說到circRNA估計小夥伴們並不陌生吧。自2014年起，circRNA猶如一顆冉冉升起的星星，備受到科研工作者的青睞，現已到了炙手可熱的地步，成為非編碼RNA界的研究新寵。細數近幾年來circRNA在國家自然科學基金獲批項目情況，可以說是平步青雲，一飛沖天。縱觀circRNA 研究領域的大軍，大概可以分成3大主流。
（a）circRNA 作為miRNA sponge；
（b）circRNA與蛋白結合；
（c）circRNA翻譯成蛋白；
下面我們一起來學習下這3大主流和相應的研究思路吧。
數據來自：國自然科學基金管理信息系統
第一類是以miRNA sponge為代表的，circRNA與miRNA 的相互作用是目前報導得最多的circRNA的功能模型，從近幾年國自然中circRNA的獲批中可以看出，獲批的大多項目也是往miRNA sponge方向研究的，而最早提出miRNA sponge功能模型的是Max Delbruck柏林醫學系統生物學研究所的RajewskyNikolaus教授。
Rajewsky Nikolaus教授
此主流的研究套路大概如下：
通過高通量測序或晶片結合qpcr驗證篩選出感興趣的circRNA；
針對篩選出來的circRNA進行細胞功能驗證；
通過資料庫預測或RIP實驗篩選出與circRNA相互作用的miRNA，並進行下遊靶基因檢測等該機制進行研究；
構建動物模型進行體內驗證。
相關文章：
第二類以蛋白結合（protein binding）為代表，即是circRNA與蛋白結合（常見於RNA結合蛋白RBP，不過也有其它類型蛋白），加拿大多倫多大學的Burton B Yang教授是此研究方向的佼佼者。
代表文章1：A Circular RNA Binds To and Activates AKT Phosphorylation and Nuclear Localization Reducing Apoptosis and Enhancing Cardiac Repair.Theranostics 2017 ;7(16)
代表文章2：The Circular RNA Interacts with STAT3, Increasing Its Nuclear Translocation and Wound Repair by Modulating Dnmt3a and miR-17 Function.Mol. Ther. 2017 Sep 06 ;25(9)
代表文章3：A circular RNA promotes tumorigenesis by inducing c-myc nuclear translocation. Cell Death Differ. 2017 09 ;24(9)
此主流的研究套路大概如下：
通過高通量測序或晶片結合qpcr驗證篩選出感興趣的circRNA；
針對篩選出來的circRNA進行細胞功能驗證；
通過RIP或計算機模擬實驗篩選出與circRNA相互作用的蛋白，並研究兩者的調控關係或下遊機制；
進行體內驗證。
第三類是以circRNA翻譯有功能性蛋白為代表的，目前關於此類的研究比較新穎，報導的文章還不是很多，國際上關於circRNA翻譯的paper共有5篇，其中兩篇是中山大學附屬第一醫院神經外科張弩副教授發表的。
此主流的研究套路大概如下：
通過高通量測序或晶片結合qpcr、northernblot等驗證挖掘出感興趣的circRNA，並採用pcr 、Sanger測序等技術對目標circRNA進行識別鑑定；
構建circRNA系列表達載體及製備特異性檢測circRNA翻譯蛋白的抗體並且結合質譜檢測手段，證明circRNA翻譯蛋白質；
circRNA翻譯蛋白質進行細胞功能驗證；
circRNA翻譯蛋白質的分子機制；
構建動物模型、臨床標本的檢測進行體內驗證。
案例文章1：
Circ-ZNF609 Is a Circular RNA that Can Be Translated and Functions in Myogenesis.Mol Cell. 2017 Apr 6; 66(1): 22–37.e9.案例文章2：
Novel Role of FBXW7 Circular RNA in Repressing Glioma Tumorigenesis.J. Natl. Cancer Inst. 2018 Mar 01 ;110(3)以上circRNA的3大研究主流，小夥伴，你的研究屬於哪一股清流呢？
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