顆粒性抗原與相應抗體以合適的比例發生特異性反應時，在一定溫度和電解質存在的條件下，形成肉眼可見的凝集物，稱為凝集反應（agglutination）。顆粒性抗原與相應抗體在一定的條件下，直接反應產生凝集現象，稱為直接凝集反應。將可溶性抗原或抗體吸附於與免疫無關的載體表面，然後與相應的抗體或抗原反應，形成肉眼可見的凝集物，稱為間接凝集反應。其中將抗體吸附於載體表面檢測抗原的間接凝集反應，稱為反向間接凝集試驗。
一、ABO血型測定（玻片凝集反應）
【實驗原理】紅細胞表面有血型抗原A和／或B，當與相應的抗體（抗A、抗B）相遇時，在一定條件下反應，形成肉眼可見的凝集物。常採用玻片凝集反應。
【材料與儀器】
1. 標準抗A和抗B血清、生理鹽水（N S）、碘酒、75％酒精。
2. 潔淨載玻片、試管、無菌採血針、消毒棉籤等。
【實驗方法】
1. 製備紅細胞懸液：碘酒、酒精消毒無名指指端，用滅菌採血針採血，滴入加有0.5ml生理鹽水的試管中，混勻，製成紅細胞懸液。
2. 取潔淨載玻片一張，在載玻片兩端分別加入抗A、抗B血清各一滴。
3. 加紅細胞懸液各一滴，混勻，10～15min內觀察結果，出現凝集物為凝集反應陽性。
4. 必要時在低倍鏡下觀察凝集現象（圖1-1）。
圖1-1 玻片凝集反應【實驗結果】
與抗A血清發生凝集者為A型血；與抗B血清發生凝集者為B型血；與抗A、抗B血清均發生凝集者為AB型血；與抗A、抗B血清均不發生凝集者為O型血。
【思考題】
1. A血型的人含有哪種抗體？位於什麼部位？AB血型的人含有什麼抗原？位於什麼部位？
2. 試舉例說明玻片凝集反應的其他臨床應用。
二、試管凝集反應
【實驗原理】
用已知的抗原與不同稀釋度的血清進行反應，根據凝集現象判斷血清中相應抗體的滴度，如肥達反應。
【材料與儀器】
1. 傷寒患者血清（1∶10稀釋）、傷寒桿菌O和H抗原菌液、甲型和乙型副傷寒桿菌「H」菌液、生理鹽水。
2. 試管、試管架、滴管、吸管等。
【實驗方法】
1. 取清潔小試管32支，排成四排，分別標記序號及「O」、「H」、「甲H」及「乙H」等字。
2. 用1ml吸管吸取生理鹽水，每管加入0.5ml。
3. 在每一排的第一支試管中都加入傷寒患者（1∶10稀釋）血清0.5ml，吹吸混勻。
4. 倍比稀釋每排血清，即從已加有血清的第一管中吸取0.5ml，加入第二管，混勻後吸取0.5ml加入第三管，混勻後吸取0.5ml加入第四管，混勻後……直至第七管，混勻後吸取0.5ml棄去，第八管不加血清作為實驗對照管（圖1-2）。此時，每排每管的容量均為0.5ml，第一管至第七管的稀釋倍數依次為1∶20，1∶40，1∶80，1∶160……1∶1280。
圖1-2 血清倍比稀釋法5. 分別吸取傷寒桿菌O菌液0.5ml，加入第一排的各試管中；分別吸取傷寒桿菌H菌液0.5ml，加入第二排的各試管中；分別吸取甲型副傷寒桿菌H菌液0.5ml，加入第三排的各試管中；分別吸取乙型副傷寒桿菌H菌液0.5ml，加入第四排的各試管中。此時，每排各試管的血清稀釋度依次為1∶40，1∶80……1∶2560。6.將各試管振蕩混勻，連同試管架置於56℃水浴箱中水浴2～4h。7.小心取出試管架，手持試管（切記不要混勻）對光觀察試管內液體混濁度與管底沉澱物的性狀，以判斷結果（表1-1）。
表1-1試管內液體混濁度與管底凝集物的性狀
【實驗結果】
第八管對照管為陰性反應，以「＋＋」陽性反應的最高稀釋倍數為血清抗體的效價。
【思考題】
1. 試述肥達反應的判斷標準。
2.陰性反應的試管為什麼是均勻混濁的？