背景：
在WHO5版「2.5 精子活力」章節中，介紹了用「帶網格的目鏡」評估精子活力的方法。在「附錄3，顯微鏡的使用」章節中，也提到用10x10mm網格目鏡測微尺做精子計數，但沒介紹具體方法。
實際的臨床應用中，多數客戶還是使用帶網格的精子計數板。究其原因，主要有2個條件不具備：
1、沒有合適的一次性精子計數板。
市場上常見的一次性計數板，都是利用虹吸原理，使精液進入計數池，精液粘稠度影響、精子遊動因素和計數池邊緣阻擋等，會影響計數結果；虹吸式計數板有些池深是20um，4倉設計，不符合使用習慣；由於計數板製造工藝等原因，計數池深度誤差較大。
2、顯微鏡很少配網格狀標尺。
很多老師提出精子計數板清洗起來費時費力，希望能使用一次性計數板。 Geoffrey®一次性計數板是蓋玻片型的，克服了虹吸式計數板的缺點。我們決定根據WHO5提到的方法實際測試一下。
說做就做！
準備實驗！
1、 E200相差顯微鏡
2、 方格型目鏡標尺（見下圖）
1cm2分為10x10=100個方格，在10倍物鏡視野下其面積為1mm2，和Makler計數板方格面積相同；在20倍物鏡下的視野面積是0.25mm2，故計數值需X4。
3、 Geoffrey®一次性精子計數板，滴加4ul精液標本，靜置30-60秒再計數，使用方法見下方示意圖
4、 帶網格Makler精子計數板
5、 質控珠
6、 新鮮精液
測試方法：
1、目鏡標尺和Makler計數板網格對比:
1.1、使用Nikon E200正立顯微鏡，在10倍目鏡、10倍物鏡下，目鏡標尺1格等於Makler計數板1格面積，與理論值一致。截圖如下：
1.2、在10倍目鏡、20倍物鏡下，目鏡標尺4格等於Makler計數板1小格面積，面積關係為1:4.。截圖如下：(細線為測微尺網格，粗線為計數板網格)
2、用測微尺網格實測質控珠
2.1、10倍物鏡下網格測微尺計數質控珠截圖：
2.2、20倍物鏡下，網格測微尺計數質控珠截圖：
3、用測微尺網格實測精子
3.1、10倍物鏡下測微尺網格計數精子截圖：
3.2、20倍物鏡下測微尺網格計數精子截圖：
結論：
1、 可以使用10x10mm網格目鏡測微尺配合「Geoffrey®」一次性精子計數板對精子和質控珠進行計數；
2、 在10倍目鏡、10倍物鏡下，使用網格測微尺計數，與Makler板方法相同； 3、 在10倍目鏡、20倍物鏡下，使用網格測微尺計數，計數結果需乘以4。
綜上所言：
使用網格目鏡測微尺和一次性計數板進行精子計數
• 符合WHO5 版用「帶網格的目鏡」評估精子活力的方法
• 使用Geoffrey®一次性計數板，省去了清洗計數板環節，節省操作時間
• 使用Geoffrey®一次性計數板，可減少由於精液粘稠度、精子遊動和邊緣阻擋影響
• 使用Geoffrey®一次性計數板與目鏡測微尺進行精子計數與Makler 計數板結論一致
• Geoffrey®一次性精子計數板，配有蓋玻片，加精液方法與Makler 計數板相同，與實驗室操作習慣一致
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