微載體能培養間充質幹細胞嗎?
康寧公司利用合成的玻連蛋白含RDG的序列Synthemax II,包被PS材質的微載體,開發出專門用於間充質細胞的微載體。這可是發表在Nature Biotechnology上的方法喲!
一起來看看康寧低濃度Synthemax II表面微載體的表現吧!有圖有真相,噹噹噹噹……
這是間充質幹細胞培養第4天的圖片,80-90%的球表面都被間充質幹細胞覆蓋了。
康寧低濃度Synthemax II表面微載體是否能支持間充質幹細胞長時間生長呢?數據來說話!
這是間充質幹細胞配合兩種無血清培養基(A: Mesencult XF medium; B: hMSC stemgro medium)進行長時間培養的擴展曲線。間充質幹細胞在Mesencult XF medium(A)中生長了42天,擴增了1萬倍;在康寧hMSC stemgro medium(B)中生長了26天,擴增超過1千萬倍。
我們還觀察到間充質幹細胞從一個微載體爬到另一個微載體。莫非,這就是傳說中的球轉球?
圖C示意加入紅色新球之後,間充質幹細胞從原來的灰色球上轉移到相鄰的紅色球上。圖D就是實際拍到的照片啦,白色的小點就是DAPI染的細胞核。
看到間充質幹細胞在康寧低濃度Synthemax II表面微載體上生長了,較真的你可能還是半信半疑,這新長出來的細胞還是幹細胞嗎?不瞞您說,小編也想到了。咱們來驗明正身哈!
我們檢測了間充質幹細胞陽性和陰性marker。在兩種培養基裡生長的細胞,經過流式檢測,間充質幹細胞陽性marker CD73和CD105陽性率都在90%以上,stemgro培養基更是將陽性率維持到了98%。而陰性marker CD14和CD45都小於1%。
是不是幹細胞,分化能力是硬功夫!
這是兩種培養基配合康寧低濃度Synthemax II表面微載體培養的間充質幹細胞進行三胚層組織分化的研究。從康寧微載體表面消化下來的細胞在三周的定向分化後,分別用油紅O,茜素紅和阿爾新藍染色,證實分化出了脂肪、骨和軟骨組織。