移液器使用、校準和管理的標準操作規程

【目的】

本規程規定了移液器使用、校準和管理的標準操作規程，使操作人員和移液器的管理人員能夠有章可循，保證移液器的使用、校準和管理符合GLP規範的要求。

【規程】

1 移液器的使用

1.1選擇量程合適的移液器：移液器只能在特定量程範圍內準確移取液體，如超出最低或最大量程，會損壞移液器並導致計量不準；

1.2 設定容量值

1.2.1 粗調：通過調節旋鈕將容量值迅速調整至接近自己的預想值；

1.2.2 細調，當容量值接近設定值以後，應將移液器刻度顯示窗平行放至自己的眼前，通過調節旋鈕慢慢地將容量值調至預想值，從而避免視覺誤差所造成的影響；

1.2.3 設定容量值時的注意事項：在調節量程時，如果要從大體積調為小體積，則按照正常的調節方法，逆時針旋轉旋鈕即可。但如果要從小體積調為大體積時，則應先順時針旋轉刻度旋鈕至超過量程的刻度，再回調至設定體積，這樣可以保證量取的最高精確度。在設定容量值的過程中，禁止將按鈕旋出量程，否則會卡住內部機械裝置而損壞了移液器。

1.3吸液嘴（槍頭）的裝配：把白套筒頂端插入吸液嘴，在輕輕用力下壓的同時，把手中的移液器按逆時針方向旋轉至吸液嘴卡緊。切記用力不能過猛，更不能採取剁吸頭的方法來進行安裝。吸液嘴卡緊的標誌是略為超過O型環，並可以看到連接部分形成清晰的密封圈。；

1.4預洗吸液嘴：在安裝了新的吸液嘴或增大了容量值以後，應該把需要轉移的液體吸取、排放兩到三次，確保移液工作的精度和準度；

1.5吸液：先將四指併攏握住移液器上部，用拇指按住塞杆頂端的按鈕，向下按到第一停點，再將吸頭垂直浸入液面2~3mm，緩慢平穩鬆開按鈕，吸上液體，並停留1～2秒鐘（粘性大的溶液可加長停留時間）；

1.6 移液：緩慢抬起移液器取出吸液嘴，確保吸液嘴外壁無殘留液體。可用定性濾紙抹去吸嘴外面可能黏附的液滴。小心勿觸及吸液嘴口；

1.7 目測吸入的液體體積是否合理；

1.8 放液：將吸液嘴貼到容器內壁並保持20°-40°傾斜，平穩地把按鈕壓到第一停點，停1-2s（粘性大的液體要加長停留時間）後，繼續按壓到第二停點，排出殘餘液體。鬆開按鈕，然後將吸液嘴沿著內壁向上移開；

1.9 按吸頭彈射器除去吸頭，吸取不同樣本液體時必須更換吸頭；

2 移液器的校準

2.1 為保證取樣的準確性，移液器應定期校準，本中心規定移液器一年校準二次，二次間隔不超過7個月，由後勤保障部統一完成。最大量程小於10μL的移液器送有資質的單位校準；

2.2 計量性能要求：移液器在標準溫度20℃時，其容量允許誤差和測量重複性應符合表1的要求；

2.3 校準條件

2.3.1 校準環境：移液器應在室溫為（20±5）℃之間，且室溫變化不得大於1℃/h的條件下進行；

2.3.2 校準介質：使用超純水，提前24h放入實驗室內，使其溫度與室溫溫差不得大於2℃；

2.3.3 校準設備：主要設備必須經法定技術機構鑑定合格且在鑑定周期內。電子天平（測量範圍200g；分度值0.1mg）；溫溼度表；溫度計（測量範圍（0~50）℃；分度值0.1℃）；燒杯（50ml）1個；燒杯（100ml）1個；定性濾紙若干小塊（經恆溫處理）；

2.4 校準方法

2.4.1 打開電子天平，空載調零；將溫度計放置在盛放超純水的器皿內；

2.4.2 放入小燒杯待天平顯示穩定後，按下歸零鍵歸零。給移液器上安裝相應的吸液嘴，對移液器的槍頭進行預洗，在移液器校準記錄表上記錄當前的環境溫溼度；

2.4.3 將移液器的容量調至被檢點；

2.4.4 垂直的握住移液器，將按鈕旋轉至檢定位置，此時將吸液嘴侵入裝有超純水的容器內，並保持在液面下1~3mm處，緩慢放鬆按鈕，等待1s~2s後離開液面，如吸液嘴佔有多餘液體，則使用定性濾紙吸乾（小心勿觸及吸液嘴口）；

