高效液相色譜—清洗關機及操作注意事項

2021-01-08 上弦月涼

01清洗和關機

1、分析完畢後,先關檢測器和數據處理機,再用適當經濾過和脫氣的溶劑清洗 色譜系統,正相柱一般用正已烷,反相柱如使用過分含鹽流動相,則先用水洗,然後用甲醇-水衝洗,衝洗前先按6.1.1-6.1.2操作,再用分析流速衝洗,各種洗溶劑—般衝洗15-30分鐘,特殊情況應延長衝洗時間。

2、 衝洗完畢後,逐步降低流速至0,關泵,進樣器也應用相應溶劑衝洗,可使 用進樣閥所附專用衝洗接頭。

3、關斷電源,作好使用登記,內容包括日期、檢品、色譜柱、流動相、柱壓、 使用小時數、儀器完好狀態等。

02

1、色譜柱與進樣器及其出口端與檢測器之間應無滲漏連接,以免試樣擴散影響分離。

2、新柱或被汙染柱用適當溶劑衝洗時,應將其出口端與檢測器脫開,避免汙染。

3、使用的流動相應與儀器原保存溶劑能互溶,如不互溶,則先取下上次的色譜柱,照6.1.1-6.1.2的方法用異丙醇衝洗過渡,過渡完畢後,接上相應的色譜柱,換上本次使用的流動相,再按6.1.1順序操作。

4、壓力表無壓力顯示或壓力波動時不能進行分析,應檢查泵中氣泡是否已排除,各連接處有無漏液,排除故障後方能進行操作。如壓力升高,甚至自動停泵,應檢查柱端有無汙染堵塞,可小心卸開柱的進口端螺帽,挖出被汙染填衝劑後,補入同類填充劑,仔細安裝好,再進行操作。

5、發現記錄基線波動,出現毛刺等現象,首先應檢查檢測器流通池中是否有氣泡或汙染,如不是流通池引起,可等待氘燈穩定,同時檢查儀器的接地是否良好,必要時換上新的氘燈。儀器穩定後方能進行操作。

6、進樣前,色譜柱應用流動相充分衝洗平衡,如系統適用性並不符合規定,或填充劑已損壞,則應更換新的同類色譜柱進行分析,由於同類填充劑的化學鍵合相的鍵合度及性能等存在一定差異,往往依法操作達不到預定的分離時,可更換另一牌號的同類色譜柱進行試驗。

7、以矽膠作載體的化學鍵合相填充劑的穩定性受流動相pH值的影響,使用時,應詳細參閱說明書,在規定的pH值範圍內選用流動相,一般pH範圍為(2.5~7.5)。使用高pH值流動相時,可在泵與進樣器之間連接-矽膠短柱,以飽和流動相保護分析柱,並儘可能縮短在高pH值下的使用時間,用後立即衝洗。

8、各色譜柱的使用應登記,以方便選擇和更新。

9、色譜流路系統,從泵、進樣器、色譜柱到檢測器流通池,在分析完畢後,均應按5.1充分衝洗,特別是用過含鹽流動相的,更注意先用水,再用甲醇一水,充分衝洗。如發現泵漏液等較嚴重的情況,應請有經驗的維修人員進行檢查、維修。

