試劑跳值原因分析及解決措施

2021-02-13 體外診斷網

跳值歷史背景

自1999年,Abbott AxSYMTM Troponin I項目中首次報導

False Increases of Troponin I attribute to incomplete separation of serum,Clinical Chemistry 45, No. 5, 1999

陸續在羅氏、雅培、貝克曼和西門子等產品中均有發現

BD rapid serum tubes reduce false positive plasma troponin T results on the Roche Cobas e411 analyzer,

Clinical Biochemistry 45 (2012) 842–844

Use of the BD Vacutainer Rapid Serum Tube Reduces False-Positive Results for Selected Beckman Coulter

Unicel DxI Immunoassays,Am J Clin Pathol 2011;136:325-329

Comparison of cardiac TnI outliers using a contemporary and a high-sensitivity assay on the Abbott Architect

platform,Annals of Clinical Biochemistry,2014, Vol. 51(4) 507–511

Outliers as a Cause of False Cardiac Troponin Results-Investigating the Robustness of 4 Contemporary Assays, Clinical Chemistry 57:5, 710–718 (2011)

特別是高靈敏度項目,如TnI, TSH、HIV項目

Evaluation of the performance of the Abbott ARCHITECT HIV Ag/Ab Combo Assay, Journal of Clinical

Virology 52S (2011) S51– S55

Use of the BD Vacutainer Rapid Serum Tube Reduces False-Positive Results for Selected Beckman Coulter Unicel DxI Immunoassays,Am J Clin Pathol 2011;136:325-329


跳值定義及表現形式

跳值:英文表述Irreproducible false positive,discrepancy outlier/ false positive,

initially reactive/positive

定義:為樣本及測試條件所導致的非重現性假陽或初測假陽性。測試結果表現為RLU偏

高,經過重複測試,結果趨於正常;且該現象的重現性低,與系統的精密度無關

表現形式:針對樣本管的首次測試,往往RLU偏高,見下表( 雅培,Architect 系統):

文獻來源:

Comparison of cardiac TnI outliers using a contemporary and a high-sensitivity assay on the Abbott Architect Platform,Annals of Clinical Biochemistry, 2014, Vol. 51(4) 507–511


跳值原因

在化學發光免疫檢測以及ELISA中,樣本前處理條件,如凝集時間、凝集溫度、離心轉

速、離心時間等對TnI①~③ 、HBsAg④ 、HBeAg⑤ 、Anti-HBc⑥、Anti-HIV⑦ 、Anti-TP⑧ 等項目均造成假陽性結果,引起跳值。

文獻來源:

① False Increases of Troponin I attribute to incomplete separation of serum, Clinical Chemistry 45, No. 5, 1999

② 離心時間對心肌肌鈣蛋白I檢測結果的影響,檢驗醫學與臨床2010年5月第7卷第9期,833-834(貝克曼, DXI800)

③ 分析前處理因素對化學發光法cTnI檢測結果的影響分析,檢驗醫學與臨床20l0年3月第7卷第6期,534-535

④ ELISA 法檢測HBsAg(B肝表面抗原)出現假陽性的原因分析,醫藥前沿,2013(24)

⑤ ELI SA 檢測抗- HBC 假陽性原因分析,黑龍江醫學,2002 年第6 期,

⑥ 酶免法檢測HBeAg假陽性原因分析,臨床檢驗雜誌,2000(5)

⑦ 抗人類免疫缺陷病毒抗體酶聯免疫吸附法檢測條件的優化,國際檢驗醫學雜誌2012年3月第33卷第5期

⑧ 酶聯免疫試驗法檢測梅毒的影響因素及結果分析,世界最新醫學信息文摘 2013 年3 月第13 卷第9期


跳值原因(Abbott,BCI)


跳值產生示意圖

不同廠家跳值概率(TnI項目)

① Outliers as a Cause of False Cardiac Troponin Results: Investigating the Robustness of 4 Contemporary Assays,

Clinical Chemistry,2011,57:5710–718

② Comparison of cardiac TnI outliers using a contemporary and a high-sensitivity assay on the Abbott Architect platform,Annals of Clinical Biochemistry,2014, Vol. 51(4) 507–511;

