上海酶聯生物科技有限公司專業供應ELISA試劑盒,試劑盒,檢測試劑盒,人ELISA試劑盒,大鼠ELISA試劑盒,小鼠ELISA試劑盒,ELISA試劑盒,ELISA KIT,兔子ELISA試劑盒,豚鼠ELISA試劑盒,牛ELISA試劑盒,羊ELISA試劑盒,狗ELISA試劑盒,豬ELISA試劑盒,倉鼠ELISA試劑盒,試劑盒,檢測試劑,抗體,細胞株,培養基,腫瘤壞死因子,白介素2,幹擾素,標準品,對照品,生物試劑,標誌物,抑制因子,抗原,瓊脂,細胞生長因子等。人皮質醇ELISA 檢測試劑盒試驗原理: Cortisol試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA).已知Cortisol濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將Cortisol和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌後,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然後加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中Cortisol的濃度呈比例關係。自備材料蒸餾水。加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。振蕩器及磁力攪拌器等。安全性避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請儘快用水衝洗。實驗中不要吃喝、抽菸或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒裡的任何成份。人皮質醇ELISA 檢測試劑盒操作注意事項試劑應按標籤說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過後的標準品應丟棄,不可保存。實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。使用一次性的吸頭以免交叉汙染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。使用乾淨的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒裡的各種成份及樣品。洗滌酶標板時應充分拍幹,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露於光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成後應立即讀取OD值。加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。人皮質醇ELISA 檢測試劑盒樣品收集、處理及保存方法血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液後,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用於檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反覆冷凍。儘可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍並確保樣品均勻地充分解凍人皮質醇ELISA 檢測試劑盒操作步驟使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的儘量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋後加入50ul於反應孔內。加入稀釋好後的標準品50ul於反應孔、加入待測樣品50ul於反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍幹。重複此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍幹。重複此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液後應立即測定結果。在450nm波長處測定各孔的OD值。局限6號標準品以上的結果為非線性的,根據此標準曲線無法得到精確的結果。試劑盒性能1. 靈敏度:最小的檢測濃度小於1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關係數R值為0.990。2. 特異性:不與其它細胞因子反應。3. 重複性:板內、板間變異係數均小於10%。人皮質醇ELISA 檢測試劑盒結 果 判 斷 與 分 析1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的Cortisol標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的Cortisol含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。3、檢測值範圍:0-800ng/ml4、敏感度: 1.0 ng/mlGoat anti-Guinea IgG/HRP 辣根過氧化物酶標記羊抗豚鼠IgG 0.1mlTIMP-2(Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-2) 金屬蛋白酶組織抑制因子-2抗體 0.1mlTIMP-2(Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-2) 金屬蛋白酶組織抑制因子-2抗體 0.2mlTIMP-3(Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-3) 金屬蛋白酶組織抑制因子-3抗體 0.1mlTIMP-3(Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-3) 金屬蛋白酶組織抑制因子-3抗體 0.2mlTIMP-4(Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-4) 金屬蛋白酶組織抑制因子-4抗體 0.1ml
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