Ac-LEHD-pNA(Caspase 9顯色底物)

2021-01-09 ChemicalBook

來源：ChemicalBook

背景[1-7]

Ac-LEHD-pNA(Caspase 9顯色底物)是caspase 9的顯色底物，Ac-LEHD-pNA可被caspase 9催化產生黃色的pNA(p-nitroaniline)，從而可以通過測定吸光度來檢測caspase 9的活性。Caspase(Cysteine-requiring Aspartate Protease)是一個在細胞凋亡過程中起重要作用的蛋白酶家族。pNA在405nm附近有強吸收。

Caspase 9也稱ICE-LAP6或Mch6，有時被寫作caspase-9或caspase 9，是細胞凋亡信號轉導過程中比較上遊的一個caspase。線粒體釋放細胞色素c以後，caspase 9可以和細胞色素c以及Apaf1形成複合物，同時被激活。激活的caspase 9可以激活細胞凋亡的最關鍵酶caspase 3，從而促進後續的細胞凋亡信號。Caspase 9的激活可以通過磷酸化進行調控。Caspase 9在人中由CASP9編碼基因對許多組織中發現的細胞凋亡途徑至關重要。

活性caspase-9通過切割作為起始半胱天冬酶起作用，從而激活下遊劊子手caspase，啟動細胞凋亡。一旦被激活，caspase-9繼續切割caspase-3，-6和-7，啟動caspase級聯，因為它們切割了幾個其他細胞靶標。當半胱天冬酶-9無活性時，它以細胞形式存在於胞質溶膠中作為酶原。然後由apaf-1中的CARDs招募並激活，識caspase-9中的CARDs。

caspase-9的缺乏很大程度上影響了大腦及其發育。與其他caspase相比，這種caspase的突變或缺陷的影響是有害的。caspase-9在細胞凋亡中的起始作用是導致非典型caspase-9患者出現嚴重影響的原因。具有不足的胱天蛋白酶-9的小鼠具有受影響或異常腦的主要表型。由於細胞凋亡減少導致額外神經元增加的大腦是在caspase-9缺陷小鼠中觀察到的表型的一個例子。由於異常發育的大腦，在圍產期沒有caspase-9純合的那些純合子。

在人類中，caspase-9的表達在組織與組織之間變化，並且不同水平具有生理學作用。低量的半胱天冬酶-9導致癌症和神經退行性疾病，如阿爾茨海默病。單核苷酸多態性（SNP）水平和caspase-9全基因水平的進一步改變可導致與非霍奇金淋巴瘤相關的種系突變。特定的多態性在啟動子胱天蛋白酶-9的增強在該胱天蛋白酶9表示的速率，並且這可以增加一個人的風險肺癌。

應用[8]

Ac-LEHD-pNA(Caspase 9顯色底物)可用於細胞凋亡的機制研究：

Caspases通常以無活性的酶原形式存在於細胞中，在細胞凋亡信號刺激下，Caspases重新組裝成含有兩個大亞基和兩個小亞基的成熟四聚體活性形式。活化的Caspases參與一系列蛋白質的降解作用，最終導致細胞的死亡。

通常有兩條主要途徑激活Caspases:一條是通過細胞表面死亡受體途徑，例如特異性配體結合的Fas等腫瘤壞死因子(TNF)家族，導致Caspase-8的激活，Caspase-8再依次激活下遊的效應Caspase,如Caspase-3,-6,和-7；另一條是線粒體途徑，細胞內細胞凋亡信號觸發線粒體釋放cytochrome c,隨後cytochrome c與胞漿中的凋亡蛋白酶激活因子-1(Apaf-1)結合，後者募集Caspase-9並誘導其加工和激活。

線粒體外膜通透性的改變和cytochrome c的釋放受Bcl-2家族蛋白質的調節，Bcl-2家族中促凋亡蛋白質分子Bax和Bak可做特定的蛋白質釋放通道。細胞凋亡的失衡可引起腫瘤細胞的過度增殖以及其對抗癌藥物的耐受，闡明細胞凋亡過程的分子機制，從而找到實施有效細胞凋亡方法，是治療人類癌症的理想策略。

