臨床基因擴增PCR實驗室

2020-12-05 專注實驗室解說

Pcr實驗室又叫基因擴增實驗室、DNA實驗室，基因檢測實驗室。PCR是聚合酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction)的簡稱。是一種分子生物學技術，用於放大特定的DNA片段，可看作生物體外的特殊DNA複製。通過DNA基因追蹤系統，能迅速掌握患者體內的病毒含量，其精確度高達納米級別，精確檢測B肝病毒在患者體內存在的數量、是否複製、是否傳染、傳染性有多強、是否必要服藥、肝功能有否異常改變能及時判斷病人最適合使用哪類抗病毒藥物、判斷藥物療效如何、給臨床治療提供了可靠的檢驗依據 功能：能夠對患者病情進行科學、準確、實時的掌控，並結合抗HBV與T細胞免疫來打破免疫耐受，阻斷肝病病毒複製的療法、有效的分解肝炎病毒，解決了B肝病毒易變異、耐藥，病毒複製模板難以治療，人體免疫耐受狀態不易打破等醫學難題，能迅速消除臨床症狀，而且有效抑制B肝病毒複製，明顯加快e抗原、抗體的血清轉換速度，殺滅血液及肝細胞內的病毒，為防止再感染提供了長期保護，有效阻斷和逆轉肝纖維化、肝硬化進程。 基本建設方案 1、建立樣品準備區這個區域專門用作樣品的準備，在製備和操作用於核酸提取的試劑時應該採取預防措施：⑴PCR產物和帶有要擴增序列的DNA克隆不能在這個房間操作。⑵組織培養物、組織標本和血清樣品都帶進樣品準備間處理，以根據應用的需要提取DNA或RNA。⑶用於樣品處理的工具不能被用作普通分子克隆的工具，也不能用作操作靶序列。⑷DNA樣品應該用有專門的防護或正壓活塞式移液管操作，以防止在吸取樣品時有氣溶膠遺留。⑸大體積樣品應該用單獨包裝的無菌一次性移液管吸取。⑹管子打開前都要簡短離心以減少氣溶膠的產生，而且管子不能用力崩開，這樣會產生氣溶膠。⑺任何時候都應該穿實驗服和帶手套，手套要經常更換，尤其在抽提過程中每一步之間都要更換。實驗服要專門用於樣品準備間，經常清洗。 2、樣品準備和RNA-PCR RNA-PCR的額外步驟需要額外的樣品操作，這樣增加了樣品之間汙染的機會。為了避免這一問題，反轉錄一步可以在樣品準備區進行。在RNA-PCR中應用UNG以防止汙染的方法也有報導。 3、建立前PCR區。 該去專門用於準備各種反應，這個區域必須保持乾淨，而且沒有來自克隆和樣品準備的汙染。前PCR區必須要有試劑和準備，特別是專門用於前PCR區的正壓活塞式移液管。 4、PCR實驗室試劑的操作。 ⑴所用的所有溶液都應該沒有核酸和（或）核酸酶（DNase和RNase）汙染。⑵所有PCR試劑中使用的水都應該是高質量的－新鮮蒸餾的去離子水，用0.22μm過濾的，並且是高壓滅菌。⑶在20℃到25℃貯存的試劑建議加點像疊氮鈉一類的抗微生物劑，在擴增試劑或樣品製備試劑中加入0.025%的疊氮鈉不抑制擴增反應。⑷所用試劑都應該以大體積配製，實驗一下看試劑是否滿意，然後分裝成僅夠一次使用的量進行貯存。⑸所有試劑和樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的瓶子和管子。⑹新配製的試劑在用於準備新的標本之前應該加以檢驗⑺樣品準備和前PCR區所使用的移液管在不使用時都應該小心保存。 5、在前PCR區建立PCR混合物。 ⑴可以把即刻可用的「主混合物」溶液配好、分裝並保存在-20℃或4℃，在實驗室只涉及到擴增一種或少數幾種特異序列時這樣做很有用。⑵如果你的實驗室使用多套引物，以致於配製包括所有試劑的單一反應混合物不夠經濟，可以考慮分裝保存夠一天的PCR成分。⑶作為一個規則，應該保存一套陰性、弱陽性和強陽性對照樣品來分析樣品配製和PCR前過程的效率和潔淨程度。而且，你也希望通過使用一個已知的弱陽性樣品來驗證你的樣品緩衝液以證明裡面不含擴增抑制物。⑷陰性樣品要與每組樣品同時做，以分析是否存在樣品與樣品之間的汙染以及是否存在PCR產物的汙染，陰性對照應該包括核酸以外的所有試劑。⑸當做陽性對照時，有兩個理由決定了應該使用最少數量的核酸。⑹由於必須有對照反應，對照模板的特點應該予以考慮。 6、控制汙染的方法。 已設計出很有力的酶學方法用來消除一種形式的汙染—使用UNG，這一技術能有效地消除由PCR產物引起的汙染。另一種控制汙染的方法是使用紫外線，這種方法不能完全消除汙染問題，但可以將汙染降低幾個數量級。 7、後PCR區PCR完成以後，需要分析樣品並解釋數據，應該留出一個專門用於反應後處理樣品的地方。後PCR活動中使用的所用試劑、一次性耗材和儀器都必須是專門用於這一目的，決不能把實驗室這一區域的試劑或儀器用於任何前PCR活動

