光合細菌的活菌計數和純種分離技術及保存方法

2020-11-30 騰訊網

光合細菌的活菌計數和純種分離技術

採用瓊脂固體培養基塗抹培養計數分離法。

條件:無菌室、過濾空氣鼓風工作檯、平皿、接種針、固體培養基、液體培養基、密封玻璃試管、高壓滅菌鍋、加熱器、培養箱等。

步驟:(在無菌室內操作)

1.將適量瓊脂固體培養基高壓蒸煮(120℃)20分鐘後,倒入若干個平皿冷卻到45℃以下,製成固體培養基待用。

2.取待測光合細菌菌液,分別用蒸餾水以10萬倍、50萬倍、100萬倍、500萬倍、5000萬倍、10000萬倍 稀釋。

3.分別從每個稀釋倍液中取1毫升的樣本各10個,均勻塗布於貼好相應標籤的平皿內固體瓊脂培養基平面上。

4.將平皿放入培養箱培養12-50個小時,如菌落未長成,再繼續培養,直到有明顯的菌落長成為止。

5.各種菌的菌落顏色、形狀各不相同,根據光合細菌菌落特徵,找出光合細菌菌落,並計數。取同稀釋倍液10個樣本菌落的平均數,乘以它的稀釋倍數,即可大約得出待測菌液每毫升含光合細菌的活菌數。取各稀釋倍液算出的每毫升含光合細菌活菌的平均數,即可較為準確地檢測出該待測菌液的濃度。實際操作並不如此簡單,因為菌落有雜菌和光合菌交錯在一起的,也有兩個以上光合細菌菌落合在一起的,很難分辨計數。

6.用接種針將光合細菌菌落挑出,用適量蒸餾水稀釋後,再塗布於固體培養基平面上,進行培養,待光合細菌在培養基上再次長成菌落後,在鼓風工作檯內用接種針挑出,接入盛有經高壓蒸煮滅活過液體培養基的試管內,進行密封厭氧培養,培養好的光合細菌就是純菌種。

純菌種的分離是專業性很強的一門技術,只有專業人員,且經驗豐富的,才能識別各種菌落,從中分離出有用的菌株。

光合細菌液體成品的保存方法

成品應放在低溫環境下,15度以下最好,夏季應放在涼爽的地方,並要保持一定的光照度,每天不低於2小時,這是因為PSB在剛剛結束培養時,正處於生長旺盛期,形成了很強的「生長慣性」,如果此時突然沒有了光照或光照很弱,經5~10天後會出現光合作用失衡而導致大量死亡,使菌液發黑,並有惡臭,剛開始發黑時若施以適當光照,即可緩和。所以剛培養好的成品應儘量降溫,逐步降光照,以減少生長慣性,到了生長慣性很弱或沒有慣性時,PSB就進入了穩定期,此時在陰涼避光處可保存6個月。

總之,保存期的長短主要取決於溫度、光度。通常您在正常的連續的生產及使用過程中,對PSB的的保存及留種無須做特別的處理,如:夏天在太陽下培養的產品就放於陽光下,可保2個月,可不斷地再培養,擴大,反覆等。秋天,培養的最後一批產品可保1年之久。

