖混合物提供碳源、氮源化合物、長鏈胺基酸、維生素和其他必需的生長因子。蔗糖是可發酵的碳水化合物。抗生素——彎曲桿菌選擇性添加劑(貨號:FD178)減少正常腸道菌群的生長,同時增強糞便標本中空腸彎曲菌的生長和恢復。
傳統的彎曲菌培養基,是使用改良的黑色活性炭頭孢哌酮脫氧膽酸瓊脂(mCCDA)【6】。但彎曲菌菌落在黑色的培養基上為無色,通常很難檢測到。因此HiCrome彎曲菌顯色培養基在mCCDA培養基基礎上研發出來,其鑑別能力遠遠高於mCCDA培養基。
局限
空腸彎曲菌的培養應在42℃進行(通常是35-37℃培養),因為它是嗜溫微生物。更高的溫度會抑制伴隨的微生物菌群而促進空腸彎曲菌的生長而表現出選擇性。
培養基組分
應用
對食品和臨床樣品對彎曲桿菌進行選擇性分離和鑑定。
背景
彎曲桿菌在環境中普遍存在,棲息於各種生態位中【2】。感染彎曲桿菌是人類細菌性胃腸炎最常見的原因之一【2】。大多數菌種被發現在動物(牛、豬)中引起不孕和流產【1】。空腸彎曲桿菌和結腸彎曲桿菌攝入後都導致嚴重腹瀉【4】。
標本類型
臨床標本——食品、糞便
標本收集和處理
對於食物樣本,根據樣本類型,按照指南採取適當的樣本採集和處理技術【9】。
對於臨床樣本,用肛拭子採集糞便標本。可直接接種培養,或插入Cary-Blair運送培養基中送檢【7】,【8】。
提醒和預防
打開容器前請閱讀標籤。戴防護手套/防護服/眼睛防護/面部防護。在進行標本和培養的菌液處理時,請遵循微生物學實驗室良好操作規範。處理臨床樣本時,標準防護應遵循已制定的指南。安全指南請參照單獨的安全數據表。
應用
從食物和臨床樣本中選擇性分離和初步鑑定彎曲菌。
質量控制
● 外觀——乳白色至黃色均一自由流動的粉末
● 成膠性——牢固,與1.5%瓊脂凝膠相當
● 製備好的培養基的顏色和透明度——在平皿中為黃色透明至輕微不透明凝膠
● 配比濃度——在25℃下5.95%w/v(5.95g/100ml水)水溶液,pH:7.4±0.2
● pH值——7.20-7.60
配製
在500ml蒸餾水中溶解29.77g。加熱至沸騰以完全溶解。15磅(121°C)高壓滅菌15分鐘。冷卻到45-50°C。無菌加入1管水化的彎曲菌選擇性添加劑(貨號:FD178),在倒入無菌培養皿之前充分混合。
培養結果
在加入彎曲菌選擇性添加劑(貨號:FD178)後,35-37℃孵育24-48小時觀察培養特徵。
參考文獻
1. Koneman E. W, Allen S. D., Janda W. M,Schreckenberger P. C., Winn W. C. Jr, 1992, Colour Atlas and Textbook ofClinical Microbiology, 4th Edition, J. B. Lippincott Company.
2. Manning H., Duim B., Wassenaar T.,Wagenaar A., Ridley A., Newell D.G., 2001, Appl. Environ. Microbiol., 67:1185
3. Humphrey, T.,S.O'Brien, andM.Madsen.2007.Campylobacters as zoonotic pathogens: a food productionperspective. Int. j. Food Microbiol. 117:237-257.
4. International Organization forStandardization. 2006. ISO 102721, Microbiology of food and animal feedingstuffshorizontal method for detection and enumeration of Campylobacter spp.-Part 1; Detection method. ISO, Geneva.
5. U.S.Food and Drug Administration. 2015, Bacteriological analytical manual online.Available at: http://www.fda.gov/Food/FoodScienceResearch/LaboratoryMethods/ucm2006949.htm. Accessed 1 March 2015.
6. Bolton, F.J., D. N. Hutchinson, and D.Coates.1984, Blood free selective medium for isolation of Campylobacter jejunifrom faeces.J.Clin.Microbiol.19:169-171.
7.Isenberg, H.D. Clinical MicrobiologyProcedures Handbook. 2nd Edition.
8. Jorgensen,J.H., Pfaller , M.A., Carroll,K.C.,Funke, G., Landry, M.L., Richter, S.S and Warnock., D.W. (2015) Manual of Clinical Microbiology, 11th Edition. Vol. 1.
9. GB4789.9-2014《食品安全國家標準食品微生物學檢驗空腸彎曲菌檢驗》