SDS-PAGE膠配方表及試劑配製方法

2021-02-13 BioLABs實驗室


請務必閱讀以下注意事項後再開始實驗:

1. 聚合前的丙烯醯胺具有神經毒性,為了您的安全和健康,操作時請穿實驗服並戴一次性手套及口罩操作。

2. APS配製成10%溶液後,應分裝保存在-20°C。將配置成的10%的APS溶液存放在4°C時易發生失效,保存時間較短,應儘量減少室溫存放時間,以防失效。

3. TEMED易揮發,使用後請蓋緊瓶蓋並4°C保存。另外凝膠凝聚的速度與溫度及光照關係密切,可通過適當調節TEMED 的用量,控制在不同的室內環境下凝膠凝聚的速度,配置膠時最後加入10%的APS溶液和TEMED並充分搖勻。

4. TEMED易燃,有腐蝕性,需注意防護。

試劑配方

30%(w/v)Acrylamide (1 L)

稱取290 g Acrylamide和10 g BIS 溶於800 ml的ddH2O,充分攪拌溶解。定容至1 L後用 0.45 μm 濾器濾去雜質。於棕色瓶中4℃保存。

10%(w/v)過硫酸銨(10 ml)

稱取1 g過硫酸銨,溶於10 ml的ddH2O。分裝後凍存在-20℃。4℃保存可使用2周左右,超過期限會失去催化作用。

10% (w/v) SDS (十二烷基磺酸鈉) 

稱取10 g SDS粉末加ddH2O至100 ml,溶解後,高溫高壓滅菌後待用。

1.5 M Tris-HCl (pH 8.8) 

稱取181.7 g Tris base和800 ml ddH2O用濃鹽酸調至pH 8.8,加 ddH2O定容至1 L,高溫高壓滅菌後室溫保存 。

0.5 M Tris-HCl (pH 6.8) 

稱取60.7 g Tris base和800 ml ddH2O用濃鹽酸調至pH 6.8 ,加ddH2O定容至1 L,高溫高壓滅菌後室溫保存。

TEMED

直接使用。

部分圖片及資料參考Takara官網。

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