離子交換層析的選擇及應用

2021-01-21 生物製藥合伙人

a. 樣品複雜或者前處理不到位:層析前離心或過濾處理樣品,或者優化層析體系,選擇合適的離子交換填料和層析體系(緩衝液)

b. 樣品粘度態高:用緩衝液適當的稀釋樣品,或者選擇高解析度填料(如SP-HPR等進行優化,降低上樣量等嘗試優化。

c. 清洗不徹底:增加清洗的柱體積數

d. 洗雜不徹底:優化洗雜的條件,增加洗雜的柱體積數

e. 目標物出現降解:優化層析條件,選擇合適的層析條件或者添加蛋白穩定劑等

f.  柱料裝填效果不佳:裝填的不均勻,柱效低,重新裝柱

g. 分離柱頂部有較大的儲樣體積:裝柱避免分布器離柱料上層液面太高,應保持在0.5cm高度以內。

h. 洗脫條件不佳:優化洗脫條件,比如緩慢的拉鹽梯度洗脫

i.  填料解析度下降:對填料進行清洗或者更換填料。

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