賽默飛Orbitrap Eclipse三合一超高分辨質譜儀從根本上提高了定量蛋白質組分析的靈敏度、速度和準確性,以及全面定義蛋白質形式和蛋白質複合物的能力。HMRn(高質量範圍MSn)、PTCR(質子轉移電荷減少)和RTS(實時搜索)的加入是專門設計的功能,極大地提高了質譜識別重要生物分子的能力,並在結構上以前所未有的詳細程度對它們進行研究。在保持Orbitrap Fusion Lumos三合一質譜性能的基礎上,Eclipse提升了如下主要性能:
(1)HMRn(High Mass Range MSn,高質量範圍MSn):MSn多級質譜的分子量範圍可達到8,000 Da,包括擴展Orbitrap的m/z 至8,000和LTQ分離母離子m/z至8,000,並具有MSn(n=1~10)能力。比如使用HMRn做NativeOmics,可以用多級質譜鑑定膜蛋白的配體,更好理解蛋白的相互作用。
(2)PTCR(Proton Transfer Charge Reduction ,質子轉移電荷減少)離子源:全氟菲烷(PFPP) 離子,用於隨後雙級線性離子阱中的氣相離子反應,利用質子轉移減少母離子或子離子的多電荷態,使多電荷譜圖的質量提高、Top-down組學的解析更容易,可以更好地揭示蛋白隱藏的特徵。
(3)RTS(Real-time search實時搜索)算法軟體:提供了強大的資料庫功能,當已鑑定的蛋白和初始資料庫匹配一致就標記為不再進行MS3,因此可有效縮短時間,提升1倍通量。在選擇已確定的母離子進行 SPS MS3 定量時,可提高定量準確性和TMT實驗的蛋白質組覆蓋率。
(4)雙曲面QR5 分段四極杆:增長為25 cm,並擴大直徑,提升離子傳輸效率,並可有限選擇分離0.4 Da的母離子。
(5)具有50萬解析度,擴展選項後可達到100萬解析度。
創新點:
Orbitrap Eclipse三合一質譜,在Orbitrap Fusion Lumos系統基礎上進一步優化了離子傳輸系統,能夠提供前所未有的分析深度,旨在解決生物學研究中最具挑戰性的分析難題。從根本上提高了蛋白質定量分析的靈敏、速度和準確,以及全面定義蛋白質以及複合物的能力。1. 採用QR5雙曲面分段四極杆,最小隔離窗口可達0.4Da;2. 改進的雙壓線性離子阱質量分析器:前部延長的高壓阱,實現高效率的捕集、快速冷卻和裂解離子,用於改善ETD和PTCR反應控制。3.超快速掃描:Orbitrap最快掃描速度40Hz,離子阱掃描最快速度45Hz。4.新的蛋白質組學定量方法: 實時檢索TMT定量方法可實現更快的數據採集,顯著提高TMT定量蛋白組學的分析性能;SureQuant定量方法用於快速精確蛋白質組絕對定量。5. 可選配PTCR(質子轉移電荷降低)技術:PTCR離子源是EASY-ETD離子源的延伸,產生全氟菲烷(PFPP)離子,通過降低前體離子和/或碎片離子的電荷態以簡化對複雜譜圖的解析,從而簡化複雜的自上而下(top-down)譜圖數據。6.選配的高質量範圍MSn(HMRn)功能:Orbitrap m/z最大到8000,擴大了線性離子阱隔離的質量範圍,可對完整蛋白和蛋白質複合體進行全面的多種碎裂模式MSn表徵。
賽默飛Orbitrap Eclipse 三合一高分辨質譜儀
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