一、實驗目的
1.了解細胞增殖動力學的主要指標。
2.掌握細胞增殖動力學的檢測方法。
3.掌握MTT法檢測細胞增殖的工作原理。
二、實驗原理
有絲分裂指數和生長曲線是細胞增殖動力學的主要指標。
有絲分裂指數是指處於分裂期的細胞數佔細胞總數的百分比。
MTT法的原理是活細胞 線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍紫色結晶甲臢(Zā)並沉澱在細胞中，而死細胞則無此功能。DMSO能溶解細胞中的甲臢(Zā)，用酶連檢測儀在490nm處測定其光吸收值，可間接反映活細胞數量。
三、試劑與器材
1.材料：LN299人膠質瘤細胞系。
2.試劑：培養液（含10%胎牛血清）、MTT、DMSO、酒精等。
3.器材：二氧化碳培養箱、酶聯檢測儀、倒置顯微鏡、移液器、搖床、96孔板等。
四、實驗方法
1.接種細胞。將細胞以 1X10^5/孔接種至96孔板。
2.培養48h。
3.每孔加20ul MTT，培養箱中孵育4h。
4.棄去培養液，每孔加入150 ul DMSO，搖床震蕩至出現藍色。5.490 nm下於酶聯檢測儀上測定各孔吸光值。
五、注意事項
1.所有的操作都應該在超淨工作檯中酒精燈火焰的旁邊進行。
酒精燈
2.設置對照。
3.最好設置處理。