應用場所：

第三方醫學檢驗所，司法鑑定機構，臨床醫學檢驗機構，刑偵技術鑑定機構，農牧業基因檢測，食品行業轉基因食品檢測，食品藥品監督所，疾控中心等

PCR實驗室實物後照片
PCR實驗室壓差計
PCR實驗室不鏽鋼洗手臺
試劑儲存櫃
PCR實驗室傳遞窗
PCR實驗室鋼質門（PCR走廊入緩衝間）

蘇州浩博實驗室系統工程有限公司包含PCR實驗室合作夥伴及相關工程案例

經過浩博實驗室不懈的努力和吸收各方面的知識，以及在相關專家的指導下，蘇州浩博實驗室系統工程有限公司在建設PCR實驗室方面積累豐富的相關設計，施工經驗，出色的完成了眾多客戶的PCR實驗室方案，實驗室建設工程，名單如下：

柳林疾病預防控制中心 遷安疾病預防控制中心

靖江疾病預防控制中心 襄州區疾病預防控制中心

無錫惠州區疾病預防控制中心 東陽市食品藥品監督所

麗水市食品藥品監督所 黃州食品藥品監督所

蘇州市立醫院北院 無錫101醫院

雲南省第一人民醫院 南通瑞恩醫學檢驗所

廣州歐瑞醫學檢驗所 北京北方人類基因研究所

華大基因 忻州區公安刑偵技術中心

萊蕪市公安刑偵技術中心 延邊州公安刑偵技術中心

上海楓林司法鑑定所 江蘇蘇博生物科技有限公司

上海康斯邁生物科技有限公司

相關焦點

  • PCR基因擴增檢驗實驗室整體解決方案
    臨床基因擴增實驗又稱 PCR實驗，是專門用來檢驗愛滋病、B型肝炎、禽疫病等病毒感染性疾病的一種檢測手段。它可以通過將病毒體內所含的基因進行擴增的方法，測出一些病毒含量不高的感染者體內是否含有特定的病毒。
  • 疾控中心PCR實驗室建設標準
    PCR實驗室建設設計標準1、PCR實驗室又稱：基因擴增實驗室，是一種分子生物學技術，用於放大特定的DNA片段，可看作生物體外的特殊DNA複製。通過DNA基因追蹤系統，能迅速掌握患者體內的病毒含量，其精確度高達納米級別，精確檢測B肝病毒在患者體內存在的數量、是否複製、是否傳染、傳染性有多強、是否必要服藥、肝功能有否異常改變能及時判斷病人最適合使用哪類抗病毒藥物、判斷藥物療效如何、給臨床治療提供了可靠的檢驗依據。
  • pcr擴增的原理和步驟
    pcr擴增在做實驗的時候是經常用到的，它是基礎實驗，是每個做實驗的人都應該掌握的，下面小編就來說一下PCR擴增的原理和步驟吧。1.pcr擴增的基本原理是PCR技術和DNA的天然複製過程基本是一樣的，其靶序列兩端互補的寡核苷酸引物與其特異性依賴於與DNA的半保留複製。
  • 領星醫學通過臨床基因擴增實驗室NGS法檢測技術認證
    上海2020年1月21日 /美通社/ -- 1月19日，領星醫學在原有臨床基因擴增檢驗資質基礎上，獲得江蘇省臨床檢驗中心頒發的具有「人實體瘤精準治療相關基因NGS法」擴展項目範圍的技術驗收合格證書，這表明領星NGS平臺檢測技術能力得到了權威機構的認可。
  • PCR實驗室建設要求及防控建議
    PCR這項技術，被廣泛地運用在醫學和生物學的實驗室，例如用於判斷檢體中是否會表現 某遺傳疾病的圖譜、傳染病的診斷、基因複製，以及親子鑑定。（一）PCR實驗室平面布局PCR實驗室原則上分為4個單獨的工作區域，由擴增前區到擴增後區，且要嚴格分開。
  • 蘇州天昊醫學檢驗實驗室有限公司 臨床PCR實驗室順利通過驗收