相關焦點

  • 使用高效液相色譜儀的幾個注意事項
    使用高效液相色譜儀的幾個注意事項 嘉峪檢測 發表於 2020-03-15 17:10:00 高效液相色譜儀(HPLC)是分析實驗室常用的測試儀器之一,其應用越來越廣泛
  • 高效液相色譜儀常規分析操作步驟及規程
    打開APP 高效液相色譜儀常規分析操作步驟及規程 佚名 發表於 2009-12-25 16:52:32 高效液相色譜儀常規分析操作步驟及規程
  • 液相色譜常見問題及處理方法
    在經典液相色譜的基礎上,引入了氣相色譜的理論與技術,在70年代初建立了高效液相色譜分析法(以HPLC表示)。在常壓下操作的液相色譜,分離一個樣品往往長達幾小時至幾十小時,因此工作效率很低。人們曾對這種經典液相色譜法試用了柱前加壓或柱後減壓的辦法來提高流速,以縮短分離時間,但是結果失敗了。根據液相色譜理論,因為隨著載液(流動相)流速的提高,板高則增大,所以柱效會顯著降低。
  • 沃特世:更高效、更智能是液相色譜發展大趨勢
    上世紀60年代,由於氣相色譜對高沸點有機物分析的局限性,為了分離蛋白質、核酸等不易氣化的大分子物質,氣相色譜的理論和方法被重新引入經典液相色譜,20世紀60年代末,世界上第一臺高效液相色譜儀問世,開啟了高效液相色譜的時代。
  • 高效液相色譜菜鳥掃盲篇
    作者:qingqingcao摘要:文章介紹了高效液相色譜的各個部件及其功能。詳細介紹泵,檢測器,進樣器,色譜柱等。
  • 【組圖】高效液相色譜菜鳥掃盲篇
    北極星環境監測網訊:文章介紹了高效液相色譜的各個部件及其功能。詳細介紹泵,檢測器,進樣器,色譜柱等。通過介紹高效液相色譜儀,讓應用者知道HPLC部件,為以後掌握HPLC使用打下堅實的基礎。首先需要和同學們講的是HPLC主要測試的是有機物質,無機物質用AAS,UV等光譜儀器,或者用離子色譜測試。高效液相色譜經常被我們初學者視為高級貨。
  • 在線脫氣在高效液相色譜中的應用
    高效液相色譜儀簡介高效液相色譜運行所需要的基本組成為液相色譜儀和流動相。高效液相色譜儀(HPLC)由泵、進樣器、柱溫箱、檢測器四部分組成。氣泡生的來源在液相色譜對有機物分析過程,由於有機物在各類型色譜柱中保留特性的不同,我們需要使用不同比例的流動相作為洗脫劑對樣品進行分離洗脫,從而達到化合物的分離和純化。
  • HPLC使用注意事項及柱子使用經驗之談
    Performance Liquid Chromatography/HPLC)又稱「高壓液相色譜」、「高速液相色譜」、「高分離度液相色譜」、「近代柱色譜」等。高效液相色譜是色譜法的一個重要分支,以液體為流動相,採用高壓輸液系統,將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩衝液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱,在柱內各成分被分離後,進入檢測器進行檢測,從而實現對試樣的分析。該方法已成為化學、醫學、工業、農學、商檢和法檢等學科領域中重要的分離分析技術應用。
  • 2018年色譜儀器最新產品技術進展(上)——液相色譜篇
    本文將分類介紹2018年上市的部分氣相、液相及其他色譜新產品的技術特點。    在上篇中,我們先來帶大家看看2018年,液相色譜新品的風採!  液相色譜:提升效率 智能互聯  2018年,中國市場有10數款液相色譜面市,國內外廠家均有新品推出。
  • UPLC(超高效液相色譜)簡介
    超越HPLC 隨著科學技術的進步,對液相色譜技術的要求也不斷提高,單從技術角度的改進已經不行。這就需要同時從科學與技術的角度出發,或者說從理論高度對液相色譜重新認識。因此,UPLC(超高效液相色譜)概念得以提出,將HPLC的極限作為自己的起點。
