單細胞全基因組測序重大進展,新方法更加高效簡便!

2020-12-13 騰訊網

廈門大學化學化工學院楊朝勇教授課題組在單細胞全基因組測序研究方面取得進展,相關成果以「Digital-WGS: Automated, highly efficient whole-genome sequencing of single cells by digital microfluidics」為題發表於《Science Advances》(DOI:10.1126/sciadv.abd6454)。

單細胞全基因組測序(whole-genome sequencing, WGS)是表徵細胞內DNA動態變化的關鍵手段,可為我們提供全面、深度的生物學信息,是生命科學領域研究的熱點。然而,單細胞全基因組測序仍面臨著諸如樣品製備複雜、成本高、擴增偏置性強、誤差大的挑戰。雖然現階段發展了一些微流控全基因組測序技術,能夠通過降低液滴體積實現高度均一性的全基因組測序樣品製備,但仍然無法解決其它大部分問題。

數字微流控技術 (Digital microfluidics, DMF)作為一種基於微電極陣列來實現離散微納液滴精確控制的液滴操縱技術,近年來廣受研究者關注。這種操縱方式具有高並行性和全自動化的特點,能夠實現納升級液滴多通路無損可控反應,因此特別適用於高集成度、高性能、操作複雜的單細胞測序體系。

基於此,楊朝勇教授課題組搭建了基於數字微流控的單細胞操控與納升級全基因組測序平臺Digital-WGS,可用於一體化、全自動的單細胞處理與分析。研究首次構建了基於流體力學原理和局域潤溼特性的捕獲結構,並深入研究了該結構的捕獲機理,可實現高效率、低損傷、高通量的自動化單細胞捕獲及處理;系統研究了納升級全基因組擴增規律,實現了納升體積全基因組的無損、高均一性、高保真擴增。通過Digital-WGS方法製備的單細胞樣本在不同測序深度下均展示出了高均一性、高覆蓋率、高準確性的優勢,解決了當前單細胞基因組測序操作複雜、成本高、均一性差、準確度低等問題,為單細胞基因組測序的廣泛應用提供了新的思路。

論文連結:https://advances.sciencemag.org/content/6/50/eabd6454

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