2、高效液相色譜的研究動向
2.1縮短分析時間,提高分離效率。應用先進的檢測儀器和方法,對流動相、固定相進行調節或改變,採用梯度洗脫、柱切換技術有望解決這個問題。梯度洗脫的高效液相色譜法,能分析較寬極性範圍的樣品,較等度洗脫具有很大的優勢,但對於成分更複雜、極性範圍更寬的中藥樣品則有些力不從心。多柱高效液相色譜法又稱多維高效液相色譜法。除具有梯度洗脫一樣的改變流動相濃度的優點外,還可以改變固定相種類、鍵合度、粒徑、柱長、柱徑等及流動相種類、濃度等。
2.2進一步向自動化、智能化及聯用技術上發展。液相色譜與質譜聯用在國外已成為測定低濃度生物藥品中藥物及代謝物的首選方法,LC-MS-MS法測定血漿中HIV-1蛋白酶,準確高效,血漿中殘留的內源性組份和其他藥物不幹擾測定,既節省材料又節約時間。已經應用於體液、血漿、血清中的藥物分析。中藥複方注射液「清開靈」中的膽酸類物的分析採用液相色譜質譜質譜聯用,效果理想。高效液相色譜-核磁共振聯用在藥物分析方面的作用很不錯。新近提出的智能多柱高效液相色譜系統利用切換技術的模塊式分離性能,把樣品分塊的切換進不同性質的色譜柱,再用合適的流動相洗脫。全過程採用智能化控制。
3、高效液相色譜在中藥分析中的應用前景
中藥研究的大趨勢是全成分分析,通過對從單味藥到複方的不同配伍、煎煮時間等的研究,才能發現中藥中化學成分的變化規律,找到中藥機理之間的有機聯繫。中藥成分繁多,且各種成分的性質遍布所有極性段、酸鹼範圍。實現多成分分析的最簡單途徑即在一根足夠長的色譜柱上,採用溫和的流動相,在足夠久的時間內洗脫。但這與現代分析要求的簡便快速相違。通過大量的應用研究表明,高效毛細管電泳在分析中藥成分,尤其在分析高極性化學成分方面有較大優勢,在分析大量的複方製劑方面顯示了較高的能力。由於毛細管幾乎不會出現高效液相色譜分析中常出現的柱床汙染現象,而且用過的毛細管柱只需很短的時間進行衝洗後,即可以進行第二個樣品的分析,快速高效且解析度很高。新興的毛細管電色譜是集高效液相色譜和毛細管電泳優勢於一身的一種新型電分離微柱液相色譜技術,它是將高效液相色譜的多種填料微粒移到毛細管中,以樣品與固定相間的相互作用作為分離機制,以電滲流為流動相驅動力的色譜過程。最近,一些先進的檢測儀器成功的用在了高效液相色譜分析法上,使得高效液相色譜的應用更廣泛,並充分利用高效快速、選擇性好、靈敏度高等優點,建立更加系統的成分分析方法。通過與質譜聯用、梯度洗脫、柱切換技術、配合先進的檢測技術,以及與分子生物學、現代分子藥理學相結合,必將在中藥分析中發揮很大作用。