數字PCR是一種新的絕對定量PCR,主要是對PCR反應物進行有限稀釋,隨後在不同的反應腔室裡進行PCR擴增,最後根據泊松分布原理及陽性微滴的個數與比例得出靶分子的起始拷貝數或濃度的技術。
MicroDrop™數字PCR平臺是由永諾生物自主研發並已投入生產的微滴式數字PCR檢測系統,是擁有完全自主智慧財產權的微滴式數字PCR儀,可廣泛應用於科研、醫療、出入境檢驗檢疫等領域。
技術特點:
l 絕對定量,不依賴Ct值,無需標準曲線
l 超高靈敏度,適用於稀有序列及稀有突變的檢測
l 準確的定量結果和優異的重複性
l 適用複雜樣品檢測,不易受PCR抑制物影響
核心優勢:
l 高靈敏度——數字PCR的靈敏度與同體積反應體系的分割份數成正比。
l 解析度——低至0.1倍基因表達差異
l 絕對定量——根據每個微滴所含平均拷貝數以及泊松分布進行計算,從而得出檢測樣本的絕對拷貝數。同時無需依賴標準曲線。
MicroDrop™微滴式數字PCR系統由MicroDrop-100A樣本製備儀、基因擴增儀、 MicroDrop-100B流式微滴檢測儀、以及QuantDrop分析軟體四個部分組成,整套系統均具有完全自主智慧財產權。
檢測原理:
檢測流程:
MicroDrop-100系統產品特點:
一、適應性廣,靈活性高
1、理論上可覆蓋qPCR(螢光定量PCR)的所有應用
2、樣本多樣性,樣本通量可達96個樣本,支持靈活設定
3、開放式平臺,支持用戶自行開發試劑、產品。
二、靈敏度高,準確性高
1、絕對定量——無需依賴標準曲線
2、採用微滴式技術高達100,000個的微滴
3、線性範圍達到6個數量級,靈敏度高達萬分之一
三、可分析複雜混合物
1、準確度不完全依賴於擴增效率
2、雙通道螢光檢測,支持EvaGreen染料及探針法
3、支持多重數字PCR
四、操作簡單,使用方便
1、全封閉防汙染設計,一鍵式自動化操作。
2、可選全中文分析軟體
儀器特點:
MicroDrop-100A樣本製備儀
1、單張晶片一次可處理8個樣本;
2、20微升體系生成100,000微滴;
3、單次微滴生成僅需2分鐘;
4、一鍵式自動化操作。
儀器參數 | |
樣本體積 | 20μl |
容量 | 1~8個樣本 |
微滴總數 | 100,000 |
反應時間 | 2分鐘/晶片 |
儀器尺寸(寬x深x高) | 300*400*145mm |
MD Detector 微滴檢測儀
1、全封閉體系,自動化流程操作;
2、FAM、VIC雙通道螢光檢測;
3、檢測靈敏度高達萬分之一;
4、通量達96個樣品。
儀器參數 | |
線性範圍 | 6個數量級 |
通量 | 1~96個樣本 |
檢測通道 | FAM 、HEX (VIC) |
儀器尺寸(寬x深x高) | 700*500*325mm |
MicroDrop-100:QuantDrop數據分析軟體
數字PCR的應用
檢驗檢疫 食品安全
•轉基因食品檢測(國標)
•病原菌鑑定
•動物源性檢測分析
科研
•基因表達差異監測
•CRISPR-Cas9基因編輯結果驗證
•甲基化含量鑑定
•單細胞研究:測序、PCR
臨床
•腫瘤液體活檢:早篩、用藥、監測、復發
•無創產前篩查:低成本、快速
•感染性疾病:HBV、HIV定量
創新點:
1.領先行業的10萬個微滴數,保證泊松分布所需要的充分的樣本量。2.流式檢測,順序逐一檢測每個微滴,無螢光交叉幹擾,微滴陰性陽性判讀準確,3.2個光電倍增管(PMT),靈敏度及增益優於MPCC或CCD4.正壓生成油包水的液滴。
永諾生物MicroDrop-100數字PCR系統
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