③ Evidence on the cause of false positive troponin I results with the Beckman AccuTnI method,Clin Chem Lab Med

2011;49(6):1079–1080


貝克曼不同項目跳值概率

Use of the BD Vacutainer Rapid Serum Tube Reduces False-Positive Results for Selected Beckman

Coulter Unicel DxI Immunoassays,Am J Clin Pathol 2011;136:325-329

雅培HIV項目跳值概率

7459例非病理樣本中,初測92例陽性,複測38例陽性,跳值概率為0.72%

文獻來源:

Evaluation of the performance of the Abbott ARCHITECT HIV Ag/Ab Combo Assay,Journal of

Clinical Virology 52S (2011) S51– S55


解決措施

降低樣本中的幹擾物質對測試結果影響

控制樣本質量:採血管、離心條件&速度&溫度、採血體積

轉移到微量杯測試

離心後重新測試

樣本用竹籤挑動表層後測試

其他注意事項


解決措施——延長樣本離心時間

案例

文獻來源:離心時間對心肌肌鈣蛋白I檢測結果的影響,檢驗醫學與臨床2010年5月第7卷第9期,833-834(貝克曼,DXI800)

作者結論:個別標本由於離心製備不徹底,造成假陽性結果,如果忽略掉就會給臨床造成誤診,引起不必要的醫療糾紛。故建議檢驗人員若遇到疑似陽性標本,最好延長離心時間,重複測定,可以降低假陽性率,增加檢驗結果的準確性。


解決措施——增加血清標本的凝集時間

案例

文獻來源:分析前處理因素對化學發光法cTnI檢測結果的影響分析,檢驗醫學與臨床20l0年3月第7 卷第6期,534-535(貝克曼系統)

作者結論:考慮到孵育時間主要影響血液凝血是否充分,從而導致影響檢測結果的纖維蛋白不能夠從 血清中充分分離。通過測定不同處理條件下的纖維蛋白原濃度發現兩組標本中的纖維蛋白原濃度差異 有統計學意義(P<0.01),顯示纖維蛋白可能是影響結果穩定性的一個重要因素。這與以前的研究認為 凝血不充分影響血清cTnl的測定結果一致。因此建議用血清標本檢測cTnI濃度時須嚴格控制孵育時間, 最好以孵育20 min後處理為好,以降低假陽性率。

解決措施——增加離心轉速

雅培HBsAg項目,也存在因樣本前處理條件不夠,導致一定假陽性概率

文獻研究結果:

2898g 10min分離血清,

HBsAg假陽率9.82%;

樣本的離心處理好壞直接影響實驗結果的準確性


解決措施——離心後重測

案例

文 獻 來 源 :False Increases of Troponin I attribute to incomplete separation of serum, Clinical Chemistry 45, No. 5, 1999(Abbott AxSYMMT)

作者結論:血液必須完全凝集,並經過徹底離心。保證血清與血凝塊完全分離。2000g,10min可以將纖維蛋白從血清中完全分離。經過再次離心後重測,降低假陽性概率。

文獻來源:Specimen Recentrifugation and Elevated Troponin I Levels,Winter 2015 | Volume 46, Number 1 Lab Medicine(Beckman Access 2)

作者結論:假陽性樣本,經過再次離心後測試, 測試結果能夠回歸正常。

解決措施——更換採血管

BD專門推出縮短前處理時間的採血管, 並且有效降低假陽性概率

Use of the BD Vacutainer Rapid Serum Tube Reduces False-Positive Results for Selected Beckman Coulter Unicel DxI Immunoassaysm,

Am J Clin Pathol 2011;136:325-329

BD rapid serum tubes reduce false positive plasma troponin T results on the Roche Cobas e411 analyzer, Clinical Biochemistry 45 (2012) 842–844

解決措施——其他注意事項

總結

化學發光試劑較為靈敏,受幹擾因素較多,必須減少樣本中的幹擾物質。

不同廠家的採血管質量差異較大,對免疫測試結果影響不同,需選擇質量可靠的採

血管。

注重樣本前處理條件,製備高質量樣本,降低假陽性率。

來源:燈塔光免小助手

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