血球計數板簡介:
一塊特製的厚型載玻片,載玻片上有四個槽構成三個平臺。中間的平臺較寬,其中間又被一短橫槽分隔成兩半,每個半邊上面各刻有一小方格網,每個方格網共分九個大方格,中央的一大方格作為計數用,稱為計數區。計數區的刻度有兩種:一種是計數區分為16個中方格(大方格用三線隔開),而每個中方格又分成25個小方格;另一種是一個計數區分成25個中方格(中方格之間用雙線分開),而每個中方格又分成16個小方格。但是不管計數區是哪一種構造,它們都有一個共同特點,即計數區都由400個小方格組成。計數區邊長為1mm,則計數區的面積為lmm2,每個小方格的面積為1/400mm2。蓋上蓋玻片後,計數區的高度為0.1mm,所以每個計數區的體積為0.1mm3,每個小方格的體積為1/4000mm3。使用血球計數板計數時,先要測定每個小方格中微生物的數量,再換算成每毫升菌液(或每克樣品)中微生物細胞的數量。
用血球計數板計數酵母菌懸液的酵母菌個數:
1、樣品稀釋的目的是便於酵母菌懸液的計數,以每小方格內含有4-5個酵母細胞為宜,一般稀釋10倍即可。
2、將血球計數板用擦鏡紙擦淨,在中央的計數室上加蓋專用的厚玻片。
3、將稀釋後的酵母菌懸液,用吸管吸取一滴置於蓋玻片的邊緣,使菌液緩緩滲入,多餘的菌液用吸水紙吸取,捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球計數室內。
4、計數時,如果使用16格×25格規格的計數室,要按對角線位,取左上,右上,左下,右下4個中格(即100個小格)的酵母菌數.如果規格為25格×16格的計數板,除了取其4個對角方位外,還需再數中央的一個中格(即80個小方格)的酵母菌數。
5、當遇到位於大格線上的酵母菌,一般只計數大方格的上方和右方線上的酵母細胞(或只計數下方和左方線上的酵母細胞)。
6、對每個樣品計數三次,取其平均值,按下列公式計算每1ml菌液中所含的酵母菌個數。
7、計算公式(1mL=1cm3=1000mm3)
(1)細菌數/mL=100小格內細菌個數/100/每個小方格的體積×1000×稀釋倍數
(2)細菌數/mL=80小格內細菌個數/80/每個小方格的體積×1000×稀釋倍數