參考文獻

[1]Inhibition of SREBP by a Small Molecule,Betulin,Improves Hyperlipidemia and Insulin Resistance and Reduces Atherosclerotic Plaques[J].Jing-Jie Tang,Jia-Gui Li,Wei Qi,Wen-Wei Qiu,Pei-Shan Li,Bo-Liang Li,Bao-Liang Song.Cell Metabolism.2011(1)

[2]Hepatocellular Carcinoma:Current Management and Perspectives for the Future[J].Nuh N.Rahbari,Arianeb Mehrabi,Nathan M.Mollberg,Sascha A.Müller,Moritz Koch,Markus W.Büchler,Jürgen Weitz.Annals of Surgery.2011(3)

[3]Recognition of Smacmimetic compounds by the BIR domain of cIAP1[J].FedericaCossu,FrancescaMalvezzi,GiuliaCanevari,EloiseMastrangelo,DanieleLecis,DomenicoDelia,PierfaustoSeneci,CarloScolastico,MartinoBolognesi,MarioMilani.Protein Science.2010(12)

[4]Multistep and multitask Bax activation[J].Lina Ghibelli,Marc Diederich.Mitochondrion.2010(6)

[5]Poly(ADP-ribose)polymerase-1(PARP-1)and its therapeutic implications[J].Rupinder K.Sodhi,Nirmal Singh,Amteshwar S.Jaggi.Vascular Pharmacology.2010(3)

[6]The intrinsic apoptotic signaling pathway in gastric adenocarcinomasof Brazilian patients:Immunoexpression of the Bcl-2 family(Bcl-2,Bcl-x,Bak,Bax,Bad)determined by tissue microarray analysis[J].Luis Barrezueta,Celina Oshima,Flávio Lima,Henrique De Oliveira Costa,Thiago Gomes,Ricardo Neto,Marcello De Franco.Molecular Medicine Reports.2010(2)

[7]Mitochondrial signaling in cell death via the Bcl-2 family[J].Brian Leibowitz,Jian Yu.Cancer Biology&Therapy.2010(6)

[8]李楊.樺木醇誘導的人源癌細胞凋亡過程中Bax、Bak以及Caspase-9重要調控作用的研究[D].吉林大學，2011.

