細胞克隆率可反映胎牛血清的促細胞生長能力

2020-10-31 DY締一生物

胎牛血清主要用於細胞生長和增殖，維持細胞正常生理狀態。其中，促生長試驗是評價胎牛血清的質量指標之一。好的胎牛血清，既不能添加一些額外的生長因子，又不能缺乏天然的必要的營養。

對於天然採集的胎牛血清，促細胞生長能力是一個總的評價指標。那麼，這個指標是如何進行檢測的呢？下面小編為你分析一下。

其中一項關鍵指標是它表現為細胞克隆率。

它是指細胞在低密度下的接種，然後觀察克隆的形成。對於評估血清批次的品質，這是一個非常靈敏的檢查。它反映細胞總體或平均的生長狀況。

對於每個血清批次，可先加20mlFBS到180mlEMEM中，0.22μm過濾除菌，4℃保存。


對每個細胞系和每個批次血清，標記10個直徑60mm的平皿。標記在平皿的側壁靠下部分，包括對照。


每個平皿加入5ml含10%待測FBS的培養基，加入400個細胞。


在細胞培養箱中37℃，5%CO2孵育10-14天。


棄掉上清，加入足量石炭酸復紅-亞甲基藍溶液，覆蓋每個平皿，作用10分鐘。


棄掉染液，用蒸餾水衝洗幾遍。平皿倒置在吸水紙巾上，風乾。


計數並記錄陽性克隆數，以及陽性染色克隆的總表面積（Mm2）。計算均值和標準差。


接受標準：接種效率%=克隆數÷接種細胞數×100，比較FBS批次之間的結果，選擇一個好的批次。


無論是胎牛血清，還是新生牛血清，細胞克隆率都可反映血清促細胞生長的能力。好的血清，細胞克隆率高。以新到貨的Ausbian精製新生牛血清為例，該批次的細胞克隆率檢測為86%，在可接受範圍內，品質還是很好的。總之，細胞克隆率是反映血清的一個質量標準，值得關注。

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    透析胎牛血清也是用於細胞培養，但同時，又有自己的一些特殊應用。本文締一生物為您分析透析胎牛血清的三大用途。他們將該病毒的F蛋白（融合蛋白）序列克隆入質粒內，並轉染293T細胞。在這其中，透析胎牛血清的使用必不可少，即給細胞創造一個無外源胺基酸幹擾的環境。二、細胞水平的藥物篩選例如：有人要從化合物庫中篩選S1P4受體的拮抗劑，以抑制流感病毒帶來的免疫激活導致的肺損傷。他採用報告基因進行監測。
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