    近日，蘇州天昊醫學檢驗實驗室（以下簡稱「天昊檢驗」）再創佳績，順利通過臨床PCR實驗室驗收，取得了《臨床基因擴增檢驗實驗室》資質證書。江蘇省臨檢中心委派專家組成評審組，於2018年11月對我司臨床PCR實驗室進行現場驗收，評審組依據《醫療機構臨床基因擴增管理辦法》和《江蘇省臨床基因擴增檢驗技術管理規範（試行）》（江蘇省衛生廳蘇衛辦醫［2010］76號）等相關法規，通過審閱資料、實地查看、現場考核等方式，對我司的臨床PCR實驗室進行了全面的驗收檢查。
  • PCR實驗室怎麼裝修？
    PCR實驗室怎麼裝修？導讀：臨床基因擴增檢驗實驗室又稱分子實驗室、PCR實驗室，已逐漸成為檢驗領域必不可少的一部分，原則上臨床基因擴增檢驗實驗室應當設置以下區域：試劑儲存和準備區、標本製備區、擴增區、擴增產物分析區。
  • 湖南省臨床檢驗中心舉辦大型基因擴增實驗室技術人員上崗培訓班
    9月16日開始，由湖南省臨檢中心聯合湖南省疾控中心舉辦，湖南省第二人民醫院承辦的2020第三期臨床基因擴增實驗室技術人員上崗培訓班在長沙啟動，為秋冬季疫情防控的核酸檢測能力做好儲備工作。本期報名參加培訓的學員人數近1500人，主要來自湖南省內各級醫療機構、第三方檢驗機構以及國家聯防聯控應急實驗室。培訓分為理論培訓和實驗技能培訓兩部分，理論培訓採用線上的形式，省內十多名專家教授參加了理論講授，國家衛健委臨床檢驗中心副主任李金明教授進行了長達4小時的授課。此次培訓內容豐富，契合主題，學員們紛紛表示收穫良多。
  • 區三院醫共體臨床PCR檢驗實驗室順利通過預驗收~
    受浙江省臨床檢驗中心委託，9月22日上午，市臨床檢驗質控中心沈波、徐文珍、沈偉偉、徐加勤等專家對區三院醫共體總院臨床PCR檢驗實驗室工程進行驗收。 　　驗收過程中，專家組仔細查看了實驗室內包括試劑準備區、樣本處理區、核酸擴增區以及高壓滅菌區在內的所有布局和相關設備，審閱了相關資料臺帳，並對相關操作人員進行了專項考核與評估
  • PCR實驗室布局與空調通風設計
    PCR(Polymerase Chain Reaction)即聚合酶鏈式反應，又稱無細胞分子克隆系統或體外酶促基因擴增法。是分子生物學研究和實驗的常規方法，也是生物學、醫學臨床等領域廣泛應用的實驗技術。
  • pcr實驗室區域布置及空調通風設計
    PCR實驗室又叫基因擴增實驗室。PCR是聚合酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction)的簡稱。　　試標本製備區　　該區域主要進行的操作為臨床標本的保存、核酸（RNA，DNA）提取、儲存及其家去至擴增反應管和測定RNA和c DNA的合成。
  • 我叫極速PCR試劑盒,這是我的說明書
    【適用人群】 　　不管您是男是女，是生物教師還是生物實驗員，只要您想順利攻克分子生物學實驗之基因片段的擴增，選擇極速pcr試劑盒包您藥到病除。 　　【功能主治】 　　模板、引物自行設計難度大，精準度要求高——您的工作我們做，直接使用更便捷。
  • 查爾酮合成酶基因的PCR擴增