相關焦點

  • 科學家揭示天然免疫中caspase活化和識別GSDMD介導細胞焦亡的完整分子機理
    傳統上對caspase蛋白酶的一個重要的認識，是其通過識別底物蛋白中具有xxxD（D為天冬氨酸，x為其它胺基酸）序列特徵的四肽並在D後切割肽鍵實現對底物蛋白的活化，不同caspase對四肽序列的選擇性偏好不同從而具有不同的底物識別譜。
  • 神奇的蛋白酶家族——Caspase!
    Caspase是一類蛋白酶家族，成員較多，在人類中已經鑑定了11種不同的caspase。根據其蛋白酶序列的同源性可分為3個亞族：caspase-1亞族包括 caspase-1、4、5、11；caspase-2亞族包括caspase-2、9；caspase-3亞族包括Caspase-3、6、7、8、10。
  • ELISA檢測中常見的酶及底物
    在ELISA測定時，OPD色原底物的具體配方為①顯色底物溶液：在0.1mol/L枸櫞酸鹽緩衝液(pH5.0)中含20 mmol/L OPD和12 mmo!/L H202，或10 mmol/L OPD和5.5mmol/L H202;②終止液：2 mol/L硫酸(含0.1 mol/L亞硫酸鈉);③測定波長：492nm。　　TMB是一種優於OPD的新型HRP色原底物。
  • 天然免疫中caspase活化和識別GSDMD介導細胞焦亡的完整分子機理
    2015年邵峰團隊的一項重要工作，是發現天然免疫中細胞焦亡是通過活化的半胱氨酸蛋白酶caspase-1和caspase-4/5/11切割共同的底物蛋白GSDMD而引發（Shi et al., Nature 2015）。
  • 震撼新品首發—Caspase1、Caspase3 活性檢測試劑盒
    1酶活性或純化的caspase 1酶活性的試劑盒。Caspase 1也稱interkeukin 1β conberting enzyme (ICE)，有時被寫作caspase-1或caspase 1，是caspase家族中唯一可以剪切IL-1β前體蛋白或IL-18前體產生相應成熟的細胞因子的caspase。
  • 【學術前沿】韓家淮/莫瑋合作揭示解除Caspase-8對Necroptosis抑制...
    2020年9月25日，細胞應激生物學國家重點實驗室，廈門大學生命科學學院韓家淮課題組和莫瑋課題組合作在Molecular Cell 雜誌上發表題為「A Non-canonical PDK1-RSK Signal Diminishes Pro-Caspase-8-Mediated Necroptosis Blockade」 的研究文章，報導了非經典的PDK1-RSK信號解除
  • 化學發光底物魯米諾應用於蛋白印跡WB
    魯米諾luminol，也叫發光氨，可以檢測處極少量的過氧化氫，通常作為過氧化物酶的底物用於各類生化檢測，靈敏度非常高且易於自動化，其中蛋白質印跡WB實驗就經常使用魯米諾製成的ECL發光液。蛋白或多肽樣品經過PAGE分離後轉移到載體硝酸纖維素薄膜上，固相載體以非共價鍵吸附蛋白質且保證活性，蛋白質作為抗原與抗體反應，再與酶或同位素標記的第二抗體起反應，經過底物顯色或放射自顯影以檢測特異性目的基因表達的蛋白成分。該技術也廣泛應用於檢測蛋白水平的表達。
  • 腫瘤細胞通過劫持caspase 9信號來抑制輻射誘導的免疫反應
    腫瘤細胞通過劫持caspase 9信號來抑制輻射誘導的免疫反應 作者：小柯機器人 發布時間：2020/3/31 13:12:35 美國德克薩斯大學西南醫學中心傅陽心、喬健等研究人員合作取得新進展。
  • 科研的成功之路(pathway)上繞不過去的靶點—caspase!
    目前認為，細胞焦亡由包括caspase-1和caspase-4/5/11在內的炎性caspase活化而誘發。Caspase-1在病原信號誘導形成的炎症小體複合物作用下被激活；邵峰實驗組之前的研究證實caspase-4/5/11是細菌脂多糖（LPS，又稱內毒素）的胞內受體，在結合LPS後發生寡聚而被活化。
  • LED色溫與顯色指數講解
    也就是當光源的色品與完全輻射體在某一溫度下的色品最接近，即在1960CIE-UCS色品圖上的色品差最小時，則該完全輻射體的溫度稱為該光源的相關色溫R1。用於照明工程的LED，尤其是白光LED，除表現顏色外，更重要的特性往往是周圍的物體在LED光照明下所呈現出來的顏色與該物件在完全輻射(如日光)下的顏色是否一致，即所謂的顯色特性。
