核糖核酸酶H在病毒基因組轉錄成DNA的多個階段中執行重要功能

2020-12-17 毛毛叔叔

在很多反轉錄病毒中,核糖核酸酶H與多功能酶的反轉錄酶有關,在病毒基因組轉錄成DNA的多個階段中執行重要功能。

在真細菌中,核糖核酸酶H確信在以下方面是必需的:從Okazaki片段去除RNA引物時、在轉錄物進入DNA聚合酶I啟動DNA合成所用引物的轉錄過程時,以及在去除R-環為在大腸桿菌染色體複製起點提供不規則DNA合成的條件性起始位點時。

在真核細胞中,核糖核酸酶H也可能執行類似的功能。據報導,核糖核酸酶H可顯著地增強反義寡脫氧核苷酸對基因表達的抑制作用,這些寡核苷酸和mRNA中的特定序列雜合子對此酶的降解敏感。

核糖核酸酶H在體外啟動對在Colicin E1( pColE1)型質粒的原始部位(Ori) 的複製是必需的。此酶似乎也抑制啟動非Ori部位的DNA合成。X射線晶體成像分析顯示,大腸桿菌核糖核酸酶H含有兩個結構域,其中一個含Mg*結合位點,與一種前不久在DNA聚合酶I中被認識的摺疊鏈吻合。

大腸桿菌dut基因編碼dUTP酶,它是一個含鋅的四聚焦磷酸酶(分子質量64000Da)。在dut突變體中,細胞轉化dUTP為dUMP的能力受損,這導致細胞中dUTP池的水平,上升25~ 30倍,從而造成dUTP/dTTP的比例上升,使得dUTP摻入本應由dTTP佔據的位點的頻率上升。

在Kunkel方法中使用的dut突變型的大腸桿菌都含有痕量的dUTP酶活性,也許是因為完全缺乏這個酶活性會致死(el-Haj et al. 1988)。

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