TCGA腫瘤微環境+免疫細胞浸潤純生信思路

2021-03-03 SCI狂人

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上次分享了GEO數據挖掘的純生信套路,現在分享一下TCGA腫瘤微環境+免疫細胞浸潤純生信思路。本次介紹的文章發表在Bioengineered,影響因子2.2,作者來自安徽醫科大學,研究的是乳腺癌方向,文章題目:Bioinformatics analysis to screen key prognostic genes in the breast cancer tumor microenvironment(PMID: 33164640)。

研究背景:

越來越多的證據表明,腫瘤微環境在腫瘤的發生和發展中起著重要作用,並且還可以影響患者的預後。

研究方法:

在這項研究中,我們通過分析腫瘤樣品的免疫和基質評分以檢測差異表達基因(,篩選了乳腺癌腫瘤微環境中的關鍵預後基因,並構建了腫瘤微環境相關的預後模型。首先,我們從TCGA資料庫獲得了乳腺癌患者的mRNA-Seq和相關臨床信息,並使用ESTIMATE算法計算了腫瘤組織的基質和免疫評分。接下來,我們進行了功能富集分析,並從與腫瘤微環境高度相關的差異基因中生成了蛋白質-蛋白質相互作用網絡。最後,對TCGA的乳腺癌數據集進行了Cox比例風險回歸分析,並對浸潤的免疫細胞和人類蛋白質圖譜進行了分析。

研究結果:

總之,這些分析表明,KLRB1和SIT1基因可以用作BC的獨立預後因素,而風險評分,年齡和臨床階段則可以用作預後因素。

研究結論:

總之,我們發現乳腺癌的預後與腫瘤微環境中的免疫調節密切相關。

分析思路如下:

1、下載TCGA表達數據、臨床數據以及免疫評分、基質評分,將這些評分分為高分組和低分組,然後做high vs low的差異分析,然後取交集的差異基因,得到226個差異基因,同時做了這些評分與臨床特徵的相關性分析

2、將這226個差異基因進行GO、KEGG富集分析

3、將226個差異基因批量繪製生存曲線,篩選出p值小於0.05的基因,一共得到66個有預後價值的基因

4、將66個有預後價值的基因做PPI分析

5、先單因素Cox篩選出20個基因,然後構建多因素Cox分析,最後構建3個基因的模型算出risk score,根據risk score(high vs low)繪製生存曲線,ROC曲線,risk score 結合臨床因素再建模

6、根據risk score的高低風險組構建GSEA

7、免疫細胞浸潤分析

8、分析3個核心基因的蛋白表達水平

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