中文摘要:
目的:
探討不同濃度蜂王漿主蛋白(MRJPs)對人胚肺成纖維細胞HFL-I的抗衰老作用,並對其可能的分子機理進行預測.
創新點:
本實驗採用拉曼光譜法探究添加MRJPs對HFL-I細胞內成分的影響.實驗發現添加MRJPs的 HFL-I與對照組的HFL-I的拉曼光譜圖中,與DNA和蛋白質合成相關的拉曼峰發生了變化.該發現在未來可作為鑑定衰老HFL-I的一種手段.
方法:
實驗以蜂王漿為原料,利用透析法得到MRJPs.通過對不同濃度MRJPs處理的HFL-I進行細胞形態學觀察,測定HFL-I生命周期以及檢測其β-半乳糖苷酶活性,評價了MRJPs的抗衰老效果.並且通過MTT法考察了不同濃度MRJPs對HFL-I的促增殖作用.同時,實驗一方面採用實時定量聚合酶鏈反應(qPCR)測量了不同濃度MRJPs處理的HFL-I的細胞端粒相對長度以及MTOR、SOD1、CTNNB1、TP53四種衰老相關基因的相對表達量;另一方面還通過拉曼光譜實驗法,進一步探索了MRJPs抗衰老的分子機理.
結論:
本實驗結果顯示,添加MRJPs能降低HFL-I衰老細胞所佔比例,顯著延長HFL-I的生命周期,一定量的MRJPs還能夠促進HFL-I的增殖.此外,MRJPs還能減緩細胞端粒長度的縮短,上調衰老相關基因SOD1的表達,下調抗衰老基因MTOR、CTNNB1和TP53的表達.通過MRJPs添加組細胞的拉曼光譜上出現的獨特的鹼基、醯胺羰基和芳香氫峰,推測MRJPs的抗衰老作用可能與促進DNA及蛋白質在細胞中的合成密切相關.
關鍵詞組:
蜂王漿主蛋白;人胚肺成纖維細胞;抗衰老;拉曼光譜;端粒長度;分子機理
作者:
Chen-min Jiang, Xin Liu, Chun-xue Li, Hao-cheng Qian, Di Chen, Chao-qiang Lai, Li-rong Shen
Chen-min JIANG, Xin LIU, Chun-xue LI, Hao-cheng QIAN, Di CHEN, Chao-qiang LAI, Li-rong SHEN, 2018.Anti-senescence effect and molecular mechanism of the major royal jelly proteins on human embryonic lung fibroblast (HFL-I) cell line. Journal of Zhejiang University-Science B (Biomedicine & Biotechnology),19(12):960-972.
https://doi.org/10.1631/jzus.B1800257