定標的意義:定標就是要找出一個參考點,就是確定一個K值(或F值)。它是由儀器與試劑的狀態確定下來的。當我們測定一個標本時,無論您是用手工的方法或全自動生化分析儀,測定出來的值只是一個吸光度,這個吸光度對我們沒有什麼意義,我們要把這個吸光度轉換成一個濃度或是酶的活性。那就要乘上一個K值,計算並列印出來的結果對我們來說就是有意義的了。K值就是我們通過定標找出來的。一般上最低要求是有試劑空白與標準品。經過儀器測定出來兩個吸光度:
標準液的濃度是已知的,這兩個吸光度可以由儀器測出,這樣就可以得到一個K值。無論什麼樣的標本,用其吸光度乘以K值我們就得到了答案。因此,K值具有非常決定性的意義,可以決定標本的準確性。K值的決定因素:我們看看K值會受到什麼影響呢?第一,標準液的濃度一定要準確(標準液最好與標本一樣是以血清為基質的)。第二,標準液的吸光度與試劑空白的吸光度一定要準確。吸光度受儀器狀況、試劑狀況的影響,如果您的儀器相當穩定,試劑是影響K值的一個主要因素。如何確定K值是正確的?一般我們用質控血清來檢查,最好是兩種水平的質控來檢查,如果質控結果很好,可以說K值是準確的,用這個K值計算出來病人的結果也是準確的,所以K值非常關鍵。K值的真面目:K值實際上代表了斜率,截距代表試劑空白,試劑空白每天都在變化,所以K值的穩定性決定您的儀器與試劑,如果儀器與試劑都十分穩定,那K值也很穩定。多長時間定一次標合適?這要看您試劑的穩定性,質控結果不好,有些項目做試劑空白可以解決,有些項目要做兩點定標。
二是用有酶項目的定標液得出K值:目前很多公司可以提供多項目的定標液,不僅有底物類的項目,也有酶類的項目。定標之後,有了定標結果,如何判斷這個結果的好壞呢?經常有老師和我說,張工,定標通過了,可是結果咋還不好呢?我和老師開玩笑說:您給我一瓶可樂當做試劑(或定標液),我讓他定標就能通過。如何實現呢?可樂是有顏色的,參數中設定少加可樂多加水(AU儀器可以使用濃縮試劑),使用大一點的波長(目的是要讓吸光度在0.0000-2.5000之間),只要讓空白的吸光度和標準液的習慣度有一點點差距(這兩個的吸光度不能一模一樣,吸光度差為0,因數K值就變成無窮大),滿足以上條件後,定標就一定通過!如果您使用的原廠試劑,原廠參數裡面絕大多數項目會提供一個因數的範圍,如果您定標後的K值正好是因數範圍的中值,恭喜您,表明您這臺儀器的狀態和在廠家實驗室的狀態是一模一樣的。表明儀器的狀態、試劑的狀態、水機的狀態等等條件都非常非常的好。如果您使用的國產儀器或者國產試劑,廠家並沒有提供因數的範圍,怎麼辦呢?方法是自己摸索,每定標一次就記錄一次因數,累計的足夠的次數,自己就可以確定因數的範圍了,如果用錯了定標液定標就會失敗,老型號儀器儀器還是會用最後一次定標成功的K值來計算病人結果的,新型號的機型會沒有結果,所以定標後一定要觀察定標後的K值以及定標是否成功。那麼定標結果和質控結果是什麼關係呢?請不要反駁我,站在我的角度考慮,K值在靶值比質控在靶值更好,比如,樣品針有些微微堵塞,比如應該加樣量是2.0微升,由於堵塞加了1.8微升,由於定標質控的粘度差不多,定標液少加,質控液也少加,質控結果不管是正常水平還是病理水平的都可能是在靶值附近的,但是,儀器確實是有問題的。
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