第一使徒（亞當）
亞當是造成「第二次衝擊」的原因之一。在南極出現的發光的巨人就是他的姿態，外形上與EVA極為相似，有著巨大的光翼。於2000年在南極冰層發現時，其胸部有朗基努斯之槍，當槍拔除後甦醒並暴走。之後被SEELE還原成最初的胚胎型凝固在樹脂中，由加持攜帶二號機與明日香一同由德國NERV支部返回第三新東京市。
亞當與莉莉絲是生命之源，人類、EVA和使徒都是由他們而生。
亞當參照《聖經》中第一個人類。
第二次衝擊結束後，亞當失去了光之巨人的體型，其肉體被SEELE回收並還原成了手掌大小的卵裝而且還被封在了樹脂中（即使如此失去靈魂的亞當肉體仍然擁有強大的力量，魚天使在海中感應到了父親亞當的存在並前來尋找，成為了眾使徒中唯一有幸與亞當擦肩的幸運兒）。其靈魂也被SEELE找到並被放到人造人的體內，即渚薰。
第二使徒（莉莉絲）
在人類探索日本下的黑之月時發現，她的靈魂被分離出來，附於綾波麗身上，所以才會有融合的一幕。在碇司令的主導下開始進行E計劃，對使徒進行復原及修復工作，釘於地下最深處TerminalDogma中央教條十字架。她的形象是NERV本部的最下層禁區「最終教條」的十字架上的擁有七隻眼的巨人（LILITH之眼=SEELE標誌），原先她只有上半身，但朗基努斯之槍被拔去後，開始長出足，並且腹部開始膨脹，有妊娠現象。當她再次覺醒時就會發生第三次浩劫，所有生命都將回到她的體內，變成一個以整體形式存在的生命體。（人類補完）
人類發現莉莉絲的時候，尚未了解其正體為何，依其形態巨大且單一的特性將其定義成繼亞當之後的第二使徒。後來知道這其實是人類的起源之後，也沒有刻意去正名「莉莉絲並非使徒」。對碇源渡來說這是掩飾情報的好機會。他將放置在NERV總部下方的莉莉絲稱為亞當，並把朗基努斯之槍插在她身上來固定其形態。因此「第二使徒是莉莉絲是當初人為定義的錯誤結果」。「使徒」只是人為定義上的一種行為，並不是「真理」，因此不管人類如何定義莉莉絲，她也不會變成攻擊人類的使徒。
第三使徒（水天使/薩基爾）
從還中襲來的使徒，在死海文書中被稱為水天使，意味著掌管水的天使，他的名字原意為「神之命令」，居住於天堂的第一層「剎馬伊姆」，與凡間接壤，據說是監視人類的存在，故此在其墮落後擁有邪視的能力，這雙邪眼中射出的光線最具殺傷力。
經MAGI系統的調查證明其不但是非遙控操作，而且是具有學習、再生的智慧體。由掌中發出的光之槍攻擊對手，並且從眼狀部位發射破壞光線，受到聯合國軍方的N2地雷（相當於核彈）攻擊之後，長出第二張面孔。人類的無能在他壓倒性的戰力面前暴露無遺，之後，因初號機暴走而自爆。
第四使徒（晝天使）
晝天使有飛行和垂直戰鬥兩種形態，他的觸手有如兩條高熱的鞭子，能切割並溶解與其解除的物質。
第五使徒（雷天使/雷米爾）
人類的敵人，是人類其他可能的存在形式，外形為正八面體的使徒，是攻守兼備的要塞。可以以A.T.Field來防禦一切物理攻擊，之後立即使用加速粒子炮進行攻擊使得EVA根本無法近身作戰。剛出動的初號機也受到險些致命的打擊，後被美裡制定的「屋島作戰計劃」擊破。
第六使徒（魚天使）
能在水中高速移動，水中完全是他的主場，為了加持手上的亞當而攻擊太平洋艦隊，導致太平洋艦隊損失慘重。最後在二號機和戰艦的配合下被毀滅。也是唯一一個全片中最接近亞當的使徒。
第七使徒（不明生物體/音樂天使）
不明生物體，是人類其他可能的存在形式，第七使徒是從紀伊半島來襲的使徒，能隨意分離合體擁有雙核心結構，遠近攻擊能力也都比較優良，曾多次化解EVA的攻擊。最終的作戰方式是以加持良治的猜想，有美裡提出而完成。在真嗣和明日香合作的舞蹈攻擊下，同時擊破他的雙S2機關。
第八使徒（胎天使）
在淺間火山的熔巖探測出的藍色波長的信色，是還處於胎兒期的第八使徒。NERV原本打算將其活捉，但由於其急速孵化成形而失敗，最後轉為將其消滅。可在高溫高壓的熔巖裡進行高速移動，是環境適應力驚人的生物。最後被明日香駕駛二號機利用熱膨脹原理用諧振刀擊破。
第九使徒（不明生物體/雨天使）
巨大的蜘蛛狀的第九使徒MATOLIEL，在NERV遇到人為破壞停電期間探測到NERV本部位置（懷疑是SEELE的行為），並以強制進行嘗試性攻擊。遭到EVA三機的合作攻擊，由初號機步槍射擊後活動停止，它似乎是十七個使徒中最弱的一個。