永諾生物一步法逆轉錄數字PCR技術 助力新冠病毒檢測

2020-12-01 儀器信息網

近期，湖北省武漢市爆發的新型冠狀病毒（2019-nCoV）感染肺炎疫情牽動著每一個中國人的心。目前，確診感染者數量急速上升，疫情正在向全國各省市迅速蔓延。無數醫務人員奔赴前線與病毒作戰，但他們並非孤軍奮戰！作為抗擊疫情的幕後支持者，大量科學儀器廠商義無反顧投身疫情防控工作中，加緊研發疫情解決方案，全力支援疫情防控工作。

永諾生物，這家以數字PCR技術為核心的分子診斷公司，於2020年1月21日開發出基於數字PCR系統的檢測試劑盒。

儀器信息網：針對此次新型冠狀病毒（2019-nCoV）感染肺炎疫情，貴單位推出了什麼樣的檢測儀器、試劑和解決方案？有何特點？

永諾生物：自2019年12月本次2019-nCoV新型冠狀病毒肺炎爆發以來，永諾生物醫療團隊於2020年1月21日率先開發出基於數字PCR系統的檢測試劑盒（見圖1）。

圖1.永諾生物新型冠狀病毒（2019-nCoV）核酸檢測試劑盒（數字PCR法）

該試劑盒依託於永諾生物MicroDrop-100數字PCR平臺（見圖2）進行研發。

圖2.永諾生物MicroDrop-100微滴式數字PCR系統

該試劑盒採用一步法逆轉錄數字PCR技術，參考2020年1月13日世界衛生組織推薦的檢測方法並結合2019-nCoV序列進行引物探針設計，將RNA逆轉錄及數字PCR擴增整合到一個反應體系，單管雙檢同時測定2019-nCoV ORF1ab基因及N基因，消除由於病毒變異帶來的漏檢風險，同時引入了人內源性管家基因RPP30對檢測全流程進行監控，確保檢測結果的真實可靠。該試劑盒檢測陽性企業參考品及陰性企業參考品結果如下（見圖3）。

圖3 .新型冠狀病毒（2019-nCoV）核酸檢測試劑盒（數字PCR法）檢測陽性企業參考品及陰性企業參考品

與目前基於螢光定量PCR平臺的新型冠狀病毒檢測試劑盒相比，該試劑盒採用了數字PCR平臺進行研發。數字PCR技術擁有更高的靈敏度，對痰液中的核酸抑制物有更高的耐受性，因此，對於採用螢光定量PCR篩查Ct值位於37~40的疑似患者，可以採用數字PCR平臺進一步覆核以輔助診斷。此外，在缺乏新型冠狀病毒標準物質的情況下，該試劑盒可以對病毒的拷貝數進行定量，輔助醫生進行病程管理。

儀器信息網：目前，貴單位開展了哪些具體工作？給疫情防控帶來了哪些具體幫助？

永諾生物：自2019年12月2019-nCoV新型冠狀病毒肺炎發生以來，確診病例及疑似病例呈現爆發性增長，大大超出了人們的預期。基於核酸的檢測手段成為確診方法，由於螢光定量PCR儀的保有量高，操作簡便，是本次抗擊新型肺炎的主要檢測平臺。但隨著確診病例的快速增加，患者的有效診療、療效評估、治癒判定，成為新的挑戰，數字PCR具備高靈敏度/抗幹擾/絕對定量能力，是對螢光定量PCR平臺的重要補充。基於此，永諾生物醫療團隊緊急組織研發人員開發出基於數字PCR系統的檢測試劑盒。目前，我們正在與新型肺炎定點醫院及疾病預防控制中心溝通，以無償形式提供給臨床一線使用，為新型肺炎的診斷及治療貢獻力量。

儀器信息網：針對疫情防控，後續還將有哪些工作計劃？

永諾生物：我們將持續關注新型冠狀病毒肺炎疫情進展，針對可能出現的病毒變異即時開發適用的試劑盒。此外，基於數字PCR的技術特點，特別是對新型冠狀病毒的定量能力，我們將積極參與到新型肺炎的救治及科學研究，為新型肺炎患者的病程管控及肺炎發病機制的研究做出貢獻。

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