流感病毒檢測方法大匯總!

2021-03-02 醫學界檢驗頻道

流感病毒在病毒分類學上屬於正黏病毒科，其遺傳物質由8個大小不等的獨立單股負鏈RNA片段組成，共編碼10個蛋白。其特點是容易發生變異。分為甲乙丙三型，其中甲型流感病毒經常發生抗原變異，可感染人和多種動物，常引起大流行和中小流行；乙型流感病毒變異較少，可感染人類，引起爆發或小流行；丙型較穩定，可感染人類，多為散發病例。

目前流感病毒在世界時有暴發流行，因此建立科學快速的診斷方法顯得尤其重要！


圖1：透射電鏡下的流感病毒（175000X）

目前流感病毒的常用檢測方法檢測方法主要有病毒分離鑑定、血清學方法和分子生物學方法。

病毒分離是流感病毒檢測的傳統方法之一，包括雞胚接種和細胞培養。目前分離流感病毒主要應用馬達犬腎細胞（MDCK）為宿主系統。流感病毒的檢測時間一般需要4-5天。

1. 血清學診斷

主要是檢測患者血清中的抗體水平，即用已知的流感病毒抗原來檢測血清中的抗體。血清抗體檢測方法不能在感染初期抗體還未產生或低於檢測濃度時進行檢測。

2. 抗原檢測

病毒抗原的檢測的方法主要有兩類：直接螢光抗體檢測和免疫膠體金層析方法。直接螢光抗體檢測方法是應用螢光色素標記抗體分子後，再與標本中特異性抗原結合，用螢光顯微鏡觀察細胞中的病毒抗原及其存在的位置。免疫膠體金層析技術具有操作簡便，無需任何專用儀器；檢測結果直觀，方便基層單位和現場使用。

常用的方法有核酸雜交、逆轉錄一聚合酶鏈反應、多重逆轉錄一聚合酶鏈反應、酶聯免疫PCR、實時定量。PCR、依賴性核酸序列擴增、螢光PCR等方法。近年來，應用基因晶片對流感病毒進行檢測和分型是研究的一大熱點，可以同時檢測多種病毒，尤其適用於流感多亞型、易變異的特點。但這種方法對實驗條件要求較高，核酸檢測的普遍優點在於具有檢測速度快、特異性強、易於操作的特點。

參考資料：

1：陸慧君，賀文琦，鄧旭明等。流感的實驗室診斷方法[J].動物醫學進展，2005，26（5）：105-109

2：Lau LT, et al. Nucleic acid sequence-based amplification methods to detect avian influenza virus. Biochem Biophys Res Commun. 2004;313（2）：336-42.

3：夏駿，鄧菲，胡志紅等。用液相晶片方法檢測禽流感病毒H5N1亞型的研究。檢驗醫學，2009，24（9）：682-687.

本文首發：醫學界感染頻道

本文作者：浩然

責任編輯：匡小輝

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