一、目的要求
土壤有機質含量是衡量土壤肥力的重要指標，對了解土壤肥力狀況，進行培肥、改土有一定的指導意義。
通過實驗了解土壤有機質測定原理，初步掌握測定有機質含量的方法既注意事項。能比較準確地測出土壤有機質含量。
二、方法原理
在加熱條件下，用稍過量得標準重鉻酸鉀—硫酸溶液，氧化土壤有機碳，剩餘的重鉻酸鉀用標準硫酸亞鐵（或硫酸亞鐵銨）滴定，由所消耗標準硫酸亞鐵的量計算出有機碳量，從而推算出有機質的含量，其反應式如下：
2K2Cr2O7+3C+8H2SO4→K2SO4+2Cr2(SO4)3+3CO2+8H2O
K2Cr2O7+6FeSO4+7H2SO4→K2SO4+ Cr2(SO4)3+3Fe2(SO4)3+8H2O
用Fe2+滴定剩餘的K2Cr2O72-時，以鄰啡羅啉（C2H8N2）為氧化還原指示劑，在滴定過程中指示劑的變色過程如下：開始時溶液以重鉻酸鉀的橙色為主，此時指示劑在氧化條件下，呈淡藍色，被重鉻酸鉀的橙色掩蓋，滴定時溶液逐漸呈綠色（Cr3+），至接近終點時變為灰綠色。當Fe2+溶液過量半滴時，溶液則變成棕紅色，表示顏色已到終點。
三、儀器試劑
1. 儀器用具
硬質試管（18mm×180mm）、油浴鍋、鐵絲籠、電爐、溫度計（0~200℃）、分析天平（感量0.0001g）、滴定管（25ml）、移液管（5ml）、漏鬥（3~4cm），三角瓶（250ml）、量筒（10ml，100ml）、草紙或衛生紙。
2. 試劑配製
1.0.1333mol/L重鉻酸鉀標準溶液 稱取經過130℃烘燒3~4h的分析純重鉻酸鉀39.216g,溶解於400ml蒸餾水中，必要時可加熱溶解，冷卻後架蒸餾水定容到1000ml，搖勻備用。
2.0.2mol/L硫酸亞鐵（FeSO4.7H2O）或硫酸亞鐵銨溶液 稱取化學純硫酸亞鐵55.60g或硫酸亞鐵銨78.43g，溶於蒸餾水中，加6mol/L H2SO41.5ml，再加蒸餾水定容到1000ml備用。
3.硫酸亞鐵溶液的標定 準確吸取3份0.1333mol/L K2Cr2O7標準溶液各5.0ml於250ml三角瓶中，各加5ml6mol/L H2SO4和15ml蒸餾水，再加入鄰啡羅啉指示劑3~5滴，搖勻，然後用0.2mol/LFeSO4溶液滴定至棕紅色為止，其濃度計算為：
c=
式中：c——表示硫酸亞鐵溶液摩爾濃度（mol/L）；
V——滴定用去硫酸亞鐵的體積（mol）；
6——6mol FeSO4與1mol K2Cr2O7完全反應的摩爾係數比值。
4.鄰啡羅啉指示劑 稱取化學純硫酸亞鐵0.659g和分析純鄰啡羅啉1.485g溶於100ml蒸餾水中，貯於眾色滴瓶中備用。
5.石蠟 （固體）或磷酸或植物油2.5kg。
6.6mol/L硫酸溶液 在兩體積水中加入一體積濃硫酸。
7.濃H2SO4 化學純，密度1.84。
四、操作步驟
1. 準確稱取通過60號篩的風乾土樣0.1000~0.5000g（程量多少依有機含量而定），放入乾燥硬質試管中，用移液管準確加入0.1333mol/L重鉻酸鉀溶液5.00ml，再用量筒加入濃硫酸5ml，小心搖動。
2. 將試管插入鐵絲籠內，放入預先加熱至185~190℃間的油浴鍋中，此時溫度控制在170~180℃之間，自試管內大量出現氣泡時開始計時，保持溶液沸騰5min，取出鐵絲籠，代試管稍冷卻後，用草紙擦拭乾淨使館外部油液，放涼。
3. 經冷卻後，將試管內容物洗入250ml的三角瓶中，使溶液的總體積達60~80ml ,酸度為2~3mol/L，加入鄰啡羅啉指示劑3~5滴搖勻。
4. 用標準的硫酸亞鐵溶液滴定，溶液顏色由橙色（或黃綠色）經綠色、灰綠色變到棕紅色即為終點。
5. 在滴定樣品的同時，必須做兩個空白試驗。取其平均值，空白試驗用石英砂或灼燒的土代替土樣，其餘操作相同。
五、結果計算
有機質=
式中：c——表示硫酸亞鐵消耗摩爾濃度（mol/L）；
V0——空白試驗消耗得硫酸亞鐵溶液的體積（ml）；
V——滴定待測土樣消耗的硫酸亞鐵的體積（ml）；
0.003——1/4mmol碳的克數；
10172——由土壤有機碳換算成有機質的換算係數；
1.1——校正係數（用此法氧化率為90%）。
六、注意事項
1. 土壤有機質含量為7%—15%時，可稱取0.1000g；2%—4%時可稱取0.3000g；少於2%時的，稱取0.5000g以上。
2. 消煮時計時要準確，因為對分析結果的準確有較大的影響。
3. 對含氮化物多的土壤樣品，應加入0.1mol/L左右的硫酸銀，以消除氯化物的幹擾。
4. 測定石灰性土樣時，必須徐徐加入濃硫酸，以防止由碳酸鈣分解是激烈發泡而引起飛濺損失樣品。
5. 在測定還原性強的水稻土時，把已磨細的樣品，攤成.堡層風乾十餘天，使還原性物質充分氧化後，再測定。
6. 燒煮完畢後，溶液的顏色為橙黃色或黃綠色。若是以綠色為主，說明重鉻酸鉀用量不足，在滴定時，消耗硫酸亞鐵量小於空白1/3時，均應棄去重做，因為沒有氧化完全。
7. 土壤樣品中存留植物根、莖、葉等有機物時，必須用尖頭鑷子挑選乾淨。
8. 油浴時，最好選用磷酸代替植物油，他易於洗滌，汙染少，同時，也便於觀察。