T-RFLP的主要原理與步驟

2020-11-25 生物谷

T-RFLP的主要原理與步驟

來源:丁香園論壇 2007-07-25 18:52

T-RFLP的主要原理與步驟大體如下:
1.提取DNA;
2.設計1-2對通用引物(主要根據16S rRNA基因)進行PCR擴增,(每對引物的1條5'端標記螢光);
3.產物純化後,酶切.每組酶切產物中只有一條片段末端標記了螢光.
4.酶切產物通過毛細管電泳,或測序膠電泳,螢光掃描.
5.結果分析:每1個螢光峰至少代表1個細菌或幾個近緣的細菌,峰面積可粗略認為與細菌在某一部位的微生態群落中的數量.

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