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這是我們的盟友「芒芒果」要求我們推出的一期，我就我的一些理解和大家分享。
ROS是由氧分子非完全性的單電子還原所形成的分子或者離子，大部分都是線粒體的副產物，外源性的因素比如γ射線和化學致癌物等也會導致細胞內的ROS的產生。適量的ROS是細胞所必須的，但是過量的ROS或者過少的ROS都會誘導氧化應激，破壞核酸、蛋白質、脂質，碳水化合物和細胞膜等，導致細胞死亡和組織破壞。
流式細胞術可以非常簡便的檢測細胞內的ROS含量。檢測時使用DCFH-DA，其可以自由通過活細胞的細胞膜進入細胞內，然後被酯酶水解成DCFH，DCFH能夠與細胞內的ROS反應生成DCF。該螢光與FITC類似，可以用FITC通道。所以，標記DCFH-DA後，檢測FITC通道接收到的螢光信號的強弱就可以判斷細胞內ROS的含量。
方法：
將需要檢測的樣品製備成單細胞懸液；
配置PBS-明膠溶液，PBS中加入2mmol/L的EDTA、5mmol/L的葡萄糖、0.1%的明膠，PH為7.4；
將細胞置於PBS-明膠溶液中，樣品細胞的濃度控制為1X10^6/ml；
加入10umol/L的DCFH-DA，37℃避光條件下靜置1h；
離心沉澱，流式PBS重懸樣品細胞，流式上樣分析。
注意事項：
最後請需要的朋友一定認真讀下面的這篇參考文獻，說的很清楚。
參考文獻：
1.Modification to the Lampariello Approach to Evaluate Reactive Oxygen Species Production by Flow Cytometry
本文編輯：澤熙，資料來源於網絡