相關焦點

  • 強微「乳酸菌擴培液」-「光合細菌培養液」的製作和應用技術
    ,但使用前活化處理是必須的,麻煩的事總能給您帶來意想不到的效果和效益;     同時也建議養殖戶自己發酵製作一些液態「乳酸菌擴培液」,也可自己培養一些「光合細菌培養液」,雖然麻煩,卻可以獲得明顯的效果,還可以降低使用成本;     為什麼只是「乳酸菌擴培液」和「光合細菌培養液」呢,原因很簡單:⑴ 這兩株菌適合單菌擴培,培養後單菌純度高,可保存一個月備用:
  • 純種微生物的分離、轉種和培養
    一、 實驗目的 1、了解微生物分離和純化的原理; 2、掌握常用的分離純化微生物的方法; 3、掌握菌落特徵的觀察。 4、學習掌握微生物的幾種接種技術 5、建立無菌操作的概念,掌握無菌操作的基本環節 二、實驗原理 從混雜微生物群體中獲得只含有某一種或某一株微生物的過程稱為微生物分離與純化。平板分離法普遍用於微生物的分離與純化。
  • 水產養殖中,光合細菌如何使用與保存,才能保證效果?
    在水產養殖中光合細菌是使用很普遍的一類益生菌,不光是市面上賣的光合菌,其實我們平時用的EM菌也是含有光合細菌。所謂的光合菌通常是指在厭氧條件下進行不放氧光合作用的細菌的總稱,這一類菌的最大作用就是能分解養殖水體中的亞硝酸鹽、硫化物等對養殖產品有害的物質,從而起到提高養殖水體的水質和養殖產品健康度的作用。
  • 環境中微生物的檢測和分離純化
    2、學習並掌握各種無菌操作技術,並用此技術進行微生物稀釋分離、劃線分離接種。 3、用平板劃線法和稀釋法分離微生物。 4、認識微生物存在的普遍性,體會無菌操作的重要性。 從混雜的微生物群體中獲得只含有某一種或某一株微生物的過程稱為微生物的分離與純化。常用的是平板分離法。為了獲得某種微生物的純培養,一般是根據該微生物對雪養、酸鹼度、濃度和氧等條件要求不同,而供給它適宜的培養條件,或加入某些抑制劑抑制其他菌生長而利於此菌生長的環境,從而淘汰其他一些不需要的微生物.再用稀釋塗布平板法或稀釋後平板劃線分離,純化該微生物,直至得到純菌株。
  • 微生物實驗中 細菌計數的方法
    3、活細胞計數法   常用的有平板菌落計數法,是根據每個活的細菌能長出一個菌落的原理設計的。取一定容量的菌懸液,作一系列的倍比稀釋,然後將定量的稀釋液進行平板培養,根據培養出的菌落數,可算出培養物中的活菌數。此法靈敏度高,是一種檢測汙染活菌數的方法,也是目前國際上許多國家所採用的方法。
  • 做微生物的你,這些微生物培養與分離的方法你都知道嗎?
    根據待檢標本的性質、培養目的和所用培養基的種類,採用不同的接種方法。對混有多種細菌,採用劃線分離和培養,使原來混雜在一起的細菌沿劃線在瓊脂平板表面分離,得到分散的單個菌落,以獲得純種。平板劃線分離法通常有兩種方法:①分區劃線分離法:此法常用於含菌量較多的細菌的分離。
  • 光合細菌汙水資源化研究進展
    從光合細菌汙水資源化技術對營養型廢水的資源化、對高氨氮廢水的高效氮去除、對其他類型廢水的處理、光合細菌汙水處理重要影響因素、主要促進方法5個方面進行了綜述。最後對未來的研究進行了展望。全球面臨的水資源短缺、水汙染嚴重和能源危機,推動著汙水處理從簡單的汙染物去除向資源轉化發展。國際水協在2018年全球水與廢水前沿技術大會上提出,近幾年汙水處理的主題就是資源回收。
  • 自然界工業菌種的分離篩選
    而現代發酵工業是以純種培養為基礎,故採用各種不同的篩選手段,挑選出性能良好、符合生產需要的純種是工業育種的關鍵一步。自然界工業菌種分離篩選的主要步驟是:採樣、增殖培養、培養分離和篩選。如果產物與食品製造有關,還需對菌種進行毒性鑑定。 一、採樣 以採集土壤為主。
  • 細胞計數方法------細胞計數板法
    為了保證計數的準確性,避免重複計數和漏記,在計數時,對沉降在格線上的細胞的統計應有統一的規定。如菌體位於大方格的雙線上,計數時則數上線不數下線,數左線不數右線,以減少誤差。即位於本格上線和左線上的細胞計入本格,本格的下線和右線上的細胞按規定計入相應的格中。見下圖:即本格中計數細胞為3個。
  • 光合細菌在水產養殖中的作用及使用方法