2.4.5 將吸液嘴流液口靠在天平秤盤上的燒杯內壁，並與其成大約45°角，緩慢地把按鈕按至第一停止點，等待1s~2s後再將按鈕快速完全按下，然後將吸液嘴沿著稱量杯的內壁向上移開。

2.4.6 待天平顯示穩定後，馬上讀取並在移液器校準記錄表上記錄此時電子天平顯示出的數值。記錄完畢將電子天平復零；

2.4.7 重複5次執行（4）~（6）條。記錄完畢，將移液器的容量調至下一被檢點繼續。被檢點遵循從小到大的原則進行調整；

2.5 數據處理

2.5.1 移液器實際容量計算：將所測得的質量值帶入以下公式，求得移液器在標準溫度20℃時的實際容量值；

 

式中：V₂₀ ——標準溫度20℃時的移液器的實際容量，mL；

m ——被檢移液器所排出的超純水質量， g；

K(t) ——測定值m和測定時超純水溫度的比例係數，列於附錄2中；

2.5.2 移液器的容量相對誤差計算：將換算得到的實際容量值帶入以下公式，求得移液器在標準溫度20℃時的容量相對誤差；

式中：V ——標稱容量，μL；

 ——5次測量的算數平均值，μL；

2.5.3 移液器的容量重複性計算：將換算得到的實際容量值帶入以下公式，求得移液器在標準溫度20℃時的容量重複性；

式中：σ_n-1 ——標準偏差；

n ——測量次數；

S ——重複性；

2.5.3 將計算結果填寫在移液器校準記錄表上，並給出校準結論。

2.6 校準結果處理

2.6.1經校準合格的移液器貼上校準合格證標識，註明校準編號、單位、日期及有效期。校準編號格式由ZJ年度-移液器編號-本年度校準次數組成，如2009年001號移液器的第一次校準的號為ZJ09-001-01，此標識於每次校準後更換；

2.6.2 如測試的3個量程有1個量程的容量允許誤差和測量重複性超出表1要求，應清洗、修正並重新校準。重新校準仍不合格的，退回廠家修理或作廢棄處理；

2.7 移液器的修正

2.7.1 將移液器調整至最小量程，按照校準方法得到當前的實際容量值，根據與標示容量值的差值，通過移液器上的調準旋鈕進行調整；

2.7.2 當調整後測得的實際容量值與標示容量值符合表1要求時，將移液器容量調整至中間量程繼續測量。中間量程符合要求時，再調整至最大量程繼續測量。

2.7.3如果中間量程或者最大量程有一個不符合表1要求時，則需重新調整至最小量程繼續修正。直到3個量程的值都符合表1要求為止。

2.7.4 修正完畢的移液器，需重新進行校準。

2.7.5 最小量程低於10μL的，不進行修正。如果最大量程和中間量程符合校準要求的，繼續使用，否則返廠維修。

3 移液器的使用注意事項

3.1 如長時間不使用，要把移液槍的量程調至最大值的刻度，使彈簧處於鬆弛狀態以保護彈簧；

3.2 定期清潔移液槍外壁，可以用95%酒精或60%的異丙醇，再用蒸餾水擦拭，自然晾乾；

3.3 使用時要檢查是否有漏液現象。方法是吸取液體後懸空垂直放置幾秒中，看看液面是否下降。如果漏液，則檢查吸液嘴是否匹配和彈簧活塞是否正常；

3.4 當移液器吸嘴內有液體時，嚴禁將移液器水平或倒置放置，以防液體流入活塞室腐蝕移液器活塞；

附表1：移液器容量允許誤差和測量重複性

 

標稱容量/μL	校準點/μL	容量允許誤差 ±(%)	測量重複性 ≤(%)
20	2	12.0	6.0
	10	8.0	4.0
	20	4.0	2.0
50	5	8.0	4.0
	25	4.0	2.0
	50	3.0	1.5
100	10	8.0	4.0
	50	3.0	1.5
	100	2.0	1.0
200	20	4.0	2.0
	100	2.0	1.0
	200	1.5	1.0
1000	100	2.0	1.0
	500	1.0	1.0
	1000	1.0	0.5
5000	500	1.0	0.5
	2500	0.5	0.2
	5000	0.6	0.2

附表2：K(t)值

以上是小編整理的移液器使用、校準和管理的標準操作規程