    【實驗目的】（1）掌握PCR擴增的基本原理。（2）掌握PCR擴增查爾酮合成酶基因的方法及操作過程。（3）了解查爾酮合成酶的功能及基因相關信息。（4）熟練掌握瓊脂糖凝膠電泳的操作過程。另外，CHS基因的起源較早，不論在低等植物還是高等植物中，都存在CHS基因或類CHS基因，CHS基因在植物分子進化研究上有著不可替代的作用。本實驗採用PCR方法，利用引物克隆CHS基因的全長。模板DNA經若干個變性、退火和延伸循環後，目的基因擴增為原來的2n倍。
  • 【分子】目的基因的擴增——PCR原理與過程
    後臺回復「分子」查詢分子生物學系列內容【分子生物學實驗初階】分子生物學之PCR篇【分子】目的基因的擴增
  • 病原微生物基因擴增檢測
    □ 三臺縣疾病預防控制中心 雷玉林病原微生物基因擴增檢測（PCR）是基因擴增技術的一次重大革新。病原微生物基因擴增檢測的檢測方法是什麼在以往的病原微生物基因擴增檢測當中，標準的操作程序就是要將病原微生物基因擴增檢測中必須要的反應成分加入到一個微量離心管當中，並將其放置在一定的額循環參數條件之下，從而開始進行循環擴增。
  • 新冠核酸檢測——PCR實驗室建設指南
    1.3 建議通道及實驗室間牆都採用鋁槊或鋁合金加玻璃，採用推門,這樣可達到美觀、經濟、採光好、佔地少的優點。　　2.臨床基因擴增實驗室平面參考圖　　　　3.4規範的操作　　 3.4.1臨床基因擴增檢驗實驗室的技術人員必須進行上崗培訓，經培訓合格後才能從事臨床基因擴增檢驗的工作；　　 3.4.2在實驗操作過程中，操作者必須戴手套，並經常更換。此外，操作中使用一次性帽子也是一個有效地防止汙染的措施；　　 3.4.3清潔工作及時、正確。實驗工作結束後，必須立即對本區進行清潔。
  • 抗疫中的PCR實驗室究竟是什麼?
    PCR（聚合酶鏈式反應）是一種用於放大擴增特定的DNA片段的分子生物學技術，它可看作是生物體外的特殊DNA複製。簡單來說就是通過溫度的控制在體外實現基因的變性、複製或者延展的一種反應或者技術。能迅速掌握患者體內病毒含量。至於進行PCR實驗的場所——PCR實驗室。又叫基因擴增實驗室。
  • 核酸檢測實驗室(PCR)如何消毒?
    然而實際上，三級綜合醫院不具備核酸檢測能力的少之又少，大多已經實現了PCR實驗的基本要求，差別只在於開展項目略有不同，這項要求真正難以落實的主要問題是：二級醫院/縣醫院建立PCR實驗室不容易。PCR實驗，即臨床基因擴增實驗，是專門用來檢驗愛滋病、B型肝炎、禽疫病等病毒感染性疾病的一種檢測手段。
  • 疫情期間大家最為關注的PCR實驗室的設計與建設標準
    《生物安全實驗室建築技術規範》GB50346-20113. 《微生物生物實驗室商務安全通用準則》WS233-20174. 《臨床基因擴增檢驗實驗室管理暫行辦法》(衛醫發〔2002〕10號)5.《醫療機構臨床基因擴增管理辦法》 (衛生部2010年)194號實驗室概況：新建PCR實驗室建築面積102.2㎡，包含試劑準備區、標本製備區、擴增區、產物分析區、緩衝間（4間），現場整體面積以及現場具備走廊等因素，不設計PCR走廊，可用現場走廊代替PCR走廊。
  • PCR實驗室需要做潔淨嗎?
    PCR實驗室(即：基因擴增實驗室)是人為進行的DNA片段生物體外複製，在精準醫療、刑偵、食品安全、生命科學等領域應用越來越廣泛。運行過程中為了防止交叉汙染，其設計建造與運行管理主要要求為：1、實驗室設計建造、安全工作制度或安全標準操作程序，應符合現行《實驗室生物安全通用要求》GB19489的要求。