    使用方法有兩種:一是以12500倍液全池潑灑,二是混在蛋黃中飼養。如泥鰍從孵化到捕食輪蟲階段,其死亡率達90%以上,當用光合細菌作為開口餌料時,其成活率可達60%。尤其是剛孵出不久的泥鰍仔魚,用光合細菌直接投喂,可使成活率達60%以上。  3、改善魚塘水質&nbsp&nbsp&nbsp&nbsp光合細菌具有多種不同的功能,如固氮、固碳、氧化硫化物和促進有機物充分分解等,通過吸收利用氨氮、亞硝酸鹽、硫化氫等有毒物質,促進有機物的循環,達到淨化水質的目的,可使魚蝦類攝食旺盛,正常生長。
  • 實驗三:1.單菌落純化 2.平板菌落計數法(4學時)
    一、實驗目的: 1.掌握基本的無菌技術操作規範
  • 研究:用光合細菌複合材料降解印染廢水
    北極星水處理網訊:1 引言偶氮染料是使用最多的染料,約佔全部染料的70%左右.偶氮染料分子結構中一般除了含有氮氮雙鍵外,其化學鍵上還連有苯環、萘環等結構,苯環或萘環上又有—NH2、—CH3、—NO2、—SO3、—Cl和—OH等取代基團.目前國內外處理偶氮染料廢水的方法仍以生化法為主
  • 南美白對蝦養殖用光合細菌培養技術
    南美白對蝦養殖用光合細菌培養技術2013-11-28 11:13:00  水產養殖網  出處:《海洋與漁業光合細菌Photosynthetic&nbspbacteria,PSB)是一類能在厭氧光照或好氧黑暗條件下利用有機物作供氫體兼碳源進行不放氧光合作用的細菌。由於其獨特的生理生化特性,已被推廣應用於淨化水質、魚蝦養殖、禽畜飼養、作有機肥料以及新能源開發等方面,其在改善蝦池水質、作為餌料生物和防治蝦病等方面效果顯著。
  • 2018粵東西北事業單位招聘醫學檢驗學基礎知識:細菌接種和分離技術
    粵東西北事業單位醫療網同步粵東西北事業單位招聘網醫療衛生信息:2018粵東西北事業單位招聘醫學檢驗學基礎知識:細菌接種和分離技術,請考生多加關注。   點擊查看>>2018粵東西北醫療衛生招聘公告(公告提前看,提前預約免費簡訊提醒)   點擊獲取>>>歷年粵東西北地區醫療衛生招聘考試模擬題   細菌的接種與分離技術是微生物室經常用到的檢驗技術,也是事業單位中經常考到的內容,小編就具這一部分知識給大家做一個總結。
  • 乾貨 | 細胞手工計數方法簡介
    首先,計數板需要清洗乾淨,使其乾燥,不能有油脂或者灰塵,蓋玻片亦如此,不乾淨的計數板嚴重影響計數結果的準確性。其次,提前預估細胞量,細胞濃度太低誤差大,細胞濃度太大容易數花眼。第三,儘可能使細胞分離成單個,無團塊無雜質;計數前快速吹打均勻,尤其是多次取樣計數時更要注意每次都要混勻,操作儘量迅速。第四,細胞液滴加到計數室再蓋蓋玻片,亦可先蓋玻片,從側面通過液體毛吸作用到達計數室,液體太多容易測流到計數板小溝,細胞容易被流走;液體太少容易在計數室或者附近形成空泡。
  • 基因分離定律和自由組合定律
    從細胞水平看,基因的分離定律和自由組合定律都發生在減數分裂形成配子的過程中,它們之間的關係可用下表表示: 關於基因分離規律和基因自由組合規律的解題技巧。關於兩對(或多對)相對性狀的遺傳題目的求解,可先研究每一對相對性狀(基因),然後再把它們的結果綜合起來考慮。
  • 【培養】專性厭氧菌的分離和培養
    目的1.1 了解厭氧微生物的生長特性1.2 觀察厭氧微生物(雙歧桿菌)的形態特徵1.3 掌握厭氧微生物的滾管分離、培養與計數技術  2.   亨蓋特厭樣滾管培養技術不僅可用於有益厭氧菌如雙歧桿菌等的分離、與活菌培養計數,還可以用於有害腐敗菌(如酪酸菌)或病 原菌(如肉毒梭狀芽孢桿菌)的分離與鑑定。   3.
  • 一種有益的微生物——光合細菌
    光合細菌(簡稱PSB)是以光為能源,以CO2或有機物為碳源,以硫化氫等為供氫體,進行自養或異養的一類原核微生物的總稱,廣泛分布於自然界的土壤、水田、沼澤、湖泊和江海等處,具有固氮、產氫、固碳和脫硫等多種生理生化功能,在自然界的物質循環中起著非常重要的作用。根據光合細菌所含光合色素和電子供體的不同而分為產氧光合細菌(藍細菌、原綠菌)和不產氧光合細菌(紫色細菌和綠色細菌)。
  • 實驗技術篇|如何提高細胞計數的準確性
    這個實驗的難點之處在於:每一次細胞的消化,細胞的處理,不同的細胞,甚至細胞混勻之後吹打的問題都會影響實驗計數的結果。後續因為每個細胞的生長狀況不同,所以種細胞的時候還需要按需求來調整所種細胞的量。今天就來聊聊如何提高細胞計數的準確性啦! 有條件的當然是電子細胞計數器啦!