  • cell death&differ:詳解肺癌重要負向調節分子—caspase-2
    2015年4月10日 訊 /生物谷BIOON/ --Caspase-2是caspase家族的一員。眾所周知，caspase家族廣泛參與了細胞凋亡的信號轉導過程，然而caspase-2對於細胞凋亡的影響卻並不明顯：缺失了caspase-2的小鼠能夠正常存活與發育，其體內的細胞也能夠發生正常的凋亡現象。
  • 新型NanoLuc螢光素酶底物助力動物體內雙色生物發光成像
    新型NanoLuc螢光素酶底物助力動物體內雙色生物發光成像 作者：小柯機器人 發布時間：2020/7/16 16:00:48 2020年7月13日，史丹福大學Michael Z.
  • 【酵母單/雙雜交】 酵母顯色實驗,X-gal還是X-α-gal ?
    X-Gal是E.coli β-半乳糖苷酶（LacZ）的反應底物，而X-α-gal是酵母α-半乳糖苷酶（MEL1）的反應底物。X-α-gal用作酵母雙雜交系統中藍白篩選的篩選標記。二者不可以互相替換。X-α-Gal檢測酵母MEL1基因的激活。MEL1是GAL4酵母雙雜交系統的一個報告基因，編碼分泌型的α-半乳糖苷酶。
  • 【Protocol】 酵母單/雙雜交顯色實驗,X-gal還是X-α-gal ?
    X-Gal是E.coli β-半乳糖苷酶（LacZ）的反應底物，而X-α-gal是酵母α-半乳糖苷酶（MEL1）的反應底物。X-α-gal用作酵母雙雜交系統中藍白篩選的篩選標記。二者不可以互相替換。X-α-Gal檢測酵母MEL1基因的激活。MEL1是GAL4酵母雙雜交系統的一個報告基因，編碼分泌型的α-半乳糖苷酶。
  • 2020夏日顯白髮色推薦!5大發色趨勢 黃皮星人染了顯白2個度
    2020夏日顯白髮色推薦！5大發色趨勢 黃皮星人染了顯白2個度時間：2020-05-25 13:39   來源：小楠時尚頻道   責任編輯：沫朵 川北在線核心提示：原標題：2020夏日顯白髮色推薦！5大發色趨勢 黃皮星人染了顯白2個度 每每走進髮廊總是對於新髮型無從下手嗎？那些看似亮眼的發色、浪漫的卷度到底適不適合自己？
  • 2019年很火的5種顯白髮色,比悶青色更顯膚色,顯氣質!
    說實話，剪了好看的髮型，不來點發色做搭配，還是差點兒意思的！所以小瑤今天就搜集了一些2019年超火超顯白顯氣質的幾款特別適合夏天的發色，要知道選對發色堪比整容哦！那麼感興趣的仙女就繼續往下看看吧~ 1、玫瑰金色玫瑰金，這款顏色屬於潮色中的暖色系，這是一款在2019年很火很顯皮膚白的發色，在這個初夏可以給我們帶來溫暖的感覺，時尚感絕對的強，而且更凸顯出髮型的層次變化，只要在髮絲表面稍微染淡兩三個色階
  • caspase3——抗癌衛士的「背叛」
    核心提示：除此之外，研究人員在caspase－3缺失小鼠中發現，由於caspase－3缺失，化合物誘導的皮膚癌發生顯著下降。更進一步的，抑制EndoG活性能夠顯著降低輻射誘導的DNA損傷和癌基因轉化，這表明EndoG在caspase－3促癌途徑中是caspase－3的一個下遊效應因子。
  • Caspase-2酶抑制劑可以改善非酒精性脂肪性肝病
    近日，加州大學聖地牙哥分校醫學院的研究人員發現，caspase-2蛋白酶是導致小鼠和人類臨床標本中非酒精性脂肪性肝炎（NASH）的一個關鍵驅動因素。這篇題為「ER Stress Drives Lipogenesis and Steatohepatitis via Caspase-2 Activation of S1P」的研究成果公布在9月13日的Cell雜誌上。     研究人員通過鑑定caspase-2的關鍵作用，指出這種酶的抑制劑可以提供一種有效的方法來阻止導致NASH的致病進展，甚至逆轉早期症狀。
  • 9速聖母峰高頂四座凱旋版 限量定製雙色車身 碳纖包圍更顯奢華
    今日就走進9速聖母峰高頂四座凱旋版，與房車兄弟一同領悟這一方寸天地所容納的無限樂趣，享受肆意散發的魅力無限。9速聖母峰高頂四座凱旋版採用定製級獨特限量雙色車身，精緻配置更顯大氣，定製級別非凡無比。整體採用定製全碳纖包圍，高端材質造就奢華無限。旋壓鍛造旋風輪轂，承受更大外界壓力，開啟一路暢快之旅。