  • 高效液相色譜監測中藥的發展現狀及前景
    梯度洗脫的高效液相色譜法,能分析較寬極性範圍的樣品,較等度洗脫具有很大的優勢,但對於成分更複雜、極性範圍更寬的中藥樣品則有些力不從心。多柱高效液相色譜法又稱多維高效液相色譜法。除具有梯度洗脫一樣的改變流動相濃度的優點外,還可以改變固定相種類、鍵合度、粒徑、柱長、柱徑等及流動相種類、濃度等。  2.2進一步向自動化、智能化及聯用技術上發展。
  • 枸杞的高效液相色譜指紋圖譜
    枸杞的高效液相色譜指紋圖譜 來源:www.bioon.com 2006-12-17 01:33 摘要:採用高效液相色譜-二極體陣列檢測器聯用儀(HPLC-DAD
  • 液相色譜系統組成部分全解析
    液相泵液相泵是高效液相色譜儀系統中比較重要的部件之一,相當於是人體的心臟的作用,可以將流動相勻速注入液相色譜系統中,形成穩定的流路。泵的性能好壞會直接影響到分析過程速率以及分析結果的準確性。一般而言,輸液泵應具備流量穩定、輸出壓力高、密封性好等性能。
  • 相比於氣相色譜,液相色譜有什麼特點呢?
    液相色譜也是分離與分析技術的一種,特點是以液體作為流動相,固定相可以有紙、薄板、填充床等多種形式。那麼,氣相色譜與液相色譜相比有什麼特點呢?可以從以下幾個方面進行比較:流動相:氣相色譜用氣體作為流動相,又稱為載氣。常用的載氣有氦氣、氮氣和氫氣。與高效液相色譜相比,氣相色譜流動相的種類較少,選擇範圍小。
  • 高效液相色譜儀的日常維護與保養
    一、 流動相的要求   液相色譜是樣品組分在柱填料與流動相之間質量交換而達到分離的目的,因此要求流動相具備以下特點:1 純度 流動相必須用HPLC級的試劑,使用前過濾除去其中的顆粒性雜質和其他物質(使用0.45um或更細的膜過濾)。
  • 如何愛護液相色譜柱?保護與再生必須要學
    樣品中強保留物質逐漸在色譜柱中積累造成高效液相色譜儀色譜柱的汙染,情況嚴重的直接造成色譜柱報廢。為延長色譜柱的使用壽命,常用到的方法是色譜柱保護與再生。高效液相色譜儀色譜柱在色譜分析系統中主要起著分離檢測物質的作用,如同色譜系統的心臟,同時也是易損耗品。
  • 高效液相色譜法手性色譜柱分離β-阻滯劑對映體
    高效液相色譜法手性色譜柱分離β-阻滯劑對映體色譜柱由柱管、壓帽、卡套(密封環)、篩板(濾片)、接頭、螺絲等組成。可分為填充柱和開管柱兩大類。多為金屬或玻璃製作,有直管形、盤管形、U形管等形狀,液相色譜通常均採用填充柱。
  • 高效液相色譜儀基本原理、應用及常見故障
    1 高效液相色譜儀的系統組成、工作原理    高效液相色譜儀的系統由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。由於HPL C具有高解析度、高靈敏度、速度快、色譜柱可反覆利用, 流出組分易收集等優點,因而被廣泛應用到生物化學、食品分析、醫藥研究、環境分析、無機分析等各種領域。高效液相色譜儀與結構儀器的聯用是一個重要的發展方向。
  • 解讀:最新SPMA高效液相色譜國家標準
    目前國外研究機構主要採用高效液相色譜法(HPLC)、液質聯用(LC-MS、LC-MS/MS)、氣相色譜法(GC)、氣質聯用(GC-MS)和酶聯免疫吸附試驗(ELISA)等方法檢測尿中SPMA。HPLC法是各國職業衛生機構進行生物監測的常用方法。目前國內HPLC儀基本普及,利於其作為職業苯接觸尿中SPMA檢測方法的應用。
  • 高效液相色譜儀原理
    .htm  高效液相色譜儀也叫高壓液相色譜、高速液相色譜、高分離度液相色譜等,它是在經典液相色譜法的基礎上,於60年代後期引入了氣相色譜理論而迅速發展起來的。它與經典液相色譜法的區別是填料顆粒小而均勻,小顆粒具有高柱效,但會引起高阻力,需用高壓輸送流動相,故又稱高壓液相色譜。又因分析速度快而稱為高速液相色譜。