新冠檢測能像測孕試紙那樣實現快速檢測嗎？

2020-09-04 義翹神州

新冠病毒檢測技術已經取得快速進展，全球各地的研究人員開發了超過200多種診斷檢測方法，目的是不斷提高檢測精度，縮短檢測時間，滿足現場檢測的應用。目前新冠病毒檢測根據生物標記物，大致可以分為兩類：基因檢測，以及血清學和抗原檢測。從技術上來分類，可以分為分子診斷（MDX）和側向流動檢測（LFA, Lateral Flow Assay）。LFA就是受孕試紙檢測的原理。在臨床上檢測的標準是定量逆轉錄聚合酶鏈式反應（qRT-PCR），但是這需要中心實驗室環境，且檢測時間超過2小時，從樣本採集到結果可能需要數日，難以滿足即時檢測的需求。

COVID-19診斷方法匯總

抗原診斷試劑的技術原理通常採用敏感且特異、偶聯某個比色標記的結合抗體或適配體，通過色譜分析或酶促反應檢測樣本中的病毒抗原。側向流動技術（LFA）也稱為側向流動免疫色譜技術，使用固定在纖維素膜或紙上的抗體捕獲樣品中的待測物，再通過比色標記進行檢測。標準的LFA主要由四部分組成：樣品墊、結合墊、反應膜和吸收墊。同時在整個體系中至少需要兩種抗體：捕獲抗體（Capture antibody）和檢測抗體（Detector antibody）。

LFA檢測示意圖

構建LFA檢測的關鍵步驟是篩選合適的抗體，本研究選擇21種抗核衣殼蛋白抗體進行隨機組合配對。將673對抗核衣殼抗體對作為捕獲和檢測試劑，查找對新冠病毒核衣殼蛋白的表位親和力佳，能用於LFA檢測的合適抗體對。通過四輪測試，研究人員確定了幾個候選抗體對，這些抗體對將進一步用於開發新冠病毒的LFA檢測。

從圖中我們可以看出，來自義翹神州（Sino Biological）幾種核衣殼抗體表現較佳，在四輪測試中，不管是用做捕獲試劑還是檢測試劑，均有排名在前五的抗體或抗體對，尤其是在第一輪測試中，前五名抗體對基本來自義翹神州。這些抗體包括抗SARS-CoV/SARS-CoV-2核衣殼蛋白鼠單抗（Cat: 40143-MM08和Cat: 40143-MM05）和兔單抗（Cat: 40143-R001和Cat: 40143-R004）。

為了驗證高、中、低三組樣本之間的差異，利用6例SARS-CoV-2陽性、3例SARS-CoV-2陰性和2例潛在冠狀病毒交叉反應樣品進行抗體對篩選。結果如下表，義翹神州的抗核衣殼抗體同樣表現優秀。

在本次研究中對673對抗SARS-COV-2核衣殼蛋白的抗體對進行篩選，獲得幾個商品化的候選抗體用來開發檢測新冠病毒LFA技術。鄭重聲明：本文研究是開發LFA檢測的必要步驟，但還屬於實驗室階段，尚不能用於體外檢測。


參考文獻：

David Cate, et al. Antibody Screening Results for Anti-Nucleocapsid Antibodies Towards the Development of a SARS-CoV-2 Nucleocapsid Protein Antigen Detecting Lateral Flow Assay. ChemRxiv.

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