超詳細的慢病毒包裝攻略

2020-12-05 源井生物

高效轉染病毒

源井生物可以提供不同質量標準的慢病毒,腺病毒,腺相關病毒。在基因編輯方面,源井生物可以提供體外細胞感染用的濃縮病毒,也可以提供動物體內使用的超純化病毒,滿足客戶的不同科研需求。

三種病毒的比對:

慢病毒包裝原理

慢病毒(Lentivirus)載體是以 HIV-1 (人類免疫缺陷1型病毒)為基礎,使用皰疹病毒VSVG外殼蛋白發展起來的工具載體。其毒性基因已經被剔除並被外源性目的基因所取代,屬於假型病毒。慢病毒具有感染譜廣泛特點,並且可以有效感染分裂和非分裂細胞。一經感染宿主細胞,慢病毒即利用反轉錄酶將其RNA轉錄成雙鏈DNA,隨後永久的整合到宿主細胞的染色體中,實現長時間穩定表達。

此外,慢病毒免疫原性低,不易造成免疫反應,所以現在慢病毒系統除了被廣泛應用到各種細胞系的基因敲除/敲入、基因過表達、RNA幹擾、microRNA研究,還大量應用於活體動物實驗中。

產品規格

服務流程及質量控制:

基因敲除慢病毒

源井生物構建慢病毒敲除載體並包裝為慢病毒,細胞感染慢病毒後,可穩定表達gRNA和Cas9蛋白,達到敲除靶基因的目的。

基因敲除慢病毒載體選擇:

Cas9蛋白長達4kb,受慢病毒外源插入片段限制,通常將gRNA與Cas9分開包裝慢病毒,再使用2種慢病毒共同感染宿主細胞。

註明 | 文章是源井生物原創,轉載請註明。

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相關焦點

  • 慢病毒包裝步驟及注意事項
    此外,也有使用其它幾類慢病毒包裝細胞系製備慢病毒載體。 瞬時轉染製備慢病毒: 細胞:慢病毒包裝常用人胚腎細胞(HEK, human embryonic kidney)293T,其含有SV40病毒的大T抗原蛋白編碼基因,轉染效率極高。但其貼壁性不好,所以需要使用多聚賴氨酸包被的培養皿增加其吸附性。
  • 乾貨分享|慢病毒包裝與純化實驗操作+視頻
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