一周薈萃007:流式補償調節和配色;細胞周期檢測原理到protocol和分析;文獻新進展

2021-02-15 流式中文網

為了方便大家學習到更多類型的內容,流式中文網每周五會對所有微信公眾號最近一周發布的、比較有意義的資訊做一個精選、匯總,每一篇都連結向原文,並將最近一周發表的文獻做個彙編,希望能夠提高大家碎片化學習的效率。

以下為2019年1月1日~1月17日的精選公眾號文章:

1、還在為細胞增殖檢測發愁嗎?幾種技術給你推薦

這裡介紹了幾個細胞增殖檢測技術,包括流式的CFSE,但如果要把CFSE做得好,還是得繼續看看咱們流式中文網上的一些帖子(搜索關鍵詞CFSE)。

2、流式細胞儀使用——補償調節及多色流式配色

比較適合新手的基礎教程

3、【流式應用篇】細胞周期檢測原理

4、【流式應用篇】常用細胞凋亡檢測1——檢測原理

5、【流式應用篇】常用細胞凋亡檢測2——實驗操作

6、用成像流式(Image Cytometry)的吐血體驗

成像流式,讓人歡喜讓人憂

7、漫談流式細胞術(Flow cytometry)

流式細胞術在植物學研究中,已是測量DNA含量(基因組大小)的首選。雖然細胞壁仍然是分離植物細胞的一大障礙,但簡單的樣品準備、快速捕獲和準確測量,使得流式細胞術在植物細胞生物學、系統學、進化、遺傳和生物技術等鄰域非常受歡迎。

8、除了檢測細胞周期和凋亡,流式細胞儀用途原來這麼多

雖然介紹的不是特別詳細,但可作為一個入門了解的短文。

9、細胞周期實驗:從protocol到數據分析(附免費軟體)

這個舊版的Modfit分析在咱們流式中文網論壇內有不少教程,再多一個也不多。

10、流式中文網公眾號熱門文章:

新時代,流式在成熟B細胞腫瘤診斷中究竟起著什麼樣的作用?

看了太多的T、B亞群,我們卻忽略了體液免疫最關鍵的效應細胞ASC

[視頻] 關於補償,你必須了解的那些概念和要點

聊聊最讓你糾結的設門參照

單管28色方案,把人DC分群和功能分析做到極致

看漫畫,學免疫,2019年新一波

2019年1月15日,我遇到的正常和MDS之間的分化對比實圖

〖你問我答〗雙陽性,是真是假?

以下為2019年1月1日~1月17日的新發表的文獻:

1、多參數流式細胞術在骨髓增生異常症候群中的臨床意義

骨髓增生異常症候群(MDS)對於臨床醫生和研究人員來說是一組具有挑戰性的疾病,因為疾病過程和病理生物學都是高度異質的。 在(疑似)MDS患者中,多參數流式細胞術可以幫助建立診斷、風險分層和治療選擇。 本綜述討論了MDS中多參數流式細胞儀評分的發展和未來方向。 此外,我們為疑似MDS提出了一種綜合診斷算法。

Clinical Implication of Multi-Parameter Flow Cytometry in Myelodysplastic Syndromes. Pathobiology. 2019;86(1):14-23. doi: 10.1159/000490727. Epub 2018 Sep 18.

2、外周血流式細胞術診斷小兒急性白血病:高度可靠

最近的數據表明外周血流式細胞儀(PBFC)對兒童白血病的診斷具有高靈敏度和特異性;對2012年至2016年期間,對急性白血病並發PBFC和BM評估的病例進行了機構資料庫檢索。使用四或八色流式細胞儀,以及BM細胞化學染色和免疫組織化學比較來自外周血和BM的免疫表型分析結果。結果:共鑑定了290份同時進行BM評估的PBFC樣本。根據最終的免疫表型分類,病例分布如下:108例B淋巴細胞白血病(B-ALL),57例T淋巴細胞白血病(T-ALL),116例急性髓性白血病(AML)和9例混合表型急性白血病(MPAL)。在所有病例中,5例在PBFC和BM評估之間存在診斷上顯著的差異。在三種情況下,PBFC的免疫表型提示早期T細胞前體ALL(ETP-ALL),而BM評估顯示MPAL。兩例患者PBFC判斷為急性巨核細胞白血病(AMKL)和MPAL(T/myeloid),但在BM中被診斷為B-ALL和T-ALL。結論:在幾乎所有兒童白血病病例中,PBFC的免疫表型分類準確(> 98%),除了疑似ETP-ALL、MPAL和AMKL的例外,這些PBFC診斷應通過BM免疫表型確認。

Peripheral blood flow cytometry for the diagnosis of pediatric acute leukemia: Highly reliable with rare exceptions. Pediatr Blood Cancer. 2019 Jan;66(1):e27453. doi: 10.1002/pbc.27453. Epub 2018 Sep 25. 

3、長期冷凍大鼠血液樣品用於流式細胞術檢測Pig-a基因突變的適宜性

齧齒動物血液Pig-a試驗已經進行國際驗證,用作體內造血細胞基因突變試驗,並且鑑於有希望的結果,目前正在開發經濟合作與發展組織(OECD)試驗指南。該測定的熱情部分源於其與3Rs原理的一致性,允許與其他遺傳毒性終點組合併整合到重複劑量毒理學研究中。但是血液樣本在收集後一周內需要抗體標記和流式細胞術分析。在本報告中,我們描述了凍融試劑的性能,這些試劑可以存儲和隨後標記和分析大鼠血液樣本至少七個月。來自三個實驗室的數據證明大鼠紅細胞回收率在80-90%的範圍內。儘管紅細胞有一些損失,但基於新鮮血液與冷凍/解凍配對的Pearson係數和Bland-Altman分析表明,突變細胞和網織紅細胞頻率沒有受到顯著影響,測量值高度相關且表現出低偏差。總的來說,這些數據支持凍融程序的有效性和適用性,該程序賦予試驗幾個新的有利特徵,包括:調度人員/儀器的靈活性;將樣品從生命設施運送到分析場所時的可靠性; 3Rs友好,因為陽性對照動物的血液可以冷凍保存,作為分析對照;能夠推遲生成Pig-a數據的決定,直到測試物質上出現更多的毒理學信息。

Suitability of Long-Term Frozen Rat Blood Samples for the Interrogation of Pig-a Gene Mutation by Flow Cytometry.Environ Mol Mutagen. 2019 Jan;60(1):47-55. doi: 10.1002/em.22249. Epub 2018 Sep 27. 

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